水飞蓟素药学研究进展综述(2)
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2006年1月17日
2.3高效液相色谱法
检测波长288nm。对制剂中水飞蓟亭、水飞蓟宁和水飞蓟宾的含量进行了测定，对大鼠、家兔及人体中生物利用度进行了考察。
2.3.1药材及制剂
Quercia等用HPLC法分离测定了水飞蓟亭、水飞蓟宁和水飞蓟宾,色谱条件:ChromosorbRP8μm柱,流动相为MeOH-0.02MH3P04(40:60)。pashaHIltor等分离了水飞蓟宾和异水飞蓟宾的峰,色谱条件:C18柱,用THF-H20(36:64)洗脱, 定天明等建立了一种用HPLC法分离测定利肝隆胶囊、益肝灵片、复方益肝灵片中水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟亭、水飞蓟宁等4个主要有效成分含量的方法,色谱条件:以shim-PackVP一ODS(150mm×4.6mm,5μm)及预柱(lmm×4.6mm,5μm)为分析柱,甲醇与混合溶剂水-二氧六环(9:1)按梯度洗脱为流动相,流速为1.5ml/min,检测波长为288nm,柱温为40℃。姚水宝等用梯度高效液相色谱法分离测定了利加隆片(德国)中水飞蓟宾的含量,色谱条件:采用ShimparkCLC C18柱(150mm×6m，5μm)色谱柱,加YWG预柱，甲醇-水(38：62)为流动相,梯度洗脱条件为0-15min，甲醇30-70%；15-20min，甲醇70%，流速1.0ml/min,检测波长288nm。[6-7]
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2.3.2生物样品
P.Morazzoni等研究了水飞蓟素的主要成分在大鼠体内的药代动力学过程，色谱条件:LichrosorbDio15μm柱,流动相为正己烷-乙醇(80:20),流速1.2ml/min,分别测定了水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁和水飞蓟亭在血浆中的含量。Martinelli等采用HPLC法定量分析人体血浆和尿液中水飞蓟宾的含量,色谱条件:LichrosorbDiol (150mm×3mmid)正相柱,流动相为正己烷-乙醇(70:30)用120μl/L的85%磷酸酸化，流速0.8ml/min,检测波长214nm。此方法没有将水飞蓟宾和异水飞蓟宾分离测定。MasCher等采用RP-HPLC法对血浆中游离和结合的水飞蓟宾和异水飞蓟宾分离测定,色谱条件:Nudeosi1120-4C-18(80mm×4mm)柱,流动相为甲酸-0.02mol/L磷酸(1:1),流速1.0ml/min,检测波长285nm。Rickling等采用柱切换电化学检测的HPLC法和反相紫外检测的HPLC法将血浆中游离的总的水飞蓟宾和异水飞蓟宾进行分离测定,内标物为橙皮素,色谱条件:Nucleosi1120-3C18柱(125m×3m),Nacleosi1120-5Cl8保护柱(ll×3mm,ID),流动相为甲醇和0.1mol/L磷酸盐缓冲液(60:40),流速0.5ml/minm。缪海均等对水飞蓟宾固体分散体胶囊的人体生物利用度进行了测定，建立了测定人血浆中水飞蓟宾的反相高效液相色谱法,色谱条件:采用u -BondapakC18(300mm×4.6m)色谱柱,甲醇-乙晴一磷酸盐缓冲液(pH3.0,29:20:50)为流动相,以萘酚为内标,检测波长288nm。史向国等建立了测定大鼠血浆中水飞蓟宾浓度的反相高效液相色谱法,色谱条件:Kromasil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇一磷酸二氢盐缓冲液(体积比为24:24:50,pH=5),检测波长为288nm。江波等对水飞蓟素磷脂复合物家兔体内生物利用度进行了测定，建立了测定兔血浆中水飞蓟宾的反相高效液相色谱法,色谱条件:采用国产C18柱(150mm×4.6m，5μm)色谱柱,醋酸-甲醇-水(1：38：62)为流动相,检测波长288nm。[8-10]
3制剂研究
水飞蓟素目前剂型有口服制剂:水飞蓟素片、益肝灵片、水飞蓟宾卵磷脂复合物硬胶囊。商品名有:利肝隆,利加隆,益肝灵等。注射剂:主要是做成水飞蓟宾衍生物,如:葡-N?甲胺盐,二乙胺盐,N,二甲基甘氨酸盐,玻泪酸酶铀盐等或制成包合物再做成水溶性注射剂。在我国,生产水飞蓟素制剂有几十年的历史,常见的剂型主要为片剂、胶囊,现在尚有德国马博士制药厂生产的水飞蓟素制剂在我国销售。这些制剂主要为水飞蓟素提取物或游离水飞蓟宾,在其释放度和生物利用度试验中发现结果均不理想。有的制剂根本不能有效崩解,影响释放。李钢等对国产与进口的水飞蓟素片的溶出度实验结果也证明了这一点。[11], http://www.100md.com
检测波长288nm。对制剂中水飞蓟亭、水飞蓟宁和水飞蓟宾的含量进行了测定，对大鼠、家兔及人体中生物利用度进行了考察。
2.3.1药材及制剂
Quercia等用HPLC法分离测定了水飞蓟亭、水飞蓟宁和水飞蓟宾,色谱条件:ChromosorbRP8μm柱,流动相为MeOH-0.02MH3P04(40:60)。pashaHIltor等分离了水飞蓟宾和异水飞蓟宾的峰,色谱条件:C18柱,用THF-H20(36:64)洗脱, 定天明等建立了一种用HPLC法分离测定利肝隆胶囊、益肝灵片、复方益肝灵片中水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟亭、水飞蓟宁等4个主要有效成分含量的方法,色谱条件:以shim-PackVP一ODS(150mm×4.6mm,5μm)及预柱(lmm×4.6mm,5μm)为分析柱,甲醇与混合溶剂水-二氧六环(9:1)按梯度洗脱为流动相,流速为1.5ml/min,检测波长为288nm,柱温为40℃。姚水宝等用梯度高效液相色谱法分离测定了利加隆片(德国)中水飞蓟宾的含量,色谱条件:采用ShimparkCLC C18柱(150mm×6m，5μm)色谱柱,加YWG预柱，甲醇-水(38：62)为流动相,梯度洗脱条件为0-15min，甲醇30-70%；15-20min，甲醇70%，流速1.0ml/min,检测波长288nm。[6-7]
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2.3.2生物样品
P.Morazzoni等研究了水飞蓟素的主要成分在大鼠体内的药代动力学过程，色谱条件:LichrosorbDio15μm柱,流动相为正己烷-乙醇(80:20),流速1.2ml/min,分别测定了水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁和水飞蓟亭在血浆中的含量。Martinelli等采用HPLC法定量分析人体血浆和尿液中水飞蓟宾的含量,色谱条件:LichrosorbDiol (150mm×3mmid)正相柱,流动相为正己烷-乙醇(70:30)用120μl/L的85%磷酸酸化，流速0.8ml/min,检测波长214nm。此方法没有将水飞蓟宾和异水飞蓟宾分离测定。MasCher等采用RP-HPLC法对血浆中游离和结合的水飞蓟宾和异水飞蓟宾分离测定,色谱条件:Nudeosi1120-4C-18(80mm×4mm)柱,流动相为甲酸-0.02mol/L磷酸(1:1),流速1.0ml/min,检测波长285nm。Rickling等采用柱切换电化学检测的HPLC法和反相紫外检测的HPLC法将血浆中游离的总的水飞蓟宾和异水飞蓟宾进行分离测定,内标物为橙皮素,色谱条件:Nucleosi1120-3C18柱(125m×3m),Nacleosi1120-5Cl8保护柱(ll×3mm,ID),流动相为甲醇和0.1mol/L磷酸盐缓冲液(60:40),流速0.5ml/minm。缪海均等对水飞蓟宾固体分散体胶囊的人体生物利用度进行了测定，建立了测定人血浆中水飞蓟宾的反相高效液相色谱法,色谱条件:采用u -BondapakC18(300mm×4.6m)色谱柱,甲醇-乙晴一磷酸盐缓冲液(pH3.0,29:20:50)为流动相,以萘酚为内标,检测波长288nm。史向国等建立了测定大鼠血浆中水飞蓟宾浓度的反相高效液相色谱法,色谱条件:Kromasil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇一磷酸二氢盐缓冲液(体积比为24:24:50,pH=5),检测波长为288nm。江波等对水飞蓟素磷脂复合物家兔体内生物利用度进行了测定，建立了测定兔血浆中水飞蓟宾的反相高效液相色谱法,色谱条件:采用国产C18柱(150mm×4.6m，5μm)色谱柱,醋酸-甲醇-水(1：38：62)为流动相,检测波长288nm。[8-10]
3制剂研究
水飞蓟素目前剂型有口服制剂:水飞蓟素片、益肝灵片、水飞蓟宾卵磷脂复合物硬胶囊。商品名有:利肝隆,利加隆,益肝灵等。注射剂:主要是做成水飞蓟宾衍生物,如:葡-N?甲胺盐,二乙胺盐,N,二甲基甘氨酸盐,玻泪酸酶铀盐等或制成包合物再做成水溶性注射剂。在我国,生产水飞蓟素制剂有几十年的历史,常见的剂型主要为片剂、胶囊,现在尚有德国马博士制药厂生产的水飞蓟素制剂在我国销售。这些制剂主要为水飞蓟素提取物或游离水飞蓟宾,在其释放度和生物利用度试验中发现结果均不理想。有的制剂根本不能有效崩解,影响释放。李钢等对国产与进口的水飞蓟素片的溶出度实验结果也证明了这一点。[11], http://www.100md.com