人ECK基因外显子3的实验研究
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孔令洪. 李瑶琛. 王一理. 司履生.
eck(ephA2)基因.基因克隆.聚合酶链反应.p53蛋白.ZR-75-1细胞系.
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孔令洪. 李瑶琛. 王一理. 司履生.
西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所. 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所 陕西西安710061 .
【关键词】
eck(ephA2)基因. 基因克隆. 聚合酶链反应. p53蛋白. ZR-75-1细胞系.
【发表年期页】
2003,5; 0
【摘要】
目的 建立人eck基因外显子3(exon 3)的克隆与鉴定方法,研究其在ZR 75 1细胞系中的突变情况。方法 设计一对eck基因exon 3特异性引物,提取人正常皮肤组织和乳腺癌细胞系ZR 75 1基因组DNA ,并以此作为模板,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增eck基因exon 3片段,克隆入中介载体pUCm T中构建重组质粒,转化JM10 9大肠杆菌,扩增后经酶切、PCR初步鉴定后,进行序列分析。结果 ①从正常皮肤组织上皮细胞、ZR 75 1细胞系基因组DNA中,经PCR扩增,获得了人eck基因exon 3片段;②建立了正常皮肤组织、ZR 75 1细胞系eck基因exon 3片段的克隆;③ZR 75 1细胞系中eck基
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