收稿日期:2003 - 12 - 10

    作者简介:冯玲玲(1969 - ) ,女 ,硕士 ,从事植物学研究。

    3通讯作者

    不同生长调节剂对丹参快速繁殖的影响

    冯玲玲 ,周诗毅 ,范美华 ,周吉源3

    (华中师范大学生命科学学院 ,湖北 武汉 430079)

    摘 要 探讨了丹参( Salvia miltiorrhiza Bunge)快速繁殖过程中不同生长调节剂的影响。实验表明:MS + 62BA 2. 0

    mg L + NAA 0. 05 mg L是诱导初代培养的芽产生大量丛生芽的最佳培养基 ,其诱导生芽率为 100 %;最佳的丛生芽

    增殖培养基为MS + 62BA 1. 0 mg L + NAA 0. 01 mg L ,其增殖倍数为 15 倍;MS + 62BA 0. 5～2. 0 mg L 是诱导大量不

    定芽的最佳培养基 ,其诱导生芽率为100 % ,最佳的不定芽增殖培养基为MS + 62BA 1. 0 mg L ,其增殖倍数为 24 倍;

    诱导生根较好的培养基为1 2MS + IBA 0. 1 mg L ,生根率为98 % ,移栽成活率为100 %。

    关键词 生长调节剂;快速繁殖;丹参

    Research on Techniques of Micropropagation

    in vitro of Salvia miltiorrhiza Bunge

    Feng Lingling ,Zhou Shiyi ,Fan Meihua ,Zhou Jiyuan

    (College of Life Science ,Central Normal University ,Wuhan 430079)

    Abstract This paper reports the effect of different hormone on rapid propagation of Salvia miltiorrhiza Bunge.

    The results show that MS + 62BA 2. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L can induce a large quantity of thicket buds

    with the 100 % percentage of reduction ,the most proper mediumof bud breeding is MS + 6 2BA 1. 0 mg L with

    15 times of breeding ;MS + 62BA 0. 5 - 2. 0 mg L is a proper medium for inducing numerous indefinite buds ,the reduction percentage of which is 100 % ,MS + 6 2BA 1. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L is the most proper medi2

    um of bud breeding with 24 times of breeding ;the better mediumfor rooting culture is 1 2MS + IBA 0. 1 mg L ,the percentage of rooting growth of which is 98 %,the percentage of living plant in transplanting is 100 %.

    Key words Growth regulator ; Rapid propagation ; Salvia miltiorrhiza Bunge

    丹参( Salvia miltiorrhiza Bunge) ,唇形科鼠尾草

    属的多年生草本植物 ,作为传统中药在我国沿用已

    久 ,近年来随着丹参制剂在国内、国际心血管药物市

    场占有量不断提高 ,以及新的应用价值不断被发

    现[1～8 ]

    ,对丹参的需求和开发也迅速扩大。由于丹

    参种子发芽率很低 ,一般采用根条繁殖 ,但受气候、地理等外界条件影响较大 ,且育苗时间长。

    本文通过筛选适宜的的芽诱导和增殖培养基、诱导生根的培养基 ,从而达到丹参快速繁殖的目的。

    1 材料和方法

    1. 1 材料

    采自湖北蕲春药业基地春初萌发的幼嫩枝条。

    1. 2 实验方法

    1. 2. 1 无菌材料的获得 取幼嫩枝条 ,用自来水冲

    洗干净 ,并用软毛刷轻轻刷洗;然后在超静工作台

    上 ,先用 75 %酒精消毒 0. 5～1 min ,无菌水冲洗 2

    次 ,再用0. 1 %的升汞消毒 10 min ,无菌水冲洗 4～5

    次 ,然后将枝条剪成带有腋芽约 0. 5～1 cm的小段 ,从小段中间纵切为2 ,每 1 片上均含有 1 个腋芽 ,最

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    第23卷第6期

    2004年12月 中 国 野 生 植 物 资 源

    Chinese Wild Plant Resources

    Vol . 23 No. 6

    Dec. 2004

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.后按形态学顶端向上接入 MS或 1 2MS培养基中 ,放在培养室中培养。5 d 后腋芽会萌发 ,至 20 d 后

    小苗约3～4 cm高 ,有 6～8 片深绿色叶 ,以此获得

    无菌试管苗可作为实验材料。

    1. 2. 2 芽的诱导和增殖 芽的诱导是将茎剪成带

    有腋芽的茎段或不带腋芽0. 3 cm长的小段、叶片剪

    成0. 3 cm× 0. 3 cm的小块、叶柄剪成0. 3 cm长的小

    段 ,接种于 MS、 1 2MS或附加不同植物生长调节物

    质的培养基上 ,于(25 ±2) ℃、 10～12 h 光照下培

    养 ,25 d后统计出芽的外植体个数。

    芽的增殖是将诱导的芽切成带2～3个芽的芽丛

    块,接种到附加不同植物生长调节物质的培养基上扩

    大繁殖诱导新芽,培养30 d后观察统计芽总数。

    试管苗理论上一年繁殖数( Y)参照曹孜义[9 ]

    等

    人提供的方法 ,按下列公式计算:

    Y = m ×Xn

    (其中 Y为年繁殖数, m 为无菌母苗

    数, X 为每个培养周期的增殖倍数, n 为全年可增殖

    的周期次数)

    1. 2. 3 生根培养 将高约 2～3 cm不定苗转移到

    不同成分配比的生根培养基上培养 ,观察开始生根

    时间 ,25 d后观察根的生长情况 ,并统计生根的不定

    苗数。

    2 结果与讨论

    2. 1 不同激素对芽的诱导和增殖的效应

    本试验单独或配比使用 62BA、 KT、 NAA 3 种植

    物生长调节物质 ,附加在MS基本培养基上 ,观察诱

    导效果。

    2. 1. 1 丛生芽增殖型

    62BA的诱导效应见表1。

    表1 光培养下62BA诱导丛生芽及对生长势的影响

    质量浓度(mg L) 0. 1 0. 5 1. 0 2. 0 3. 0 5. 0

    出芽率( %) 79. 8 100 100 100 92. 1 52

    生长势 ++ +++ ++++ +++ + +

    平均芽数(个) 6 15 20 12 4 3

    注: - 死亡 , + 差 , + + 一般 , + + + 较好 , + + + + 旺盛(下

    同) , 3多为芽点 ......