第32 卷

    2004 年8 月

    分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第8 期

    1002～1005

    咔唑292乙氧基碳酰肼柱前衍生中性糖的高效液相色谱分析

    张 琳1 张 曦1 尤进茂2 段继成1 张维冰1 阎 超1 张玉奎

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    1 (中国科学院大连化学物理研究所,大连116011) 2 (曲阜师范大学化学系,曲阜273165)

    摘 要 采用一种新型紫外、荧光衍生试剂咔唑292乙氧基碳酰肼(CEOC2Hydrazide) 对5 种中性糖(乳糖,甘露

    糖,葡萄糖,鼠李糖和山梨糖) 进行柱前衍生,并通过紫外、荧光检测的方法进行高效液相色谱(HPLC) 分析。

    结果表明:反应温度65 ℃,时间6. 5 h ,醋酸含量为3. 5 %( V / V ) 的条件下,衍生产率可达最大。衍生物的激

    发和发射波长为λex/λem = 293/ 360 nm ,紫外检测波长254 nm。检出限范围15～60 fmol。该方法具有检测灵

    敏度高,衍生化反应简单,适合糖类化合物的分析。

    关键词 咔唑292乙氧基碳酰肼,柱前衍生,高效液相色谱,糖

    2003206212 收稿;2004203225 接受

    本文系国家自然科学基金资助项目(No. 20375040 , 20175039 , 20075016)

    1 引 言

    高效液相色谱测定糖类化合物时,糖本身在紫外区无吸收,多采用示差折光检测器检测,但示差折

    光检测器检测灵敏度低且不能用于梯度洗脱1 。通过衍生使糖类化合物变成具有紫外吸收或能发射

    荧光的物质是提高糖类HPLC 检测灵敏度的主要手段。同时,衍生化可改变糖的局部结构有助于分

    离。由于所有单糖结构相近,用水作流动相,在C18柱上对未衍生的单、双糖进行分离时,糖的保留时间

    较短且分离效果不好2 。常用的糖类衍生化试剂有:12苯基232甲基252吡唑啉酮3 、4′2 N ,N2二甲氨基2

    42偶氮苯磺酰肼4 、N2二甲氨基萘磺酰肼5 及22氨基吡啶6 等,其中伯胺基衍生化试剂是目前常用的。

    但其生成物席夫碱(Schiff base) 不稳定,须经8 h (90 ℃) 的还原反应才可生成稳定的用于分析用的叔胺

    衍生物,且不能还原酮糖 ......