收稿日期:2004 - 08 - 11

    作者简介:冯祚臻(1968 - ) ,男(汉族) ,广西博白人 ,主管中药师 ,主要从事中药制剂的研究开发 , Tel . 0775 -

    2673147 ,E- mail guandongxiu @sina. com。

    文章编号: 1006 - 2858 (2005) 03 - 0203 - 04

    冬虫夏草多糖脂质体口服液的质量标准

    冯祚臻1

    , 官东秀1

    , 张晓婷2

    (11 广西玉林市红十字会医院 , 广西 玉林 537000 ; 21 广州星群(药业)有限公司 , 广东 广州 510288)

    摘要: 目的 确定冬虫夏草多糖脂质体口服液质量标准。方法 用蒽酮2硫酸比色法测定冬虫夏草多

    糖浓度;用透析法测定其包封率。结果 平均加样回收率为98173 % ,RSD为1148 %;冬虫夏草多糖

    浓度为 61448 ×10 - 2

    mol· L - 1

    ,包封率为 31177 %。结论 建立的方法可控制冬虫夏草多糖脂质体

    口服液的质量。

    关键词: 冬虫夏草多糖脂质体口服液; 蒽酮2硫酸比色法; 冬虫夏草多糖; 包封率

    中图分类号: 28412 文献标识码: A

    冬虫夏草多糖脂质体口服液是广西玉林市红

    十字会医院研制的用脂质体包封冬虫夏草菌丝体

    中具有抗肿瘤[1 ]

    、抗肝纤维化[2 ]

    、降血糖和增强

    免疫力等作用的多糖而制成的靶向制剂[3 ,4 ]。实

    验结果表明 ,脂质体是一种单层或多层的药物载

    体 ,用它包封药物可调整药物的体内分布和释放

    特征 ,大大降低药物的不良反应 ,提高药物的疗

    效[5 ]。对于脂质体制剂而言 ,药物的包封率是指

    被包裹在脂质体中的药物占脂质体混悬液中药物

    总量的比例。包封率是评价脂质体制剂质量好坏

    的最重要指标[6 ]。为控制冬虫夏草多糖脂质体

    口服液的质量和保证其疗效 ,作者用蒽酮2硫酸法

    测定冬虫夏草多糖含量[7 ]

    ,用透析法测定其包封

    率[8 ]。

    1 仪器与材料

    WFZ—800D3A 紫外分光光度计(北京第二

    光学仪器厂) ,J EM1200 —EX 电子显微镜(日本

    J EOL 电子公司) ,美国 PE—F17 气相色谱仪(美

    国 PE 公司) , ECD 检测器 (美国 PE 公司) ,100 mL 带螺帽的顶空瓶(自制) 。

    D( + )葡萄糖对照品(中国药品生物制品检

    定所) ,冬虫夏草菌丝体 (江西国药制药有限公

    司) ,卵磷脂(上海磷脂一厂) ,胆固醇(分析纯 ,广

    州医药站化学试剂公司进口分装) ,2 g· L - 1

    蒽酮2

    硫酸试液(自制 ,称取蒽酮 012 g ,加入 5 %(φ)硫

    酸充分溶解并定容至 100 mL ,作为显色剂溶液

    备用) ,氯仿(分析纯 ,市售) ,pH 618 磷酸盐缓冲

    液(PBS ,自制) ,冬虫夏草多糖脂质体口服液(本

    院自 制 , 批 号 021124、 030108、 030209 , 每 支

    10 mL) 。

    2 方法与结果

    211 鉴别

    21111 多糖的鉴别

    取样品 20 mL ,加无水乙醇 80 mL ,静置 ,待

    沉淀完全析出后 ,离心 ,滤过 ,残渣用热水 10 mL

    溶解 ,加入 1 mol· L - 1

    盐酸溶液 1 mL ,置水浴中

    加热回流 30 min ,放冷 ,加入 1 mol· L - 1

    氢氧化钠

    试液调至中性 ,加入碱性酒石酸铜试液 2 mL ,水

    浴加热 2 min ,即生成砖红色氧化亚铜沉淀。

    21112 脂质体的显微鉴别

    用J EM1200 —EX 电子显微镜 ,放大 6 000

    倍和 15 000 倍观察。脂质体为圆形或椭圆形 ,以

    小单层脂质体为主 ,粒径约为 100～ 200 nm。脂

    质体的显微照片分别见图 1、 2。

    212 冬虫夏草多糖浓度与包封率测定

    21211 对照品溶液制备

    精密称取 105 ℃干燥至恒重的葡萄糖对照品

    1010 mg ,置 100 mL 量瓶中 ,加水溶解并稀释至

    刻度 ,摇匀。

    21212 测定波长选择

    精密吸取葡萄糖对照品溶液和样品溶液各

    110 mL ,分别加入蒽酮2硫酸试液 2100 mL ,摇匀。

    置沸水浴中加热 5 min ,取出放至室温 ,20 min 后 ,以水 110 mL、显色剂 210 mL 为空白 ,第 22 卷 第 3 期

    2 0 0 5 年 5 月

    沈 阳 药 科 大 学 学 报

    Journal of Shenyang Pharmaceutical University

    Vol122 No13

    May 2005 p1203

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.在波长 550～700 nm 内测定。结果表明 ,对照品

    溶液和样品溶液的最大吸收波长均为 625 nm。

    Fig. 1 The scanning electron microphotographs of sample

    was enlarged 15 000 times

    Fig. 2 The scanning electron microphotographs of sample

    was enlarged 6 000 times

    21213 标准曲线绘制

    精密吸取葡萄糖对照品溶液110、 115、 210、 215、310 mL ,分别置 10 mL 量瓶中,加水定容至刻度,分

    别吸取 110 mL 置 5 支具塞试管中,按“21212”条方

    法操作,在 625 nm 处测定吸收度,结果葡萄糖浓度

    在5180× 10 - 5

    ～1714× 10 - 5

    mol· L - 1

    内,吸收度与浓

    度呈良好的线性关系。线性回归方程为: A = 1154×

    10 - 2

    c - 9146× 10 - 9

    ( c :mol· L - 1) , r = 01990 4。

    21214 回收率试验

    采用加样回收率测定方法 ,按高、中、低浓度

    法分别精密称取葡萄糖对照品适量 ,加入精密吸

    取的 10 mL 冬虫夏草多糖脂质体口服液 ,使溶

    解 ,依法操作 ,结果见表 1。

    21215 精密度试验

    将同一批号样品 ,重复测定 5 次 , RSD 为

    1197 %。

    21216 稳定性试验

    取对照品溶液显色后 ,在室温下放置 ,每隔

    10 min 测定吸收度。结果表明 ,60 min 内其吸收

    度基本保持不变 ,RSD为 2119 %。

    Table 1 Result of recorvery( n = 3)

    madded mg mfound mg Recovery % RSD %

    21576 8 21560 7 99138 1155

    51134 6 51047 5 98130 1112

    91158 7 91023 5 98152 1176

    21217 脂质体中多糖浓度测定

    精密吸取样品 110 mL ,按“21213”条操作 ,测定吸收度 ,计算脂质体中冬虫夏草多糖的总浓

    度 ctot ,结果见表 2 ......