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编号:10853070
黄曲霉毒素的检测
http://www.100md.com 《吉林医药医学学报》 2005年第2期
黄曲霉毒素,,黄曲霉毒素;检测,1薄层法(TLC),2高效液相色谱法(HPLC),3免疫亲和柱荧光光度法,4间接竞争酶联免疫吸附法,5快速荧光法,参考文献:
     摘要:黄曲霉毒素污染为世界各国密切关注的问题,找到适宜的检测方法以减少肝癌的发病率,运用薄层法、高效液相色谱法、免疫亲和柱荧光光度法、间接竞争酶联免疫吸附法、快速荧光法等方法可以对黄曲霉毒素进行检测。几种方法中,TLC法迄今仍在真菌毒素检测方面占据主导地位,具有抗干扰能力强、简便易行、离线检测可反复测试等优点;免柱法的局限性是只能测黄曲霉毒素的总量,其次是必须使用高纯水;HPTLC的荧光检测方式可达pg级乃至更低,且操作简单、快捷。

    关键词:黄曲霉毒素;检测

    自从 1960 年美国发生十多万只火鸡因食用黄曲霉毒素污染的饲料而死亡的轰动事件后,食品、食品原料及饲料中是否有黄曲霉毒素污染,即成为世界各国密切关注的问题。黄曲霉产生的毒素有十余种,其中以黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性最大。它是一种杂环分子,具有糠酸呋喃和香豆素的基本结构,动物摄入经过肝脏转化后,产生环氧衍生物,在体内经过激活,产生碳正离子,能与核酸或蛋白质等大分子结合,从而导致细胞畸变或癌变。从流行病学的材料看,凡是黄曲霉毒素污染严重的地区,也是肝癌的高发地区[13]。黄曲霉毒素的耐热能力非常强,其分子结合力稳定,在1.5 kg/cm2蒸气压力下,加热到100℃,40 min后,该毒素有72% 被破坏。下面介绍其检测方法。

    1 薄层法(TLC)

    1.1 普通TLC法

    普通TLC法[46]是以乙醚、丙酮-氯仿(8:92)为展开剂在室温下双向展开,于365 nm紫外灯下观察。

    1.1.1 样品液的制备

    取样品20 g,加甲醇-水溶液(55:45)100 ml,再加正己烷30 ml,振摇,过滤,取下层20 ml于分液漏斗中,加氯仿20 ml,振摇后静置分层,放出氯仿层,经盛有10 g被氯仿润湿的无水碳酸钠的定量慢速滤纸滤过于蒸发皿中,65℃水浴蒸干,在冰盒上冷却2~3 min,加入苯-乙腈(98:2)1 ml,取上清夜备用。

    1.1.2 确证试验

    若样品在标准液相应位置上有蓝紫色荧光点 ......

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