某些同多酸根与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱研究

    刘绍璞

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    杨 睿 罗红群 刘忠芳 石 燕

    (西南师范大学化学化工学院,重庆400715)

    摘 要 在酸性介质中,钼酸根、钨酸根和偏钒酸根等同多酸根与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白

    (HSA)等蛋白质反应形成结合产物时,会导致溶液的共振瑞利散射(RRS)急剧增强,最大散射峰均位于470

    nm。反应的适宜酸度分别为pH 0. 9～1. 3 (钼酸根2BSA体系) , pH 1. 1～1. 4 (钨酸根2BSA体系)和pH 0. 6～

    0. 9 (偏钒酸根2BSA体系) 。在一定的浓度范围内,不同的反应体系RRS强度与蛋白质浓度成正比,均可用于

    蛋白质的测定。反应具有很高的灵敏度,不同的同多酸对BSA的检出限(3σ/ s)介于4. 1～30. 5μg/L之间,其中钼酸根体系的灵敏度最高。考察了共存物质的影响并研究了方法的分析应用。

    关键词 蛋白质,共振瑞利散射,钼酸盐,钨酸盐,偏钒酸盐

    2004207228收稿; 2005202212接受

    本文系国家自然科学基金资助项目(No. 20175018)

    1 引 言

    近年来,利用共振光散射,特别是共振瑞利散射研究小分子与生物大分子如核酸[ 1～3 ] 、蛋白质[ 4～7 ]

    以及肝素[ 8, 9 ]之间的相互作用倍受关注。Pasternack等[ 10 ]强调生色团在生物大分子上的聚集是引起共

    振光散射(RLS)增强的主要原因。因此, RRS法主要用于含生色团的染料及有色金属络合物与生物大

    分子间相互作用的研究[ 11 ] 。

    研究发现,在pH 1. 0左右的酸性介质中,BSA和HAS等蛋白质溶液的RRS十分微弱,此时蛋白质肽

    链上的氨基酸带正电荷。因此,蛋白质以带多个正电荷的大阳离子形式存在。当加入适量的钼酸根、钨酸

    根或偏钒酸根等大阴离子后,它们可与蛋白质反应形成结合产物,并导致溶液的RRS显著增强,而且3种

    不同的同多酸2蛋白质体系呈现出相似的光谱特征。体系的最大散射峰均位于470 nm。这表明在适当的

    条件下,蛋白质与这些无色的无机大阴离子的结合也会产生强烈的RRS散射,生色团在生物大分子上的聚

    集并不是产生RRS必须的条件。实验表明, RRS、FDS及SOS强度与蛋白质浓度在一定范围内成正比。

    体系具有很高的灵敏度,不同的同多酸及散射法对BSA的检出限(3σ/ s)介于4. 1～30. 5μg/L 之间 ......