抗人CD3单链抗体四聚体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定
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武国军. 王禾. 王栋. 于磊. 王智.
参见附件。
武国军. 王禾. 王栋. 于磊. 王智. 袁建林. 张波. 药立波.
第四军医大学西京医院泌尿外科 . 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 陕西西安710032 .
【关键词】
CD3. 单链抗体. 基因表达.
【发表年期页】
2003,6; 0
【摘要】
目的 将抗人CD3单链抗体(scFv) /人p5 3四聚功能域融合基因转染到HeLa细胞,进行真核表达和活性测定。方法 将抗人CD3scFv /人p5 3四聚功能域融合基因克隆入真核分泌表达载体pSecTag2 B中,转染HeLa细胞进行表达,表达产物纯化后利用流式细胞仪进行活性测定。结果 表达产物经SDS PAGE和Westernblot证实,为Mr约35 0 0 0的特异蛋白条带。纯化后经流式细胞仪检测,可特异性地结合人外周血单个核细胞(PBMCs) ,亲和力高于scFv。结论 获得了可与PBMCs特异性结合的抗人CD3scFv四聚体,为进一步临床应用奠定了基础
武国军. 王禾. 王栋. 于磊. 王智. 袁建林. 张波. 药立波.
第四军医大学西京医院泌尿外科 . 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 陕西西安710032 .
【关键词】
CD3. 单链抗体. 基因表达.
【发表年期页】
2003,6; 0
【摘要】
目的 将抗人CD3单链抗体(scFv) /人p5 3四聚功能域融合基因转染到HeLa细胞,进行真核表达和活性测定。方法 将抗人CD3scFv /人p5 3四聚功能域融合基因克隆入真核分泌表达载体pSecTag2 B中,转染HeLa细胞进行表达,表达产物纯化后利用流式细胞仪进行活性测定。结果 表达产物经SDS PAGE和Westernblot证实,为Mr约35 0 0 0的特异蛋白条带。纯化后经流式细胞仪检测,可特异性地结合人外周血单个核细胞(PBMCs) ,亲和力高于scFv。结论 获得了可与PBMCs特异性结合的抗人CD3scFv四聚体,为进一步临床应用奠定了基础
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