微乳液增敏钼( Ⅵ)23′,5′2二溴水杨基荧光酮

    络合物光谱探针测定蛋白质

    魏 琴1 ,2 杜 斌3 1 吴 丹1 欧庆瑜2

    1 ( 济南大学化学化工学院, 济南250022 ) 2 (中国科学院兰州化学物理研究所, 兰州730000)

    摘 要 研究了在乳化剂OP 微乳液介质中钼( Ⅵ)23′,5′2二溴水杨基荧光酮(3′,5′2DBSF)2蛋白质体系的相

    互作用和吸收光谱情况。在最佳条件下,牛血清蛋白质含量在0 ～ 10 mg/ L 范围内服从比尔定律;同时测得

    络合物与蛋白质的结合数n = 93 。乳化剂OP 微乳液引入到蛋白质的测定中提高了体系的灵敏度。结果表

    明:该法具有很高的灵敏度、选择性和稳定性,可直接用于人尿、奶粉和人血清样品的定量测定。

    关键词 微乳液, 蛋白质, 钼( Ⅵ) , 3 ,52二溴水杨基荧光酮, 光谱探针

    2003205216 收稿;2003211224 接受

    本文系山东省自然科学基金资助(No. Y2000B09)

    1 引 言

    蛋白质是生物最重要的基本组成成分之一,它不仅对于维持生命是十分重要和必不可少的,同时它

    与新陈代谢、生命的起源和进化等都有密切的关系。因此建立一种有效、快速、经济的定量测定方法是

    非常有价值的。蛋白质含量的测定方法有凯氏定氮法[1 ]和考马斯亮蓝法[2 ]等,这些方法都存在一定的

    局限性。近年来,金属2染料络合物作为生物大分子的光谱探针,可以克服上述许多缺点,具有灵敏度

    高、选择性好,特别是蛋白质间测量值差异较小的优点而受到人们的广泛关注。本实验采用微乳液为介

    质提高了体系的灵敏度和稳定性,研究了3′,5′2二溴水杨基荧光酮(3′,5′2DBSF)2Mo ( Ⅵ) 与蛋白质的结

    合反应,建立了一种微量蛋白质的测定方法。该法操作简便,稳定性和选择性好,可应用于样品中蛋白

    质的直接测定,并取得了令人满意的结果。

    2 实验部分

    2. 1 仪器和试剂

    UV23000 型分光光度计(日本岛津公司) ;PHS23B 型酸度计(上海精密科学仪器有限公司) 。

    钼标准溶液:0. 1 mol/ L 的储备液,稀释此溶液为3. 0 ×10 - 4 mol/ L ;牛血清蛋白(BSA) :100 g/ L ,放

    入冰箱4 ℃保存;3′,5′2二溴水杨基荧光酮:3. 0 ×10 - 4 mol/ L 的乙醇溶液;乳化剂OP 微乳液:按照质量 ......