LT-B转基因烟草植株的建立
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刘红莉. 雷霆. 张铮. 郑瑾. 来宝长. 孔令洪. 王?之. 王一理. 司履生
大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位.转基因烟草.植物疫苗.根瘤农杆菌.
参见附件(198kb)。
刘红莉. 雷霆. 张铮. 郑瑾. 来宝长. 孔令洪. 王?之. 王一理. 司履生
西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所. 陕西师范大学生命科学院. 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所 陕西西安710061 . 陕西西安710062 .
【关键词】
大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位. 转基因烟草. 植物疫苗. 根瘤农杆菌.
【发表年期页】
2004,5; 425-429
【摘要】
目的 构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位(LT B)基因的植物表达载体,并建立LT B转基因烟草植株。方法 用PCR从pMMB6 8扩增LT B编码基因,将其克隆于pUCmT和pBI12 1载体,进而构建植物表达双元载体pBI LTB ,LT B基因由CaMV 35S启动子控制表达;将pBI LTB用电穿孔法导入根瘤农杆菌LBA4 4 0 4 ;采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草,获得转基因烟草植株;用PCR、Southern、Westernblot和ELISA检测转基因植株。结果 经PCR及Southern杂交分析,共发现12株烟草的基因组中有LT B基因整合;Westernblot和ELISA分析表明有9株转基因烟草能有效表达LT B蛋白,其表
刘红莉. 雷霆. 张铮. 郑瑾. 来宝长. 孔令洪. 王?之. 王一理. 司履生
西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所. 陕西师范大学生命科学院. 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所 陕西西安710061 . 陕西西安710062 .
【关键词】
大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位. 转基因烟草. 植物疫苗. 根瘤农杆菌.
【发表年期页】
2004,5; 425-429
【摘要】
目的 构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位(LT B)基因的植物表达载体,并建立LT B转基因烟草植株。方法 用PCR从pMMB6 8扩增LT B编码基因,将其克隆于pUCmT和pBI12 1载体,进而构建植物表达双元载体pBI LTB ,LT B基因由CaMV 35S启动子控制表达;将pBI LTB用电穿孔法导入根瘤农杆菌LBA4 4 0 4 ;采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草,获得转基因烟草植株;用PCR、Southern、Westernblot和ELISA检测转基因植株。结果 经PCR及Southern杂交分析,共发现12株烟草的基因组中有LT B基因整合;Westernblot和ELISA分析表明有9株转基因烟草能有效表达LT B蛋白,其表
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