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编号:10914767
不同品种、产地淫羊藿多糖的含量测定.PDF
http://www.100md.com 2006年2月23日
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    天 津 中 医 药 Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine

    2004年 2月第 21卷第 1期 Feb. 2004 ,Vol . 21 No . 1

    朱永智 1

    ,陈 旭 2

    (1. 天津医药科学研究所,天津 300070 ; 2. 天津市珠江医院,天津 300222)

    摘要: [目的]测定不同品种不同产地淫羊藿多糖的含量。 [方法]采用苯酚- 硫酸法。 [结果]不同品种淫羊藿多糖

    含量结果相差较大,其中朝鲜淫羊藿含多糖量稍高。[结论]淫羊藿不同品种产地多糖的含量相差不大。

    关键词: 淫羊藿; 多糖; 苯酚- 硫酸法

    中图分类号: R28215 文献标识码: A 文章编号: 1672 - 1519 (2004) 01 - 0068 - 02

    不同品种、产地淫羊藿多糖的含量测定

    作者简介:朱永智 (1961 - ) ,男 ,助理研究员,从事天然药物

    研究。

    淫羊藿为小檗科植物朝鲜淫羊藿、箭叶淫羊藿

    和柔毛淫羊藿的干燥地上部分。可补肾壮阳, 祛风

    湿 ,并有镇咳、祛痰、平喘,抑菌等作用[1 ]。据文献报

    道淫羊藿多糖具有明显的促免疫作用 [2 ]

    , 是一种很

    有发展前途的生物调节剂。笔者采用苯酚- 硫酸法 [3 ]

    对3 个品种6 个产地淫羊藿的多糖进行了含量测定。

    1 试剂与仪器

    岛津 UV - 260 型紫外分光光度计; 葡萄糖对

    照品;透析袋:华美生物工程公司提供;其余试剂均

    为分析纯;淫羊藿药材由本所植物室鉴定为A :朝鲜

    淫羊藿 ,B :箭叶淫羊藿,C :柔毛淫羊藿。

    2 实验方法

    211 多糖的分离与纯化 取以上 3 品种 6 产地淫

    羊藿生药各 1 kg ,加水 ,加热提取 3次 ,过滤 ,合并

    提取液 , 浓缩成浸膏, 加入 95 %乙醇 , 使含醇量达

    70 % ,搅均 ,放置 12 h 过滤得沉淀。将沉淀溶于蒸馏

    水中 , 搅匀 , 放置 4 h , 过滤 , 滤液浓缩, 向内加入

    95 %乙醇 ,再重复 1次 ,得沉淀 ,将其溶于蒸馏水中,搅匀 ,放置 4 h ,过滤 ,滤液减压浓缩,再向滤液中加

    入 95 %乙醇 ,使含醇量达 85 % ,搅均 ,放置 12 h。过

    滤得沉淀,即得总多糖。取总多糖经 Sevag 法除蛋白

    多次。然后水层逆向流水透析24 h , 透析袋内液体

    浓缩 , 加入 95 %乙醇使之沉淀, 取沉淀溶于蒸馏水

    中, 转入透析袋, 再将透析袋浸入蒸馏水中透析36 h ,透析袋内液体浓缩, 加入 95 %乙醇使之沉淀, 放置

    4 h 后抽滤 , 无水乙醇洗涤, 冷冻干燥, 得浅棕色淫

    羊藿多糖粉末。

    212 标准曲线的制备

    2. 211 苯酚试剂的制备 取苯酚200 g ,加铝片0. 2 g

    和碳酸氢钠 0. 1 g , 蒸馏 , 收集 182 ℃馏分 , 称取

    10 g ,加水 150 g 混匀 ,使溶解即得。置棕色瓶中,放

    冰箱中备用。

    2. 212 标准溶液的配置 精密称取 105 ℃干燥至

    恒重的标准葡萄糖 100. 12 mg , 至 100 mL 量瓶中 ,加水适量使溶解,稀释至刻度,摇匀。

    2. 213 精密吸取 0. 5 、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、3. 0、3. 5 mL ,分别置 50 mL 量瓶中 ,加水至刻度,摇匀 ,精密量取上述各种浓度溶液2 mL ,各加入苯酚试液

    1. 0 mL ,摇匀 ,迅速加入浓硫酸 5. 0 mL ,迅速摇匀 ,放置 5 min ,置沸水浴中加热 15 min ,取出 ,冷水迅

    速冷却置室温;精密量取蒸馏水1 mL ,同样操作,作

    空白对照 , 按分光光度法在 490 nm 波长处测定吸

    收度。经计算得出回归方程:A = 0. 007 4C (浓度) +

    0. 003 4 ,γ= 0. 999 8

    2. 214 加样回收率试验 精密吸取样品液0. 5 mL

    (5 份) , 分别精密加入浓度不同的标准溶液

    0. 5 mL , 按样品测定方法测定吸收度, 回收率平均

    值为 97. 89 % ,峰面积(RSD)为 1. 64 % , n = 3。

    2. 215 精密度试验 同批样品溶液,重复测定吸光

    度 5次 ,RSD 为 0. 81 % , n = 3。

    2. 216 稳定性试验 取同 1样品溶液,按样品测定

    方法操作,每隔 1 h 测定 1次吸光度 ......

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