人GLUT4基因的克隆及原核表达的初步实验研究
http://www.100md.com
焦凯. 张菊. 孙脊峰. 刘晓宇
参见附件(155kb)。
焦凯. 张菊. 孙脊峰. 刘晓宇
第四军医大学唐都医院内分泌科. 第四军医大学基因诊断研究所. 第四军医大学唐都医院肾内科. 第四军医大学唐都医院内分泌科 陕西西安710038 .
【关键词】
GLUT4. 克隆. 表达.
【发表年期页】
2004,2; 0
【摘要】
目的通过反转录聚合酶链方法,从人新鲜手术肌肉组织获得人葡萄糖转运子4(GLUT4)cDNA基因,并分别克隆入测序载体、表达载体,获得具有正确序列的目的基因及其原核表达产物,为其进一步的抗体制备、活性鉴定及研究应用奠定物质基础。方法经GenBank在线检索,设计、确定人GLUT4cDNA基因特异引物,采用反转录聚合酶链(RTPCR)方法从一例手术的人新鲜腹部肌肉组织总RNA模板中,获得人GLUT4表达片段cDNA的基因,经克隆入测序载体pGEM3zf(-)测序,验证cDNA大小、完整性及序列。再克隆入表达载体pBV220,经温度诱导,在E.coli获得表达。结果以设计的特异引物,从人肌肉组织
焦凯. 张菊. 孙脊峰. 刘晓宇
第四军医大学唐都医院内分泌科. 第四军医大学基因诊断研究所. 第四军医大学唐都医院肾内科. 第四军医大学唐都医院内分泌科 陕西西安710038 .
【关键词】
GLUT4. 克隆. 表达.
【发表年期页】
2004,2; 0
【摘要】
目的通过反转录聚合酶链方法,从人新鲜手术肌肉组织获得人葡萄糖转运子4(GLUT4)cDNA基因,并分别克隆入测序载体、表达载体,获得具有正确序列的目的基因及其原核表达产物,为其进一步的抗体制备、活性鉴定及研究应用奠定物质基础。方法经GenBank在线检索,设计、确定人GLUT4cDNA基因特异引物,采用反转录聚合酶链(RTPCR)方法从一例手术的人新鲜腹部肌肉组织总RNA模板中,获得人GLUT4表达片段cDNA的基因,经克隆入测序载体pGEM3zf(-)测序,验证cDNA大小、完整性及序列。再克隆入表达载体pBV220,经温度诱导,在E.coli获得表达。结果以设计的特异引物,从人肌肉组织
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