新荧光试剂52(42羧基苯偶氮)282水杨醛缩氨基喹啉

    荧光增敏法测定人血清蛋白质

    张明翠 汪乐余 李 玲 陈红旗 张德兴 王 伦

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    (安徽师范大学化学与材料科学学院,芜湖241000)

    摘 要 合成了新荧光试剂52(42羧基苯偶氮)282水杨醛缩氨基喹啉( p2CPSAQ) ,探讨了与人血清蛋白反应的

    最佳实验条件。在pH= 7. 0 的缓冲体系中,蛋白质的存在使p2CPSAQ 的荧光大大增强,据此建立了测定人血清蛋

    白质的灵敏方法;对人血清白蛋白和γ2球蛋白的线性范围分别为0. 1～4. 5 mg/ L 和0. 1～4. 0 mg/ L ;检出限分别为

    0. 028 和0. 027 mg/ L。方法灵敏、快速、选择性好,用于人血清样品中总蛋白的测定,结果满意。

    关键词 52(42羧基苯偶氮)282水杨醛缩氨基喹啉,蛋白质, 荧光增敏

    2003202209 收稿;2003209208 接受

    本文系安徽省教育厅基金(No. 2002jp129) 和安徽师范大学专项基金(No. 2001ZX16) 资助项目

    1 引 言

    在生物体中,蛋白质是必不可少的生命物质。有关蛋白质的各类研究,是目前生命科学、化学和临

    床医学研究中共同感兴趣的课题[1～4 ] 。目前蛋白质含量的测定方法很多,主要为分光光度法[5 ] 、共振

    光散射法[6 ]和毛细管电泳法[7 ]等。荧光法由于具有多种测定参数、选择性好、灵敏度高而倍受广大分

    析工作者的关注。但是,由于蛋白质本身的内源荧光很弱,用上述方法测定势必受到诸多限制。人们已

    选择或合成了大量的荧光试剂作为外援荧光来测定蛋白质[8 ,9 ] 。而利用52(42羧基苯偶氮)282水杨醛缩

    氨基喹啉的荧光测定蛋白质的研究,尚未见报道。本实验合成了该新荧光试剂,并对该试剂荧光增敏法

    测蛋白质进行了研究,结果表明:该法具有简单、快速、灵敏度高、选择性好等优点。

    2 实验部分

    2. 1 仪器与试剂

    F24500 型荧光分光光度计(日本日立公司) , PHS23C 型酸度计(上海大中分析仪器厂) 。

    p2CPSAQ 溶液:准确称取0. 0198g p2CPSAQ ,用少量乙醇溶解,稀释定容至100mL ,得5. 0 ×10 - 4 ......