关键词: 翻译起始区域;SD序列;EPO模拟肽;基因串联体

    摘 要:目的 通过改变部分翻译起始区序列观察对EPO模拟肽基因8串联体表达的影响. 方法 设计和人工合成了部分翻译起始区域(translation initiation region，TIR)DNA序列，将该序列插入pBSEPOM8 (含EPO模拟肽基因8串联体序列)的EcoRI和XbaI位点，经DNA测序确定正确重组质粒，再将EPO模拟肽基因8串联体(含改建的翻译起始区域)克隆到pBV220载体的EcoRI和BamHI位点，诱导表达. 结果 DNA测序证明，人工合成的DNA序列已正确插入EPO模拟肽基因8串联体的翻译起始区域.该串联体基因插入pBV220载体后，经42℃诱导，在细菌裂解上清中出现一条相对分子质量为22×103 (Mr )的新蛋白带，与EPO模拟肽基因8串联体的理论计算分子量相符合.经薄层扫描证明该蛋白带约占细菌蛋白总量的15%. 结论 通过改变部分翻译起始区域起动了EPO模拟肽基因8串联体的翻译，使原来不表达的EPO模拟肽基因8串联体获得了较高水平的表达.

    Modified DNA sequence of translation initiation re┐gion helps improve expression of8repeats of EPO mimetic peptide

    HAN Wei，YAN Zhen，WANG Jun-Lou，ZHAO Yong-Tong，SHI Ji-Hong，ZHANG Yin-Qi

    Biotechnology Center，Fourth Military Medical U-niversity，Xi'an710033，China

    Keywords:translation initiation region;SD sequence;EPO mimetic peptide;gene multiple repeats

    Abstract:AIM To observe effect of a synthesized DNA se-quence of translation initiation region(TIR)on expression of8repeats of EOP mimetic peptide gene.METHODS A DNA sequence of translation initiation region was designed ......