冬虫夏草等药用真菌液体发酵研究进展(2)
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2005年11月24日
1.3 茯苓
茯苓液体发酵的最适发酵培养基为：葡萄糖30 g，酵母浸膏3.9 g，蛋白胨5.1g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O 0.5 g，水1L。茯苓液体发酵的最适培养条件为：培养温度26℃，摇瓶装量60 ml(250 ml三角瓶)，转速150r/min，培养基初始pH值5.5，液体菌种菌龄2d，液体菌种接种量6%，摇瓶培养时间7d。
1.4灰树花
灰树花液体深层培养最适宜的碳源为豆粉+麸皮，氮源为蛋白胨、牛肉膏，pH5.3～6.0，通气量为1：(1.0～1.4)。发酵液起始pH为8最适宜，终止pH为3.5，菌丝最适宜生长的pH为5.0。为确定灰树花深层发酵的工艺条件，掌握温度、pH、通气量、培养基粘度、菌龄及接种量对菌丝体生长的影响，经过试验得知，QF培养基，25℃ ，pH4.5，装量60ml/500ml三角瓶，转速100r/min，接种量≥l2% ，种子培养基中加0.4% 的CMC，可提高菌丝量。培养基添加生长促进剂板栗壳煮汁后，菌丝的增产率达140%。为进一步提高胞外多糖的产量，重复利用第一次发酵后的菌丝体是一种很好的方法。当总糖浓度一定时补料可提高胞外多糖的产量，补糖最佳时机为发酵84小时后补加葡萄糖，使发酵液浓度达5% ，可使胞外多糖产量最高达1.3g/L。菌丝体回收利用次数以2次为宜。
, 百拇医药
1.5蜜环菌
试验中改变蜜环菌液体发酵培养基的碳、氮源浓度，通过测定生长菌丝干重，获得最适培养基配方为：未脱脂蚕蛹粉1.5%，豆饼粉1.5%，蔗糖2.0%，乙醇1.0%。蜜环菌摇瓶液体发酵的最适温度为26℃、盛液量为140ml/500ml三角瓶、摇瓶转速为150r/min、培养基起始pH5.5。发酵条件为：温度26～28℃，搅拌转速200r/min，空气压力40-50kPa，V(发酵罐)：V(无菌空气/min)：1：0.4，4～5d为最佳发酵时间。结果显示菌体生物量受氮源影响明显。以廉价易得的农作物产品红薯粉作为碳源菌丝，得率为15.4L，NH4CI作为氮源菌丝，得率为13.8 L。研究发现液体摇瓶培养过程中，产生色素和香味物质的多少与培养基的碳、氮源种类有关。研究还发现在培养基中添加10%～30%(V/V)的泥炭水解液对蜜环菌的生物合成有促进作用，振荡培养形成球型菌丝体，静置液体培养有利于菌索形成。
1.6 金耳
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研究表明，金耳液体发酵最适培养基组成为：玉米粉2%，蔗糖3%，酵母膏0.1% ，KH2PO4 0.1% ，MgSO4 0.05%；培养基最佳初始pH值、250ml三角瓶装量、接种量、菌龄分别是3.5、80ml、10% 和120h；用10L 发酵罐发酵时，菌龄是影响菌丝产量的关键因子，其次是温度和接种量，通风量的影响最小，培养的最佳条件是菌龄144h、28℃、接种量10%、通风量2.5L/min。
2 药用真菌液体发酵产物主要用途
2.1 作为液体菌种
利用深层发酵工艺生产药用真菌菌种，生产条件稳定.有利于机械化、自动化 菌丝体生长均匀一致、菌龄整齐、周期短、流程快、产量高。把液体菌种接入固体培养料时，又具有流程快、易分散、萌发快、发菌点多等特点。目前已经对黑木耳、香菇、灵芝、竹荪、羊肚菌等药用真菌进行了实验，并用于生产实践。
2.2 用于药品、保健品生产
利用发酵技术获得的菌丝体的营养成分和特殊成分的含量以及疗效和保健功效等均和子实体有相似，有些特殊成分的含量还远远高于子实体。日前，市场已有许多这类药物出售，如：安络痛片、香云片、是芝片、蜜环菌片等，都是用液体发酵方式获得菌丝体成分制成。, 百拇医药
茯苓液体发酵的最适发酵培养基为：葡萄糖30 g，酵母浸膏3.9 g，蛋白胨5.1g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O 0.5 g，水1L。茯苓液体发酵的最适培养条件为：培养温度26℃，摇瓶装量60 ml(250 ml三角瓶)，转速150r/min，培养基初始pH值5.5，液体菌种菌龄2d，液体菌种接种量6%，摇瓶培养时间7d。
1.4灰树花
灰树花液体深层培养最适宜的碳源为豆粉+麸皮，氮源为蛋白胨、牛肉膏，pH5.3～6.0，通气量为1：(1.0～1.4)。发酵液起始pH为8最适宜，终止pH为3.5，菌丝最适宜生长的pH为5.0。为确定灰树花深层发酵的工艺条件，掌握温度、pH、通气量、培养基粘度、菌龄及接种量对菌丝体生长的影响，经过试验得知，QF培养基，25℃ ，pH4.5，装量60ml/500ml三角瓶，转速100r/min，接种量≥l2% ，种子培养基中加0.4% 的CMC，可提高菌丝量。培养基添加生长促进剂板栗壳煮汁后，菌丝的增产率达140%。为进一步提高胞外多糖的产量，重复利用第一次发酵后的菌丝体是一种很好的方法。当总糖浓度一定时补料可提高胞外多糖的产量，补糖最佳时机为发酵84小时后补加葡萄糖，使发酵液浓度达5% ，可使胞外多糖产量最高达1.3g/L。菌丝体回收利用次数以2次为宜。
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1.5蜜环菌
试验中改变蜜环菌液体发酵培养基的碳、氮源浓度，通过测定生长菌丝干重，获得最适培养基配方为：未脱脂蚕蛹粉1.5%，豆饼粉1.5%，蔗糖2.0%，乙醇1.0%。蜜环菌摇瓶液体发酵的最适温度为26℃、盛液量为140ml/500ml三角瓶、摇瓶转速为150r/min、培养基起始pH5.5。发酵条件为：温度26～28℃，搅拌转速200r/min，空气压力40-50kPa，V(发酵罐)：V(无菌空气/min)：1：0.4，4～5d为最佳发酵时间。结果显示菌体生物量受氮源影响明显。以廉价易得的农作物产品红薯粉作为碳源菌丝，得率为15.4L，NH4CI作为氮源菌丝，得率为13.8 L。研究发现液体摇瓶培养过程中，产生色素和香味物质的多少与培养基的碳、氮源种类有关。研究还发现在培养基中添加10%～30%(V/V)的泥炭水解液对蜜环菌的生物合成有促进作用，振荡培养形成球型菌丝体，静置液体培养有利于菌索形成。
1.6 金耳
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研究表明，金耳液体发酵最适培养基组成为：玉米粉2%，蔗糖3%，酵母膏0.1% ，KH2PO4 0.1% ，MgSO4 0.05%；培养基最佳初始pH值、250ml三角瓶装量、接种量、菌龄分别是3.5、80ml、10% 和120h；用10L 发酵罐发酵时，菌龄是影响菌丝产量的关键因子，其次是温度和接种量，通风量的影响最小，培养的最佳条件是菌龄144h、28℃、接种量10%、通风量2.5L/min。
2 药用真菌液体发酵产物主要用途
2.1 作为液体菌种
利用深层发酵工艺生产药用真菌菌种，生产条件稳定.有利于机械化、自动化 菌丝体生长均匀一致、菌龄整齐、周期短、流程快、产量高。把液体菌种接入固体培养料时，又具有流程快、易分散、萌发快、发菌点多等特点。目前已经对黑木耳、香菇、灵芝、竹荪、羊肚菌等药用真菌进行了实验，并用于生产实践。
2.2 用于药品、保健品生产
利用发酵技术获得的菌丝体的营养成分和特殊成分的含量以及疗效和保健功效等均和子实体有相似，有些特殊成分的含量还远远高于子实体。日前，市场已有许多这类药物出售，如：安络痛片、香云片、是芝片、蜜环菌片等，都是用液体发酵方式获得菌丝体成分制成。, 百拇医药