荧光光谱和圆二色谱研究重组内皮抑素与

    芦荟大黄素的相互作用

    王 群

    3 1 石 晶2 张 焕2 倪嘉缵3

    1 (上海交通大学药学院,上海200030) 2 (长春长生基因药业有限公司,长春130022 )

    3 (中国科学院长春应用化学研究所稀土化学与物理国家开放实验室,长春130022)

    摘 要 利用荧光光谱法和圆二色谱法研究了重组内皮抑素与中药有效成分芦荟大黄素的相互作用机制,求得两者在25℃和37℃的结合常数Ka为6. 623 ×104 和3. 796 ×104。研究发现, Zn2 +等5种金属离子能够

    竞争性降低重组内皮抑制与芦荟大黄素的结合常数,下降幅度为35%～55% ,并且其影响程度随温度升高而

    增强。鸡胚尿囊膜血管生成实验结果表明,芦荟大黄素能增强重组内皮抑素的抗血管生成活性,使其对新生

    血管的抑制作用提高50%。

    关键词 重组内皮抑素,芦荟大黄素,荧光猝灭法,圆二色谱法

    2004202212收稿; 2004212205接受

    本文系国家自然科学基金重大项目资助课题(No. 29890280)

    1 引 言

    实体瘤生长超过1 mm3 后就会生成新血管以支持其继续生长[ 1 ] ,近年在肿瘤的抗血管生成药物研

    究和开发方面取得了很多进展[ 2 ] 。内皮抑素( endostatin)是胶原蛋白ⅩⅧ的NC1区酶解片段,分子量为

    20 kD,通过特异性抑制内皮细胞增殖和新血管生成而发挥其抗肿瘤作用[ 3 ] 。芦荟大黄素( aloe emodin,AE)作为芦荟的主要药用成分,具有抗癌、抗菌、消炎杀虫和增强机体免疫力等功效,应用AE治疗肿瘤

    已引起国内外的广泛关注[ 4 ] 。采用抗新血管生成与免疫治疗协同的疗法,用内皮抑素阻断肿瘤的血液

    供应,通过AE刺激机体的免役系统杀死被抑制后的残余瘤体,效果理应远远超过两种疗法的单独使

    用。因此,研究内皮抑素与AE之间的相互作用机制,对于了解内皮抑素的结构与功能之间的关系以及

    阐明生物大分子与小分子相互作用的化学本质具有重要的理论意义和临床应用价值。本实验室通过基

    因工程技术在大肠杆菌中克隆、表达了重组人内皮抑素( recombinant human endostatin, rhES) ,实验采用

    荧光技术和圆二色谱(CD)技术,首次研究了AE与rhES的结合反应,以及金属离子对结合常数的影 ......