丹参组培快繁技术研究

    解晓红 李江辉 冯文龙 解红娥 陈 丽 李红霞 武宗信

    (山西省农科院棉花研究所 ,运城 044000)

    摘要 选择不同外植体研究丹参组织培养中 ,不同激素水平对组织生长、分化、试管苗生根等的影响。结果表

    明:以叶片为外植体 ,接种在 MS + 62BA 018～110 mg L 培养基上 ,丛生芽分化率为 98 %～100 % ,且所需时间较

    短;茎尖接种用 MS + 62BA012～110 mg L 培养基 ,成苗率达95 %以上;试管苗生根以 MS + IBA110 mg L + KT 110

    mg L 最好 ,高达 99 %。

    关键词 丹参 组织培养 快速繁殖 植物激素

    丹参 S al via mi l t iorrhiz a1Bge为唇形科多年生

    草本 ,以干燥根入药 ,有活血化淤、消肿止痛、养血安

    神之功 ,主要用于心血管系统疾病。目前国内外对

    丹参的化学成分分析、品种资源、药理、栽培技术等

    方面都有深入的研究。丹参药材生产上主要采用切

    根繁殖 ,退化及混杂严重 ,药材产量和化学成分逐年

    下降 ,质量得不到保证。其主要原因可能是长期切

    根繁殖 ,病毒积累所致。本研究通过组织培养和植

    株再生技术获得大量丹参试管苗 ,是一种有效的快

    速繁殖、提纯和复壮的方法。

    1 材料和方法

    111 材料 本地种植的丹参 ,取其叶片、嫩茎段做

    外植体。

    112 方法

    11211 外植体用011 %洗衣粉浸泡20 min ,自来水

    冲洗数次 ,在超净工作台内用 75 %酒精消毒 30 s ,011 %升汞消毒 6～12 min ,然后用无菌水冲洗 3～4

    次。经消毒后的嫩茎切成带一个腋芽的茎段 ,叶片

    切成 015 ×015 cm2

    ,接种到 MS培养基上 ,30d 左右

    获得无菌苗 ,待无菌苗长至 3～4 片叶时 ,在 40X解

    剖镜下切取 012～014mm 茎尖 ,在附加激素的培养

    基上培养。

    11212 丹参茎尖苗用添加多种激素诱导 ,以筛选

    最优的增殖和生根方式。

    11213 愈伤组织和丛生芽诱导用 MS 培养基(蔗

    糖 3 % ,琼脂 0165 %) ,附加不同种类和浓度的激素 ,pH518 ,于温度 28 ℃左右 ,1800lx光照 12h d培养。

    2 结果与分析

    211 不同外植体诱导效果 丹参叶片、嫩茎段消

    毒后 ,分别接种到 MS + 62BA 012～310 mg L 和

    MS + 62BA015～115 mg L + NAA012 mg L 培养基

    上。结果表明:茎段外植体 ,30d 萌发腋芽和产生丛

    生芽的比例仅为 10 %左右 ,随着时间延长 ,丛生芽

    (苗)逐渐增多;叶片外植体 ,7d 左右叶皱缩变厚 ,从

    叶缘切口处长出愈伤组织 ,10d 左右就分化出大量

    丛生芽。可见 ,以叶为外植体 ,繁殖系数高 ,效果好。

    212 不同激素组合对茎尖成苗的影响 12 组激素

    组合试验(见表 1) 结果:采用单一的 62BA (012～

    115 mg) L ) 即能诱导茎尖一步成苗 ,成苗率达

    95 % ,且长势强。62BA 浓度大于115 mg L 时 ,分化

    出的茎尖苗玻璃化 ,长势差 ,不能作快繁材料。MS

    + NAA 012mg L + 62BA 015～110mg L 和 MS +

    GA3 015～110 mg L + 62BA 210mg L 都可以使丹

    参茎尖愈伤组织和丛生苗长势良好 ,但不及单一的

    62BA 效果好 ......