小鼠抗人T淋巴细胞表面抗原噬菌体抗体库的构建及筛选
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王剑利. 王一理. 司履生.
抗体库.噬菌体展示.单链Fv抗体.T淋巴细胞.
参见附件(209kb)。
王剑利. 王一理. 司履生.
西安交通大学生命科学院免疫病理研究室. 西安交通大学生命科学院免疫病理研究室 西安710061 .
【关键词】
抗体库. 噬菌体展示. 单链Fv抗体. T淋巴细胞.
【发表年期页】
2002,3; 0
【摘要】
目的 构建并筛选小鼠抗人静息 /活化T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示抗体库。方法 以人静息 /活化T淋巴细胞免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞 ,RT -PCR扩增VH 和VK 基因 ,拼接为ScFv ,插入噬菌粒载体转化大肠杆菌 ,构建了噬菌体展示抗体库 ,以人T淋巴细胞为靶抗原 ,对该库进行了 3轮淘洗 ,ELISA方法鉴定噬菌体抗体。结果 成功构建了最大实际库容量为 1 .75× 1 0 6的小鼠抗人静息T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示ScFv抗体库和小鼠抗人活化T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示ScFv抗体库。结论 所构建的抗体库可进一步用于对T淋巴细胞表面蛋白抗原的差异显示分析及
王剑利. 王一理. 司履生.
西安交通大学生命科学院免疫病理研究室. 西安交通大学生命科学院免疫病理研究室 西安710061 .
【关键词】
抗体库. 噬菌体展示. 单链Fv抗体. T淋巴细胞.
【发表年期页】
2002,3; 0
【摘要】
目的 构建并筛选小鼠抗人静息 /活化T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示抗体库。方法 以人静息 /活化T淋巴细胞免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞 ,RT -PCR扩增VH 和VK 基因 ,拼接为ScFv ,插入噬菌粒载体转化大肠杆菌 ,构建了噬菌体展示抗体库 ,以人T淋巴细胞为靶抗原 ,对该库进行了 3轮淘洗 ,ELISA方法鉴定噬菌体抗体。结果 成功构建了最大实际库容量为 1 .75× 1 0 6的小鼠抗人静息T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示ScFv抗体库和小鼠抗人活化T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示ScFv抗体库。结论 所构建的抗体库可进一步用于对T淋巴细胞表面蛋白抗原的差异显示分析及
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