农 药 第4 2卷 第4期 ( 2 0 0 3 ) 2 3

    印 楝 种 仁 中 印 楝 素 含 量 的 快 速 液 相 色 谱 分 析

    宗 乾 收 ， 林 军 ， 武 永 昆 ， 曾 文 ， 苏 鹏 娟

    ( 1云 南大 学应 用化 学 系， 昆 明 6 5 0 0 9 1； 2云 南 中科 生物产 业 有 限公 司 ， 昆明 6 5 0 1 0 6 )

    摘 要 采用 高压 液相 色谱 法， 微 波辐射 萃取 种仁 中的印楝 素 ， 对种 仁 中的 印楝素含 量 进行 快速

    定 量 测 定 。 该 方 法 的 标 准 偏 差 为 0. 1 3， 变 异 系数 为 0. 1 3% ， 平 均 回 收 率 为 1 0 0. 0 2 % 。

    关 键 词 印 楝 素 高 效 液 相 色谱 微 波 辐 射 分 析

    印 楝 素 ( A z a d i r a c h t i n) 是 从 楝 科 乔 木 印 楝

    ( A z a d i r a c h t i n i n d i c a A. J . ) 中分离得 到 的一种 四环

    三萜类化合物【 . 2 J 。在印楝 的枝 、 叶、 树皮 、 种壳 、 种

    皮及种仁中都含有 印楝 素 ， 但 以种 仁中印楝 素含量

    最高。 目前 ， 对于印楝素 的开发利用 主要集 中在生

    物农药方面。印楝生物农药 属于无公害农药 ， 对高

    等动物无害 ， 对天敌较安全 ， 不污染环境 ， 有利于发

    展绿色农业l 3 . 4 J 。由于 印楝素含量受很多 因素的影

    响 J ， 不同地 方 印楝 种仁 的 印楝 素含 量也不 同 ， 因

    此建立一种快速分析种仁 中印楝素含量 的方法显得

    十分重要。鉴于此 ， 本文报道一种新 的测定 印楝 种

    仁 中印楝素含量的快速分析方法 。

    1 实验部分

    1. 1 仪 器

    A g i l e n t L C一1 1 0 0型 高效 液相 色谱 仪 ； L a mb a

    —

    Ma r x Mo d e l 紫外及可见分光光度计检测器 ； 色谱

    工作站 ； S HI MA D Z U 万分之一天平 ； S B 2 0 0 0型超声

    波震荡器 ； 松下 NN—S 5 7 0 MF S型 改装 过的家用 变

    频微波 炉并 配 有一 个 冷凝 回流 管 ； 1 0 l 微量 进样

    器 。

    1. 2 试剂及药品

    石油醚( 分析纯 ， 6 0 ℃ ～9 0 ℃ ) ； 甲醇 ( 分析 纯) ；

    二次蒸馏水 ； 印楝种 仁( 缅甸产 ) ； 印楝 素标 准品 ( 纯

    度 9 6 - 8 %， 由 S i g ma 公 司购得) 。

    1 . 3 色谱操作条件

    色谱柱 ： h y p e r s i l OD S ( 4 . O mm×2 5 0 mm) ； 流动

    相 ： 水 + 乙腈 ( 6 3： 3 7 ) ； 流 速 1 . O ml mi n ； 柱 温： 室

    温 ； 检测 波 长 ： 2 1 8 n m； 进 样 体 积 ： 1 0 l ； 保 留时 间：

    7. 8mi n。

    1 . 4 测定步骤

    1 . 4 . 1 标样溶液的配制

    准确称量标样 0 . 0 2 g于 1 0 0 ml 容量瓶 中 ， 加 甲

    醇至刻度 ， 置于超声波水浴 中振荡 、 溶解 ， 摇匀。

    1 . 4 . 2 印楝种仁的处理

    先将印楝 种仁磨 细 ， 准确称 量 5 g印楝 粉放人

    2 5 0 ml 圆底 烧 瓶 中。第 一 步 用 石 油 醚 脱 脂 ， 加入

    4 0 ml 石 油 醚 ， 放 人 微 波 炉 中 以 2 8 0 W 功率 辐 射

    4 0 s ， 拿 出冷却 至室温 ， 倒 出大部 分溶剂 ， 再加 4 0 ml

    石油醚 ， 重新放人微波炉 中辐射 4 0 s ， 抽 滤。第二步

    用甲醇萃取 ， 将第一步 的滤渣转移到 2 5 0 ml 圆底烧

    瓶中， 加入 甲醇 ， 以 2 8 0 W 功率 微波辐射 三次 ， 共 用

    时间 4 0+3 0+3 0=l O O s ， 甲醇 5 0+4 0+3 0=1 2 0 ml 。

    再用 5 ml 甲醇洗涤烧瓶 中的残渣 ， 滤液 经过滤后 ，无水 Na 2 S O 4 干燥， 减压蒸馏回收溶剂， 得萃取物。

    1 . 4 . 3 试样溶液的配制

    将 5 g种仁的甲醇萃取物于 1 0 0 ml 容量瓶 中， 加

    甲醇至刻度 ， 置于超声波 中振荡、 溶解 ， 摇匀 。

    1 . 4. 4 试样的测定

    在上述操作条件下 ， 待仪器基线稳定后 ， 连续注

    人数针标样溶液 ， 计算各针相对响应值的重复性 ， 待

    相邻两针 的相对 响应 值 变化 小 于 1 . 5 %时按 照标

    样、 试样 、 试样 、 标样溶液的顺序进行色谱分析。在

    上述操作条件下的印楝素的色谱 分离 图见图 1 。

    寸

    吕 8

    标准品 样品

    图 1 印楝素样品液相色谱 图

    1 . 4 . 5 计算

    将测得 的两 针试 样 溶 液 ( 在 进行 HP L C分 析

    云南省技术创新人才基金资助项目 ......