人基因重组促卵泡生长激素与高纯度人尿促卵泡生长激素在控制性超排卵中的疗效比较
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2005年11月4日
应用体外受精与胚胎移植助孕技术治疗不孕症。在全世界已广泛开展；为提高助孕技术的成功率，首先要选择一种最佳诱导排卵方案。目前，比较一致的看法是促卵泡生长激素(ESH)在促卵泡发育中起主导作用。研究就人基因重组FSH(r-FSH)与高纯度人尿PSH(u—FSH-HP)在控制性超排卵中的效果进行分析研究。
一、资料与方法
1.研究对象：1998年6月至l999年5月，在本研究所进行体外受精—胚胎移植/单精于卵细胞内显微注射授精(IVF/ICSI)助孕的不孕症患者115例：(1)年龄23—37岁；(2)具有正常的排卵和月经周期；(3)首次接受IVF/ICSI助孕；(4)不孕年限≥2年；(5)子宫腔及双侧卵巢正常；(6)不孕原因为输卵管因素、子宫内膜异位症、性因素、不明原因不孕。同期将这115例患者随机分为nF5H组56例和u—FSH—HP组59例，分组情况见表1。
表1 两组不孕症患者的临床资料
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类别 r-FSH组 u-FSH-HP组
病例数 56 59
IVF例数 31 38
ICSI例数 25 21
平均年龄(岁，x±s) 30.89±2.63 30.30±3.32*
平均不孕年限(x±s) 6.71±2.88 6.66±2.81*
不孕原因
输卵管因素 30 38
子宫内膜异位症 8 7
男性因素 13 11
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不明原因不孕 5 3
*两组比较，P>0.5
2.方法：控制性超排卵方案采用长方案促卵泡生长。即从使用促性腺激素治疗周期前的黄体中期开始使用促性腺激素释放激素激动刑(Buserilin,GnRH-a、GnRH-a、Hoeschst)0.9mg/d分3次鼻喷，至月经第3天垂体完全降调节(子宫内膜厚度≤5mm，双侧卵巢卵泡直径<0.5cm，血清ESH<5IU/L，LH<5IU/L，E2<50ng/L＝，加用r—FSH(75IU/支)或u—FSH—HP(75IU/支)，促卵泡生长发育。初始剂量150-225IU/d,5d后根据患者反应格况调整剂量，当主导坡泡直径达18mm以上时停药，IVF/ICSI按我所常规方法进行。孕6周见胎心搏动为临床妊娠。
3.统计学处理：采用X2检验。
二、结果
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1. 两组获卵数目及体外受精、胚胎质量：本组资料中无取消病例。获得的卵及胚胎质量根据Dale等[1]标准判断。优质胚胎为1、2级胚胎。两组平均FSH用量、受精、卵裂、优
质胚胎数量，差异有显著性。见表2。
表2 两组不孕患者促排卵、受精及胚胎情况(x±s)
类别 r-FSH组 u-FSH-HP P值
病例数 56 59
平均FSH用药时间(d)11.09±1.44 10.83±1.52 >0.05
平均FSH用量(支)25.86±8.50 32.49±8.76 <0.01
平均获卵数(个)13.70±7.97 11.44±6.00 >0.05
, 百拇医药
MⅡ期卵子数(个)10.18±5.83 8.78±5.47 >0.01
平均受精卵数(个)9.48±5.72 7.42±5.14 <0.05
平均卵裂数(个)9.32±5.63 7.29±5.04 <0.05
优质胚胎数(个)6.20±3.47 4.75±3.05 <0.05
2.两组行助孕术后妊娠情况：两组移植胚胎数目、妊娠率及自然流产率比较，差异无显著性。见表3
表3 两组不孕症患者行助孕术后妊娠情况
类别 r-FSH组 u-FSH-HP组
胚胎移植(例数) 56 59
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平均胚胎移植(个) 4.29±1.33 4.25±1.48*
临床妊娠率(%) 37.5 33.9**
单胎(个) 13/21 10/20**
双胎(个) 2/21 5/20**
三胎(个) 2/21 1/20**
流产(个) 3/21 4/20**
异位妊娠(例数) 1/21 0**
着床率(%) 14.3 13.4**
注：*两组比较，P>0.5 **两组比较，P>0. 1
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3.并发症：重度卵巢刺激综合征(0H5S)发生、r—FSH组中有1例(1.8%，1/56)，u-FSH-HP组有2例(3.4%，2/59)，两组比较，差异无显著性(P>0.05 轻、中度0HSS不需特殊处理，故未统计并发症)。
三、讨论
1.u-USH—HP与r—FSH生物学特点：u-FSH-HP是由绝经期妇女尿液中提取的，纯度达95%，但仍含有残留尿液中的具有蛋白性质的成分。这些成分可抑制F5H的作用[2]。
r—FSH是近年来应用基因工程技术人工合成的纯度达100%的FSH制剂。u—FSH—HP与r—FSH不仅在来源上不同，而且在结构上也不完全相同。如它们的寡糖分子结构不同，免疫反应生物活性不同，r—FSH比u—FSH—HP的碱性形式多，酸性形式少，前者对受体的亲和力更强，自身的生物活性也更强，碱性形式在诱导卵泡生长中起重要作用[31。在自然月经周期中，月经中期FSH的碱性形式较多[4]，说明r—FSH更接近天然FSH，具有更高的生物活性。在本研究中，FSH的用量存在显著差异，r—FSH明显少于u—FSH—HP，但获得的卵子数及MⅡ期的卵子数，差异均无显著性，结果支持r—FSH活性高于u—FSH—HP的理论。Hoomans等[5]报道，50IU的r—FSH相当于75IU的u—FSH—HP，也提示r—FSH活性高于u—FSH—HP。
, 百拇医药
2.u—FSH—HP与r—FSH对胚胎的影响：两组的受精、卵裂及优质胚胎数比较，差异有显著性。除r—FSH活性高于u—F3H—HP外，还存在r—E5H纯度和剂量上较u—FSH—HP稳定。
Beigh等[d]提出，由于尿促性腺激素生物活性存在+20%的内变异，751U的u—FSH可能含有60~90IU的变异，说明u—FSH活性不如r—FSH稳定，这可能是引起上述结果的原因。
Out等[7]报道，r—FSH与u—FSH的妊娠率无显著差异，但是r—FSH与u—FSH冷冻胚胎移植后妊娠率有显著差异，提示使用r—FSH后获得的优质胚胎数量增多，与本研究结果一致。尽管在受精、卵裂、优质胚胎数量上r—FSH与u—FSH-HP差异有显著性，但两组着床率及妊娠率差异无显著性。这似乎与r—FSH的优质胚胎数量多相矛盾，但实际上影响IVF妊娠的因异素很多，而且两组移植的胚胎数量接近(4.28±1.33vs4.25±1.48)，提示两组所移植的胚胎质量相似。
3.应用u—FSH—HP与r—FSH的副作用：常见的副作用是OHSS。本文研究中，r—FSH组及u—FSH—HP组的重度0HSS发生率分别为1.8%(1/56)、3.4%(2/59)，差异无显著性，其中2例重度OHSS是发生在妊娠患者。提示OHSS的发生、发展与卵子数及妊娠有关。因此，根据每个患者的具体情况控制好促排卵药物的剂量，是减少OHSS发生的关键。, 百拇医药
一、资料与方法
1.研究对象：1998年6月至l999年5月，在本研究所进行体外受精—胚胎移植/单精于卵细胞内显微注射授精(IVF/ICSI)助孕的不孕症患者115例：(1)年龄23—37岁；(2)具有正常的排卵和月经周期；(3)首次接受IVF/ICSI助孕；(4)不孕年限≥2年；(5)子宫腔及双侧卵巢正常；(6)不孕原因为输卵管因素、子宫内膜异位症、性因素、不明原因不孕。同期将这115例患者随机分为nF5H组56例和u—FSH—HP组59例，分组情况见表1。
表1 两组不孕症患者的临床资料
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类别 r-FSH组 u-FSH-HP组
病例数 56 59
IVF例数 31 38
ICSI例数 25 21
平均年龄(岁，x±s) 30.89±2.63 30.30±3.32*
平均不孕年限(x±s) 6.71±2.88 6.66±2.81*
不孕原因
输卵管因素 30 38
子宫内膜异位症 8 7
男性因素 13 11
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不明原因不孕 5 3
*两组比较，P>0.5
2.方法：控制性超排卵方案采用长方案促卵泡生长。即从使用促性腺激素治疗周期前的黄体中期开始使用促性腺激素释放激素激动刑(Buserilin,GnRH-a、GnRH-a、Hoeschst)0.9mg/d分3次鼻喷，至月经第3天垂体完全降调节(子宫内膜厚度≤5mm，双侧卵巢卵泡直径<0.5cm，血清ESH<5IU/L，LH<5IU/L，E2<50ng/L＝，加用r—FSH(75IU/支)或u—FSH—HP(75IU/支)，促卵泡生长发育。初始剂量150-225IU/d,5d后根据患者反应格况调整剂量，当主导坡泡直径达18mm以上时停药，IVF/ICSI按我所常规方法进行。孕6周见胎心搏动为临床妊娠。
3.统计学处理：采用X2检验。
二、结果
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1. 两组获卵数目及体外受精、胚胎质量：本组资料中无取消病例。获得的卵及胚胎质量根据Dale等[1]标准判断。优质胚胎为1、2级胚胎。两组平均FSH用量、受精、卵裂、优
质胚胎数量，差异有显著性。见表2。
表2 两组不孕患者促排卵、受精及胚胎情况(x±s)
类别 r-FSH组 u-FSH-HP P值
病例数 56 59
平均FSH用药时间(d)11.09±1.44 10.83±1.52 >0.05
平均FSH用量(支)25.86±8.50 32.49±8.76 <0.01
平均获卵数(个)13.70±7.97 11.44±6.00 >0.05
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MⅡ期卵子数(个)10.18±5.83 8.78±5.47 >0.01
平均受精卵数(个)9.48±5.72 7.42±5.14 <0.05
平均卵裂数(个)9.32±5.63 7.29±5.04 <0.05
优质胚胎数(个)6.20±3.47 4.75±3.05 <0.05
2.两组行助孕术后妊娠情况：两组移植胚胎数目、妊娠率及自然流产率比较，差异无显著性。见表3
表3 两组不孕症患者行助孕术后妊娠情况
类别 r-FSH组 u-FSH-HP组
胚胎移植(例数) 56 59
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平均胚胎移植(个) 4.29±1.33 4.25±1.48*
临床妊娠率(%) 37.5 33.9**
单胎(个) 13/21 10/20**
双胎(个) 2/21 5/20**
三胎(个) 2/21 1/20**
流产(个) 3/21 4/20**
异位妊娠(例数) 1/21 0**
着床率(%) 14.3 13.4**
注：*两组比较，P>0.5 **两组比较，P>0. 1
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3.并发症：重度卵巢刺激综合征(0H5S)发生、r—FSH组中有1例(1.8%，1/56)，u-FSH-HP组有2例(3.4%，2/59)，两组比较，差异无显著性(P>0.05 轻、中度0HSS不需特殊处理，故未统计并发症)。
三、讨论
1.u-USH—HP与r—FSH生物学特点：u-FSH-HP是由绝经期妇女尿液中提取的，纯度达95%，但仍含有残留尿液中的具有蛋白性质的成分。这些成分可抑制F5H的作用[2]。
r—FSH是近年来应用基因工程技术人工合成的纯度达100%的FSH制剂。u—FSH—HP与r—FSH不仅在来源上不同，而且在结构上也不完全相同。如它们的寡糖分子结构不同，免疫反应生物活性不同，r—FSH比u—FSH—HP的碱性形式多，酸性形式少，前者对受体的亲和力更强，自身的生物活性也更强，碱性形式在诱导卵泡生长中起重要作用[31。在自然月经周期中，月经中期FSH的碱性形式较多[4]，说明r—FSH更接近天然FSH，具有更高的生物活性。在本研究中，FSH的用量存在显著差异，r—FSH明显少于u—FSH—HP，但获得的卵子数及MⅡ期的卵子数，差异均无显著性，结果支持r—FSH活性高于u—FSH—HP的理论。Hoomans等[5]报道，50IU的r—FSH相当于75IU的u—FSH—HP，也提示r—FSH活性高于u—FSH—HP。
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2.u—FSH—HP与r—FSH对胚胎的影响：两组的受精、卵裂及优质胚胎数比较，差异有显著性。除r—FSH活性高于u—F3H—HP外，还存在r—E5H纯度和剂量上较u—FSH—HP稳定。
Beigh等[d]提出，由于尿促性腺激素生物活性存在+20%的内变异，751U的u—FSH可能含有60~90IU的变异，说明u—FSH活性不如r—FSH稳定，这可能是引起上述结果的原因。
Out等[7]报道，r—FSH与u—FSH的妊娠率无显著差异，但是r—FSH与u—FSH冷冻胚胎移植后妊娠率有显著差异，提示使用r—FSH后获得的优质胚胎数量增多，与本研究结果一致。尽管在受精、卵裂、优质胚胎数量上r—FSH与u—FSH-HP差异有显著性，但两组着床率及妊娠率差异无显著性。这似乎与r—FSH的优质胚胎数量多相矛盾，但实际上影响IVF妊娠的因异素很多，而且两组移植的胚胎数量接近(4.28±1.33vs4.25±1.48)，提示两组所移植的胚胎质量相似。
3.应用u—FSH—HP与r—FSH的副作用：常见的副作用是OHSS。本文研究中，r—FSH组及u—FSH—HP组的重度0HSS发生率分别为1.8%(1/56)、3.4%(2/59)，差异无显著性，其中2例重度OHSS是发生在妊娠患者。提示OHSS的发生、发展与卵子数及妊娠有关。因此，根据每个患者的具体情况控制好促排卵药物的剂量，是减少OHSS发生的关键。, 百拇医药