应用消减免疫法制备抗肝癌单克隆抗体
肝癌细胞,,肝癌细胞;免疫组化;消减免疫,1材料和方法,2结果,3讨论,参考文献
关键词: 肝癌细胞;免疫组化;消减免疫1 材料和方法
1.1 材料
①实验动物:BALB/c雌性小鼠8wk龄,体质量18~20g,购自本校实验动物中心;②组织细胞:正常成人新鲜肝组织,肝癌组织取自本校外科手术标本,部分组织以中性福尔马林固定,低温石蜡包埋切片,4℃保存备用.Sp2/0细胞,肝癌细胞株SMMC-7721,HHCC,HePG2由本室保存;③主要试剂:HT,HAT选择培养基RPMI1640培养基购自Sigma公司,环磷酰胺注射液系连云港德瑞制药有限公司产品,Envision购自美国DAKO公司.
1.2 方法
①正常成人肝组织于200目镍网中研磨后,无菌生理盐水悬浮制成肝细胞悬液,免疫小鼠,每只小鼠于ip0.3mL(7×106 )个细胞.于免疫后10min ......
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