关键词: 骨形成蛋白-2;骨形成蛋白-3;突变;大肠杆菌;诱骨活性

     0 引言

    骨形成蛋白[1] (bone morphogenetic proteins，BMPs)是属于TGF-β超家族的成员，目前已有18个hBMP基因被克隆.除BMP-1外，其他BMPs在胚胎时期骨组织分化发育、成年骨损伤修复、胚胎发育期中胚层的诱导和分化以及神经系统的发育和修复等方面都起着重要作用[2-4] ，因而BMPs有十分乐观的临床应用前景.利用E.coli表达的不同的长于成熟肽的羧端肽经复性后均具有不同程度诱骨活性[5，6] ，但对短于成熟肽的肽段及其氨基酸组成与其生物学活性的关系，尚未见报道.在上述工作的基础上，本研究在大肠杆菌中表达削短和突变的hBMP-2，3成熟肽，测试其活性，以探索其结构与功能的关系，并期望为获得更好的新型的基因工程hBMP2，3提供依据，为深入研究hBMP-2，3生物活性的分子机制和临床应用打下基础.

     1 材料和方法

    1.1 材料 E.coli DH5(由本教研室保存，含hBMP-2，3全长cDNA的质粒为本室扩增克隆[5，6] ，表达质粒pDH由本实验室构建并保存，限制性内切酶、核酸修饰酶、连接酶、Taq酶等主要购于Biolabs公司.实验动物购自本校实验动物中心.

    1.2 方法 计算机辅助设计hBMP-2 ......