人白细胞介素1受体拮抗基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
人,,人;受体,白细胞介素1;基因;基因表达;大肠杆菌,0引言,1材料和方法,2结果,3讨论,参考文献
关键词: 人;受体,白细胞介素1;基因;基因表达;大肠杆菌摘 要:目的 获得一株重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白的高效表达菌株,为研究各种急慢性炎症疾病的发病机制以及拮抗IL-1的生物学效应奠定基础. 方法 分离人外周血淋巴细胞,提取mRNA,反转录PCR获得人白细胞介素1受体拮抗基因(hIL-1ra),克隆入大肠杆菌表达载体,从而构建高效表达人IL-1ra的重组菌株. 结果 成功构建了IL-1ra的高效表达菌株(pLDH-hIL1ra),序列测定与文献报道一致.12%SDS-PAGE分析显示此菌株所表达的目的蛋白产物相对分子质量为23ku,与预期结果相符.光密度扫描重组hIL-1ra蛋白质占细菌总蛋白的30%. 结论 在大肠杆菌中成功地表达了hIL-1ra基因.
Cloning and high yield expression of human inter┐leukin1receptor antagonist in E.coli
LU Fan ZHAO Zhong-Liang YIN Ying YANG Hui CHEN Su-Min
1 Department of Biochemistry and Molecular Biolo-gy,Faculty of Preclinical Medicine,Fourth Military Medical University,Xi'an710033,China,
2 Central Laboratory,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University
Keywords:men;receptors,interleukin-1;genes;gene ex-pression;Escherichia coli
Abstract:AIM To obtain a high expression clone of human interleukin1receptor antagonist(hIL-1ra),which is likely to be of great importance in the pathogenesis of both acute and chronic inflammatory diseases and a competitive inhibitor of the binding of IL-1to IL-1R.METHODS mRNA was ......
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