第l 9 卷 第L 期

    1 9 9 8 年3 月

    热 带 作 物 学 报 CHI NESE J oURNAL oF TRoPI CAL CRoPS

    Vo 1 .1 9 No .1

    Ma r .1 9 9 8

    1 7 一

    印楝愈伤组织培养和植株再生

    叶勘法V林立东

    ( 中国科学院华南植袖研究所 广 州 5 1 0 6 5 0 )

    擒要 用印楝幼嫩枝条和叶片，在含有B A( 0 ～O . 5 r ag L ) 和NA A( 0 ~2 mg L ) 的MS培养基中. 于

    2 5 ℃士2 ℃下暗培养 1 5 ~2 5 d ， 可诱导产生愈伤组织。 愈伤组织生长出现2个生长蜂. 愈伤组织生长期

    和培养基中激素组成影响双蜂产生时间， 但不改变禽仿组织生长的双蜂性质。 在诱导不定芽培养基

    中， 于2 5 ℃士2 ℃下光培养1 5 ~3 0 d ， 愈伤组织产生不定芽分化. 愈伤组织不定芽分化与愈伤组织来源

    和不定芽诱导培养基的激素及其组合有关， B A0 . 5 mg L， NA A0 . 1 mg L的MS培养基诱导产生的愈

    伤组织( M1 4 ) 不定芽分化能力最强。 B A0 . 5 mg L ， NA A0 . O l mg L的MS培养基是诱导不定芽分化的

    最适培养基。 趣樟小苗在无激素的M S 培养基中光培养1 5 ~2 5 d ， 可发育成完整植株。

    关 键 词 臣 竭 嚏 笾 玺 盟 塞 董 坌 丝 堕 墨 圭 中圉法分类号’ 7 9 2 . 1 2 . 3 3 5 6 7 . 1

    印楝( A z a d i r a c l ~ [ a i ~ d i c a A. J u s s ) 是一种热带速生用材植物。 原产印度一巴基西坦亚大陆，现分布于南亚， 东南亚及其他热带地区 ] 。

    印楝可在干旱和贫脊地带生长， 树高7 ~2 0 m， 每棵树每年可结3 0 ~5 0 k g 果实。 印楝树叶

    和种子传统用于谷物储存防虫。 印楝干果约含1 0 印楝油. 印楝油含3 5 以上的饱和脂肪酸。

    可用于肥皂工业

    印楝中含有许多在农业、 医药及化妆品中有经济价值的次生代谢产物， 特别是印楝中柠檬

    苦紊类( L t m o n o i d ) 三萜化合物印楝紊. 对 2 0 0 多种农业害虫有较强的毒杀能力. 而且对人畜无

    任何毒性E z , 2 3 1 9 9 5 年， S h i r i s h R. 等从楝科植物中分离的2 8 0 多种有杀虫活性的柠檬苦紊类(

    L i mo n o i d ) 化合物中. 印楝紊最有效 。

    印楝在农药、 医药和其他轻化工业中有重要的开发前景。 目 前， 我国尚未能大规模引种栽

    培。 本研究从印楝愈伤组织再生印楝植株， 为印楝的引种驯化、 品种改良和大面积引种提供新

    的途径。

    1 材料与方法

    1 . 1 植物材料

    印楝外植体为中国科学院华南植物研究所植物园栽培的 2 龄印楝树苗的幼嫩枝和叶片。

    1 . 2 印糠意伤组织诱导

    收穑日期； l 9 9 7 —0 5 - -0 5

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    印楝幼嫩枝条和叶片外植体分别切成l c m小段接入含有B A和N A A不同浓度组合的MS

    培养基中， 2 5 ℃- J z 2 ' C 暗培养诱导愈伤组织。 愈伤组织发生率用产生愈伤组织数除以外植体数的

    百分数表示。 每组1 0 个外植体， 3 次实验平均值。

    1 . 3 印楝愈伤组织生长

    印楝愈伤组织在原培养基2 5 ℃- J z 2 ' C 光照继代培养. 每2 0 ~3 0 d 继代1 次。 愈伤组织生长量

    用l O O m L三角瓶3 0 m L培养基上生长的愈伤组织鲜重或干重计算， 单位为g 瓶。 愈伤组织干重

    为 6 0 ℃干燥至恒重。

    1 . 4 印楝愈伤组织不定芽分化培养

    不同培养基诱导产生的印楝愈伤组织接入0 . O l m g L N A A和0 . 5 mg L B A的MS培养基

    或B A 0 . 5 mg L和N A A 0 . 1 mg L的MS 培养基， 诱导产生和继代培养的愈伤组织( M1 4 ) 再接入

    B A和N A A不同组合的MS 培养基， 2 5 ℃- J z 2 ' C 光照培养， 观察在不同条件下产生的愈伤组织不

    定芽分化能力和不同激紊组合对不定芽分化的影响。 不定芽产生率以每克愈伤组织产生的不定

    芽数计算

    l _ 5 印楝小苗生根培养

    株高为2 ~3 c m的印楝小苗转入无激紊的M S 培养基， 2 5 C士2 ' C 光照培养 1 5 ~2 5 d ， 印楝小

    苗可发育成完整植株。 小苗生根率以接入的小苗生根的百分率表示。 每组l 0 个外植体， 取3 次实

    验平均值。

    L 6 扫描电镜观察

    -

    用冷冻扫描法( c r y o - -S E M) 在扫描电镜J S M- -T 3 0 0 中观察。

    2 结果和讨论

    2 . 1 愈伤组织诱导

    印楝幼嫩枝条和叶片切成长 l c m的小段， 分别置于台有 B A0 ~0 . 5 mg L和 N AA0 ~2 mg L

    的MS固体培养基中培养诱导愈伤组织。 1 5 ~2 5 d 后愈伤组织在茎外植体的切面和叶外植体的

    叶脉处产生。 在不舍NAA及 B A浓度低于 0 . 3 mg L的培养基中， 不能诱导印楝外植体产生愈伤

    组织， 此外. N A A和B A的浓度及不同组合对愈伤组织诱导无明显影响。 愈伤组织分别在原培养

    基中继代培养， 在无B A或N A A浓度大于l ms L的培养基中. 其愈伤组织逐渐老化死亡( 表

    1 ) 。 由此可见诱导印楝产生愈伤组织的生理条件并不一定适合愈伤组织生长， 是否与外植体和愈

    伤组织内源激紊有关， 有待进一步研究。

    2 . 2 愈伤组织生长

    印楝愈伤组织在不同的MS培养基中继代培养均出现两个生长峰( 图1 ) ， 不同生长期的愈

    伤组织对生长峰影响明显。 从图l 可见， 2 0 d生长期的愈伤组织E M1 4 ( 1 ) ] 产生第一生长峰. 比

    2 5 d生长期的愈伤组织E M1 4 ( 2 ) ] 早3 d . 比3 0 d 生长期的愈伤组织[ M1 4 ( 3 ) ] 早6 d 。 不同培养基

    对生长峰也有明显的影响。 2 5 d生长期的愈伤组织[ M4 4 ~ 在B A 0 . 5 m g L 、 N A A l m g L的MS培

    养基生长 ......