大豆异黄酮对小鼠实验性肝损伤的保护作用
摘要：目的：探讨大豆异黄酮对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法：采用四氯化碳(CCl4)、硫代乙酰胺(TAA)、扑热息痛(AAP)致小鼠急性肝损伤模型，测定小鼠血清SGPT活性。结果：大豆异黄酮对四氯化碳、扑热息痛致小鼠实验性肝损伤有明显保护作用。大豆异黄酮对硫代乙酰胺所致小鼠实验性肝损伤无明显的保护作用。结论：大豆异黄酮可明显降低四氯化碳、扑热息痛致小鼠急性肝损伤模型血清SGPT活性。而对硫代乙酰胺致小鼠急性肝损伤模型血清SGPT活性无明显作用。
关键词：大豆异黄酮；肝损伤；谷丙转氨酶
Protective Effects of Soybean Isoflavones on Experimental Hepatic Injuries
ZENG Jing1, LIU Chunqi2, JIANG Lixia2, YE Heyang1
(1.Department of Pharmacology, Gannan Medical College,Ganzhou, Jiangxi 341000, China; 2.Affiliated Hospital of Gannan Medical College, Ganzhou, Jiangxi 341000, China)
Abstract:Objective:To study the protective effect of soybean isoflaveones on experimental hepatic injuries.Methods:The activity of serum SGPT were measured in the model mice of hepatic injury induced by carbon tetrachloride (CCl4),Acetaminophen (AAP) and Thioacetamide (TAA).Results:The serum SGPT activity was significantly lowered in the model mice of hepatic injuries induced by CCl4, AAP and TAA after soybean isoflavones was given orally.Conclusion:Soybean isoflavones exhibited protective effect on experimental hepatic injuries.
Key words:Soybean isoflavones;Hepatic injury;SGPT
大豆异黄酮(soybean isoflavones)为豆科植物大豆的成熟种子，是大豆生长中形成的一类次生代谢物。大豆异黄酮由于能与雌激素受体给合，具有雌激素样作用，故称之为植物激素。近年来对大豆及大豆异黄酮的研究发现大豆异黄酮具广泛的生物效应，能预防和治疗癌症、降低血脂、抗动脉粥样硬化、改善妇女更年期综合症、抗辐射、抗炎、改善骨质疏松等[1～7]。大豆异黄酮的基本骨架为3-苯基苯并二氢呋喃，主要有黄豆苷元(glycitein;7,4-二羟基异黄酮)、染料木素(genistein;5,7，4-三羟基异黄酮)[8]。本实验报道大豆异黄酮对小鼠实验性肝损伤的保护作用。
1实验材料
1.1药品大豆异黄酮由天津尖峰天然产物研究开发有限公司提供，批号20040410，临用前用生理盐水配成0.01 、0.02 mg/ml的大豆异黄酮溶液。四氯化碳，上海长江化工厂，批号84003；硫代乙酰胺，陶湾化工厂，批号881219；扑热息痛，汕头金石制药总厂，批号040304。
1.2实验动物健康成年昆明种小鼠96只(由江西省医学实验动物中心提供)，清洁级，雌雄各半，体质量(18～22)g，标准饲料，自由饮食。实验动物合格证号：JXA2004119。实验动物机构许可证号：021—9703。
1.3仪器日本产日立-7060型全自动生化仪(HITACHI)。
2方法[9～11]
2.1大豆异黄酮对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响小鼠32只，随机分为4组，每天自然饮用0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液或双蒸水，共7 d，末次给药后1 h后，给药组按0.01 mg/g ip 0.1% CCl4花生油溶液，模型组ip同体积的花生油溶液，对照组ip同体积的生理盐水，禁食16 h后，取血分离血清，测定血清谷丙转氨酶(SGPT)的活性。
2.2大豆异黄酮对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响小鼠32只，随机分为4组，每天自然饮用0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液或双蒸水，共7 d，末次给药24 h后，给药组按150.0 mg/kg ip扑热息痛溶液，模型组ip同体积的扑热息痛溶液，对照组ip同体积的生理盐水溶液，禁食16 h后，取血分离血清，测定血清谷丙转氨酶(SGPT)的活性。
2.3大豆异黄酮对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响小鼠32只，随机分为4组，每天自然饮用0.01 mg/ml、0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液或双蒸水，共7 d，末次给药后1 h后，给药组按50.0 mg/kg ip硫代乙酰胺溶液，模型组ip同体积的硫代乙酰胺溶液，对照组ip同体积的生理盐水溶液，禁食16 h后，取血分离血清，测定血清谷丙转氨酶(SGPT)的活性。
2.4数据处理与统计数据用±s表示，组间比较用t检验。
3结果
3.1大豆异黄酮对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响结果见表1。由表1可见，0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液对0.1% CCl4四氯化碳致小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(SGPT)活性的升高具有明显的拮抗作用。
表1大豆异黄酮对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响(±s)(略)
3.2大豆异黄酮对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响结果见表2。由表2可见，0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液可明显降低150.0 mg/kg扑热息痛致小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(SGPT)活性。
3.3大豆异黄酮对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响结果见表3。由表3可见，0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液对50.0 mg/kg硫代乙酰胺致小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(SGPT)活性无影响。
表2大豆异黄酮对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响(±s)(略)
表3大豆异黄酮对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响(±s)(略)
4讨论
四氯化碳、扑热息痛、硫代乙酰胺损伤肝脏的生化机理不同。一般认为，四氯化碳损伤肝组织机制是四氯化碳经肝细胞色素P450代谢激活后生成三氯甲基(·CCl3)自由基，可引起生物膜脂质过氧化，造成膜结构和功能损伤，蛋白质等物质合成代谢发生障碍。而硫代乙酰胺损伤肝细胞机理可能是损害了细胞膜结构和功能。大剂量扑热息痛经肝肝细胞色素P450代谢后，生成的半醌自由基过多使肝内GSH消耗，并与肝细胞蛋白质进行共价结合，引起肝细胞坏死。以上实验结果提示：大豆异黄酮对四氯化碳、扑热息痛所致小鼠急性肝损伤均有明显的保护作用，能使急性肝损伤小鼠血清SGPT活性明显降低，具有明显的保肝作用。说明大豆异黄酮对三氯甲基(·CCl3)、半醌自由基，引起生物膜脂质过氧化，造成膜结构和功能损伤，蛋白质等物质合成代谢所引起的障碍及肝细胞坏死具有保护作用。而大豆异黄酮对硫代乙酰胺所致小鼠肝细胞膜结构功能无明显的保护作用。
参考文献：
[1]李琳，钱忠明.大豆异黄酮的药理学作用和保健功能的研究进展[J].中国药学杂志，2002，37(10)：724723.
[2]刘英华，黄国伟，常红，等.大豆异黄酮对氧化损伤血管内皮细胞抗氧化作用的研究[J].天津医科大学学报，2003，9(1)：1012.
[3]金宏，刘丽，王先远，等.大豆异黄酮抗辐射作用的实验研究[J].氨基酸和生物资源，2004，26(3)：2326.
[4]杨镇洲，糜漫天，朱俊东，等.大豆异黄酮抑制BcBp-37细胞增殖与TGF-β关系的研究[J].第三军医大学学报，2001，23(4)：434437.
[5]马吉祥，王勤忠，苏军英，等.大豆异黄酮诱导人食管癌裸鼠移植瘤细胞调亡[J].中国肿瘤，2004，13(1)：3437.
[6]那晓琳，禹萍，李璐璐，等.大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨矿物质含量及骨密度的影响[J].中国临床康复，2004，8(15)：28902891.
[7]朱翠凤，张帆，徐晓燕，等.大豆异黄酮等复合抗氧化剂对Ⅱ型糖尿病患者血脂代谢的影响[J].中国临床康复，2004，8(9)：16741676.
[8]毛峻琴，宓鹤鸣.大豆异黄酮的研究进展[J].中草药，2000，31(1)：6163.
[9]祁雪，刘秀梅，陈晓光，等.鹿茸口服液对小鼠实验性肝损伤的保护作用[J].中药药理与临床，2004，20(1)：4243.
[10]王晓东，赵军宁，彭龙玲，等.关幼波验方制剂肝炎康颗粒剂对实验性肝损伤的作用研究[J].中药药理与临床，2004，20(1)：3840.
[11]赵鹏，姚思宁，李彬，等.皂甙对乙醇性肝损伤的保护作用[J].中国临床康复，2004，8(30)：66866687.
(1.赣南医学院，江西 赣州341000；2.赣南医学院附属医院，江西 赣州341000), 百拇医药(曾靖 刘春棋 江丽霞 叶和杨)
关键词：大豆异黄酮；肝损伤；谷丙转氨酶
Protective Effects of Soybean Isoflavones on Experimental Hepatic Injuries
ZENG Jing1, LIU Chunqi2, JIANG Lixia2, YE Heyang1
(1.Department of Pharmacology, Gannan Medical College,Ganzhou, Jiangxi 341000, China; 2.Affiliated Hospital of Gannan Medical College, Ganzhou, Jiangxi 341000, China)
Abstract:Objective:To study the protective effect of soybean isoflaveones on experimental hepatic injuries.Methods:The activity of serum SGPT were measured in the model mice of hepatic injury induced by carbon tetrachloride (CCl4),Acetaminophen (AAP) and Thioacetamide (TAA).Results:The serum SGPT activity was significantly lowered in the model mice of hepatic injuries induced by CCl4, AAP and TAA after soybean isoflavones was given orally.Conclusion:Soybean isoflavones exhibited protective effect on experimental hepatic injuries.
Key words:Soybean isoflavones;Hepatic injury;SGPT
大豆异黄酮(soybean isoflavones)为豆科植物大豆的成熟种子，是大豆生长中形成的一类次生代谢物。大豆异黄酮由于能与雌激素受体给合，具有雌激素样作用，故称之为植物激素。近年来对大豆及大豆异黄酮的研究发现大豆异黄酮具广泛的生物效应，能预防和治疗癌症、降低血脂、抗动脉粥样硬化、改善妇女更年期综合症、抗辐射、抗炎、改善骨质疏松等[1～7]。大豆异黄酮的基本骨架为3-苯基苯并二氢呋喃，主要有黄豆苷元(glycitein;7,4-二羟基异黄酮)、染料木素(genistein;5,7，4-三羟基异黄酮)[8]。本实验报道大豆异黄酮对小鼠实验性肝损伤的保护作用。
1实验材料
1.1药品大豆异黄酮由天津尖峰天然产物研究开发有限公司提供，批号20040410，临用前用生理盐水配成0.01 、0.02 mg/ml的大豆异黄酮溶液。四氯化碳，上海长江化工厂，批号84003；硫代乙酰胺，陶湾化工厂，批号881219；扑热息痛，汕头金石制药总厂，批号040304。
1.2实验动物健康成年昆明种小鼠96只(由江西省医学实验动物中心提供)，清洁级，雌雄各半，体质量(18～22)g，标准饲料，自由饮食。实验动物合格证号：JXA2004119。实验动物机构许可证号：021—9703。
1.3仪器日本产日立-7060型全自动生化仪(HITACHI)。
2方法[9～11]
2.1大豆异黄酮对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响小鼠32只，随机分为4组，每天自然饮用0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液或双蒸水，共7 d，末次给药后1 h后，给药组按0.01 mg/g ip 0.1% CCl4花生油溶液，模型组ip同体积的花生油溶液，对照组ip同体积的生理盐水，禁食16 h后，取血分离血清，测定血清谷丙转氨酶(SGPT)的活性。
2.2大豆异黄酮对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响小鼠32只，随机分为4组，每天自然饮用0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液或双蒸水，共7 d，末次给药24 h后，给药组按150.0 mg/kg ip扑热息痛溶液，模型组ip同体积的扑热息痛溶液，对照组ip同体积的生理盐水溶液，禁食16 h后，取血分离血清，测定血清谷丙转氨酶(SGPT)的活性。
2.3大豆异黄酮对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响小鼠32只，随机分为4组，每天自然饮用0.01 mg/ml、0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液或双蒸水，共7 d，末次给药后1 h后，给药组按50.0 mg/kg ip硫代乙酰胺溶液，模型组ip同体积的硫代乙酰胺溶液，对照组ip同体积的生理盐水溶液，禁食16 h后，取血分离血清，测定血清谷丙转氨酶(SGPT)的活性。
2.4数据处理与统计数据用±s表示，组间比较用t检验。
3结果
3.1大豆异黄酮对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响结果见表1。由表1可见，0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液对0.1% CCl4四氯化碳致小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(SGPT)活性的升高具有明显的拮抗作用。
表1大豆异黄酮对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响(±s)(略)
3.2大豆异黄酮对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响结果见表2。由表2可见，0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液可明显降低150.0 mg/kg扑热息痛致小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(SGPT)活性。
3.3大豆异黄酮对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响结果见表3。由表3可见，0.01，0.02 mg/ml大豆异黄酮溶液对50.0 mg/kg硫代乙酰胺致小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(SGPT)活性无影响。
表2大豆异黄酮对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响(±s)(略)
表3大豆异黄酮对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响(±s)(略)
4讨论
四氯化碳、扑热息痛、硫代乙酰胺损伤肝脏的生化机理不同。一般认为，四氯化碳损伤肝组织机制是四氯化碳经肝细胞色素P450代谢激活后生成三氯甲基(·CCl3)自由基，可引起生物膜脂质过氧化，造成膜结构和功能损伤，蛋白质等物质合成代谢发生障碍。而硫代乙酰胺损伤肝细胞机理可能是损害了细胞膜结构和功能。大剂量扑热息痛经肝肝细胞色素P450代谢后，生成的半醌自由基过多使肝内GSH消耗，并与肝细胞蛋白质进行共价结合，引起肝细胞坏死。以上实验结果提示：大豆异黄酮对四氯化碳、扑热息痛所致小鼠急性肝损伤均有明显的保护作用，能使急性肝损伤小鼠血清SGPT活性明显降低，具有明显的保肝作用。说明大豆异黄酮对三氯甲基(·CCl3)、半醌自由基，引起生物膜脂质过氧化，造成膜结构和功能损伤，蛋白质等物质合成代谢所引起的障碍及肝细胞坏死具有保护作用。而大豆异黄酮对硫代乙酰胺所致小鼠肝细胞膜结构功能无明显的保护作用。
参考文献：
[1]李琳，钱忠明.大豆异黄酮的药理学作用和保健功能的研究进展[J].中国药学杂志，2002，37(10)：724723.
[2]刘英华，黄国伟，常红，等.大豆异黄酮对氧化损伤血管内皮细胞抗氧化作用的研究[J].天津医科大学学报，2003，9(1)：1012.
[3]金宏，刘丽，王先远，等.大豆异黄酮抗辐射作用的实验研究[J].氨基酸和生物资源，2004，26(3)：2326.
[4]杨镇洲，糜漫天，朱俊东，等.大豆异黄酮抑制BcBp-37细胞增殖与TGF-β关系的研究[J].第三军医大学学报，2001，23(4)：434437.
[5]马吉祥，王勤忠，苏军英，等.大豆异黄酮诱导人食管癌裸鼠移植瘤细胞调亡[J].中国肿瘤，2004，13(1)：3437.
[6]那晓琳，禹萍，李璐璐，等.大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨矿物质含量及骨密度的影响[J].中国临床康复，2004，8(15)：28902891.
[7]朱翠凤，张帆，徐晓燕，等.大豆异黄酮等复合抗氧化剂对Ⅱ型糖尿病患者血脂代谢的影响[J].中国临床康复，2004，8(9)：16741676.
[8]毛峻琴，宓鹤鸣.大豆异黄酮的研究进展[J].中草药，2000，31(1)：6163.
[9]祁雪，刘秀梅，陈晓光，等.鹿茸口服液对小鼠实验性肝损伤的保护作用[J].中药药理与临床，2004，20(1)：4243.
[10]王晓东，赵军宁，彭龙玲，等.关幼波验方制剂肝炎康颗粒剂对实验性肝损伤的作用研究[J].中药药理与临床，2004，20(1)：3840.
[11]赵鹏，姚思宁，李彬，等.皂甙对乙醇性肝损伤的保护作用[J].中国临床康复，2004，8(30)：66866687.
(1.赣南医学院，江西 赣州341000；2.赣南医学院附属医院，江西 赣州341000), 百拇医药(曾靖 刘春棋 江丽霞 叶和杨)