反相高效液相色谱负峰测定法的研究

    郭治安

    3 1 赵景婵1 闫维洲1 宋俊峰2

    ( 西北大学化学系1 ,分析科学研究所2 , 西安710069)

    摘 要 用HPLC 紫外检测器研究了无紫外吸收化合物的负峰测试法,探讨了负峰测试法的原理。通过对

    乙酸酯系列的5 种样品的分析,确定了负峰测定的基本色谱条件,考察了乙酸酯系列测定的灵敏度、精密度、检出限和线性范围。该法为一些在紫外区无吸收或弱吸收物质的色谱分析提供了一种简捷、方便的手段和色

    谱机理研究的新方法。同常规的采用正峰测试样品的方法相比较,负峰法应用范围更宽,能使紫外检测器变

    为一种更通用的检测器。

    关键词 负峰法,紫外检测器,本底物质,反相液相色谱

    2003201205 收稿;2003205207 接受

    本文系陕西省教委基金资助项目(No. 03J K075)

    1 引 言

    高效液相色谱为一种高分离效率,高检测灵敏度的分离分析方法,但由于被分析物质的响应信号与

    它们的性质有关,只有在被分析物质分子中包含有较高的紫外吸光度、荧光光度或电化学活性等结构单

    位时,紫外检测、荧光检测或电化学检测等高灵敏度的检测器才可用于这些物质的分析测定。如果被分

    析物质没有这样的结构单元,通常需通过柱前或柱后衍生化反应来解决检测问题1 ～3 。但这将使分析

    测试耗时、复杂,给测定带来误差;有些化合物不易与衍生试剂反应,实际上衍生技术也很难完全解决所

    有的检测问题。通常高效液相色谱常用的还有示差折光率检测器,其检测范围广泛,但由于折光率对温

    度的变化敏感,溶剂也具有折光性能,因此折光检测器灵敏度低,选择性差,噪声大,不易平衡,使其应用

    受到很大限制。本实验根据色谱分离过程中样品组分与固定相、流动相与固定相之间反复分配置换的

    特征,在流动相中加入适量的有检测响应的物质,测定无响应的分析组分,所加入的物质称为本底试剂。

    由于样品组分与本底试剂在固定相上的计量置换作用4 ,导致检测器对样品组分产生间接的负峰信

    号,这种负峰的面积与样品量成正比,从而达到定量测定的目的。负峰测定法未见报道。

    实验所用的检测器为可变波长紫外检测器。采用测定负峰的方法,可由紫外检测器代替折光率检

    测器,对于色谱分析有广泛地应用价值;由于方法是通过色谱过程中溶质和溶剂间的计量置换作用建立

    的。因此,测试负峰对于研究色谱作用机理也有重要的理论意义 ......