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编号:10857448
电针对应激大鼠血浆EGF和CGRP及胃粘膜损伤的影响
http://www.100md.com 《第四军医大学学报》 2001年第9期
     关键词: 电针;胃粘膜/损伤;表皮生长因子;降钙素基因相关肽

    摘 要:目的 观察电针对应激大鼠胃粘膜损伤的保护作用及对血浆表皮生长因子(EGF)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平的影响. 方法 将72只大鼠平均分为空白对照组、应激组和电针组,每组再按实验时间1,3和5d平均分为3小组(n=8),利用放免分析法测定各组大鼠血浆EGF,CGRP含量并计算各组溃疡计数(UI)水平的变化,以分析其相互关系. 结果 应激组较空白对照组大鼠血浆EGF明显下降(0.44±0.16)μg L-1 →(0.23±0.01)μg L-1 ,P<0.05;UI明显上升(1.1±0.4)→(28.0±4.1),P<0.01.电针组较应激组比较血浆EGF水平明显上升(0.23±0.01)μg L-1 →(0.42±0.09)μg L-1 ,P<0.05;血浆CGRP水平明显上升(145±6)ng L-1 →(184±22)ng L-1 ,P<0.05;UI明显下降(28.0±4.1)→(19.0±2.3),P<0.01.电针组中血浆CGRP实验5d组较实验1d组明显上升(184±22)ng L-1 →(232±35)ng L-1 ,P<0.01. 结论 电针对胃粘膜的损伤有保护作用,血浆EGF,CGRP参与了电针对胃粘膜的保护作用机制.电针调节CGRP与针刺时间有关.

    Electroacupuncture on plasma EGF,CGRP and gas┐tric mucosa in stress rats

    QIN Ming,HUANG Yu-Xin,WANG Jin-Jie,ZHAO Bao-Min,GAO Wei,WANG Qing-Li

    Department of Gastroenterology,Tangdu Hospital,Fourth Millitary Medical University,Xi'an710038,China

    Keywords:electroacupuncture;gastric mucosa/injuries;epi-dermal growth factor;calcitonin gene-related peptide

    Abstract:AIM To study the effect of electroacupuncture(EA)on EGF,CGRP and gastric mucosa in stress rats.METHODS 72SD rats were randomized into3groups:con-trol group,stress group and EA group.Each group was di-vided into3small groups by1,3,5d test time.By radioac-tive-immunon-assay and Guth methods,the changes of EGF,CGRP in plasma and ulcer index(UI)were analysed.RESULTS In stress group compared with control group,the level of EGF decreased(0.44±0.16)μg L-1 →(0.23±0.01)μg L-1 ,P<0.05;but UI increased(1.1±0.4)μg L-1 →(28.0±4.1)μg L-1 ,P<0.01.In the EA group com-pared with stress group,plasma of EGF increased(0.23±0.01)μg L-1 →(0.42±0.09)μg L-1 ,P<0.05;CGRP in-creased(145±6)ng L-1 →(184±22)ng L-1 ,P<0.05;but UI decreased(28.0±4.1)→(19.0±2.3),P<0.01.The changes of CGRP in test5d were more obvious than in1d in EA group(184±22)ng L-1 →(232±35)ng L-1 ,P<0.01.CONCLUSION EA can protect gastric mucosa in stress rats,EGF,CGRP may take part in this function.CGRP in EA group can be effected by test time.

     0 引言

    应激致急性胃粘膜损伤是临床常见的病变之一[1] ,其损伤机制涉及到胃的运动、分泌、血流、胃肠激素、氧自由基等多种因素.针刺对胃粘膜的保护作用已被大量临床观察所证实[2] ,但有关其作用机制尚未完全阐明.我们通过观察在电针前后应激大鼠血浆表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)含量、胃粘膜损伤指数(ulcer index,UI)的变化,以探讨血浆EGF,CGRP在电针对胃粘膜保护中的作用,并对针刺保护胃粘膜的机制作一探索.

     1 材料和方法

    1.1 材料

    成年雄性SD大鼠72只,体质量200~250g(本校实验动物中心提供),随机分为空白对照组,单纯应激组、电针足三里穴后应激组(下称电针组).每组动物再随机分为3小组.分别实验1,3和5d后结束实验,每小组实验动物8只,实验前禁食24h,自由饮水.

    1.2 方法

    各组实验时,先将大鼠装入自制的有机玻璃笼内,把后肢从特定的孔中伸出,固定,此时大鼠处于清醒安静状态.空白对照组将动物固定2h后放出,1次 d-1 ,分别在1,3和5d断头取血.应激组将3批大鼠分别在1,3和5d将其装入有机玻璃鼠笼固定,放入4℃冰箱中,2h后取出.电针组将动物固定后用电针仪(广东汕头医疗器械厂生产)电针大鼠双侧足三里穴(严格按《实验针灸学》的方法取穴,大鼠后膝关节下方当腓骨小头下约5mm),1次 d-1 ,每次电针30min,参数选为断续波,频率50Hz,以大鼠双下肢轻微抖动为宜;3批动物分别电针1,3和5d后再做应激处理(方法同前).实验结束后将大鼠断头取血3mL,内加EDTA二钠、抑肽酶各100μL,于4℃3500r min-1 离心15min,分离血浆于-70℃保存待测胃肠激素,EGF,CGRP采用RIA法,药盒由北京北方生物技术研究所提供.溃疡指数计算方法:将断头大鼠剖腹取胃沿大弯剪开,用生理盐水漂洗干净后展开,按Guth[3] 标准计算溃疡指数.

    统计学处理:实验数据以x ±s表示,采用Nosa统计软件作统计处理.

     2 结果

    大鼠应激后血浆EGF,CGRP及溃疡指数较空白对照组EGF明显下降(P<0.05),CGRP无明显变化,UI明显上升(P<0.01).电针组较单纯应激组比较血浆EGF明显上升(P<0.05),CGRP明显上升(P<0.05),UI明显下降(P<0.01).电针组各小组之间比较:CGRP5d组较实验1d组明显上升(P<0.01),EGF和UI无明显差异.其余各组各小组无明显差异(Tab1).表1 实验各组应激前后血浆EGF及CGRP的变化(略)

    3 讨论

    针刺可以调节胃肠道功能已被大量实验研究及临床观察所证实[2,4,5] ,但其内在机制仍不明确.EGF是一种作用广泛的营养多肽,它在降低胃粘膜损伤程度,参与组织损伤修复过程中起着重要作用[6-9] .Brazozowski等[10] 证实,EGF可使新生鼠胃和十二指肠鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)活性增高,从而增加粘膜DNA的合成防止溃疡的形成.EGF还可增加胃粘膜粘液粘蛋白的合成和分泌,以促进上皮组织的修复[11] .此外也有报道其保护作用与疏基化合物合成有关[12] .Wai等[13] 发现在使用外源性EGF可显著增加血流量并参于粘膜早期的修复.以上各种因素综合作用使得EGF发挥着保护胃粘膜的作用.有关针刺在保护胃粘膜作用中对EGF的影响这方面的研究报道不多,赵保民等[14] 发现电针足三里穴可诱导上消化道EGF分泌增加,且EGF可抑制胃酸分泌.本实验结果显示应激2h后血浆EGF较正常对照组明显下降(P<0.05),而电针后应激则EGF较对照组无明显差异,表明电针刺激使EGF能在应激后维持在正常水平,从而达到减少应激致胃粘膜的损伤作用,提示EGF参与了电针对胃粘膜的保护作用.

    CGRP是1982年发现的来自降钙素基因的一种神经肽,它具有强大的舒张血管作用[15] .此外,还可通过调节某些胃肠激素的释放抑制胃酸分泌[16] ,雷银雪等[17] 通过实验证实CGRP具有对胃粘膜的保护作用.而有关针刺在保护胃粘膜作用中CGRP的变化研究报道不多.本实验发现,应激后大鼠的血浆CGRP含量虽有上升,但与空白对照组比较无显著性差异,推测与其代偿性反应有关,此与雷银雪等报道结论一致.电针组CGRP较单纯应激组明显上升,有显著性的差异(P<0.05),提示电针通过调节CGRP的上升以减轻胃粘膜的损伤.本实验还发现连续针刺5d较针刺1d血浆CGRP明显上升,有显著性差异(P<0.01),提示针刺在调节CGRP等某些胃肠激素的分泌中,与针刺次数及时间亦有关系,此为今后临床运用提供了理论基础.

    本实验初步对针刺保护胃粘膜损伤中EGF,CGRP的变化及与胃粘膜损伤的关系作一探索,发现针刺组血浆EGF,CGRP较单纯应激组含量明显上升,溃疡指数明显减轻,提示EGF,CGRP在针刺保护胃粘膜损伤中起着重要的作用.有关其与粘膜血流、氧自由基、前列腺素E2 等关系待后续报道.

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    基金项目: 国家自然科学基金资助项目(39970888)

    作者简介: 秦 明(1972-),男(汉族),甘肃省天水市人.硕士,助教.Tel.(029)3577721

    (第四军医大学唐都医院消化内科,陕西西安710038)

    编辑 许昌泰

    收稿日期:2000-10-18, 百拇医药(秦明,黄裕新,王景杰,赵保民,高巍,王庆莉)