当前位置: 首页 > 期刊 > 《中华医药杂志》 > 2005年第7期
编号:10706863
人可溶性TRAIL在包含体复性过程中快速纯化
http://www.100md.com 《中华医药杂志》 2005年第7期
可溶性TRAIL,可溶性TRAIL;包含体;复性;纯化;凋亡,1材料与方法,2结果,3讨论,【参考文献】
     【摘要】 目的 对大肠杆菌中表达的人可溶性TRAIL包含体进行变性、复性和快速纯化,以制备具有抗肿瘤活性的人TRAIL蛋白。 方法 通过热诱导使带有人TRAIL胞外段编码基因的重组热诱导原核表达载体进行表达,用6M盐酸胍使包含体变性后,进行稀释和透析复性,再经高速离心法除掉杂蛋白和未复性蛋白进行纯化。 结果 在热诱导下TRAIL以包含体形式高效表达,变性的包含体蛋白经透析后其复性率可以达40%以上,并且可以经离心快速提纯,SDS-PAGE检测其纯度可达98%,夹心法ELISA鉴定表明复性后的TRAIL蛋白可以被特异性的单抗识别,而未复性的包含体蛋白则否。抗肿瘤试验表明复性的TRAIL蛋白能引起K562细胞快速凋亡。 结论 获得一种有效的TRAIL包含体复性的方法,并且在复性过程中能够通过离心快速简便的纯化。

    【关键词】 可溶性TRAIL;包含体;复性;纯化;凋亡

    Rapid purification of human soluble TRAIL in the procedure of inclusion bodies renaturation

    TIAN Sheng-he,YANG Jing-sheng,YAN Hua,et al.

    Wuhan Institute of Biological Products,Wuhan430060,China

    【Abstract】 Objective Inclusion bodies of human soluble TRAIL which expressed in Escherichia coli DH5αwere solubilized and refolded as well as rapid purified in order to prepare antitumor TRAIL moleculars.Methods A re-combinant temperature inducible prokaryotic expression vector coding for human soluble TRAIL was expressed under temperature inducing.Inclusion bodies of human soluble TRAIL were solubilized with6M GuHCL and refolded through diluting and dialysis in a buffer system ......

您现在查看是摘要页,全文长 9174 字符