椴树组织培养中污染控制技术初步研究.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(142KB，5页)。
文章编号:100724961 (2004) 0120001205
椴树组织培养中污染控制技术初步研究
吕校石,杨建民,刘云强,冉 潇,雷 霞 (河北农业大学 园林与旅游学院,河北 保定 071000)
摘要:针对椴树组织培养过程中外植体容易污染 ,而且难以控制等问题 ,采用次氯酸钠(商品名
为安替福民)对不同季节的外植体进行消毒处理。结果表明:在4～5 月份取当年生的嫩茎或萌
蘖 ,其污染率在10 %以下;采用水培苗结合10 %的安替福民消毒15 min + 320万单位P L 的青霉
素 + 160万单位P L 的链霉素浸泡 35 min ,或采用水培苗结合 10 %的安替福民消毒 15 min + 480
万单位P L 的青霉素 + 160万单位P L 的链霉素浸泡30 min ,其污染率为3 % 。10 %的 84 消毒液处
理种子30 min或15 % 84消毒液处理种子20 min ,污染率为0 ,效果最为理想。
关键词:椴树;组织培养;污染控制;青霉素;链霉素;84消毒液
中图分类号:S 792. 36 ,Q94311 文献标识码:A
PRELIMINARY STUDIES OF CONTAMINATION CONTROL
DURING TISSUE CULTURE FOR TILIA
LU Xiao2shi ,YANG Jian2min ,LIU Yung2qiang ,LEI Xia
( College of Landscape Architecture and Tourism ,Agricultural University of Hebei ,Baoding 071000)
Abstract :As for the problem of explant contamination during Tilia tissue culture , “Naclo”was used to treat
the explants collected in different seasons prior to tissue culture , The result showed that the contamination ra 2
tio for one - year - old soft shoots and sprouts collected during April to May was under 10 %; the ratio for
water - cultured plantlets treated with 10 %“Naclo” , 3. 2 million units per liter of penicillin and 1. 6 million
units per liter of streptmycin was 3 %; and the ratio for the seeds treated with” 84”disinfector was zero
which is the ideal way to control contamination.
Key words :Tilia ;plant tissue culture ;contamination control ; penicillin ;streptomycin ;84 disinfector
收稿日期:2003 - 11 - 15 ;修改稿收期:2004 - 02 - 09
基金项目:国家林业局“948”金叶椴树及繁殖技术引进项目资助。
作者简介:吕校石(1976 - ) ,男,河北易县人,河北农业大学在读硕士生。
植物组织培养(Plant tissue culture)是 20 世纪初开始 ,以植物生理学为基础发展起来的一
项植物繁殖技术。污染是组培过程中首先遇到的问题 ,且难以控制。不能把污染率降低到可
以接受的范围 ,也就意味着这项工艺不能进行下去。因此 ,控制污染成了组培中的首要技术。
影响污染的因素较多 ,概括起来主要有两方面:一是外植体本身带菌(简称外生菌) 。外植体带
第19卷 第1期 河 北 林 果 研 究 Vol1 19 No11
2 0 0 4 年 3 月 HEBEI JOURNAL OF FORESTRY AND ORCHARD RESEARCH Ma r. 2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.菌是不易清除的 ,特别是外植体内部带的菌(简称内生菌) 。二是组培工艺过程中的各环节操
作不当或不严格而带的菌[1 ,2 ]。笔者使用的材料是多年生的糠椴( Tilia mandshurica Rupr. et
Maxim. ) 、紫椴( Tilia amurensis Rupr. )和通过嫁接得到的金叶椴 ,其内生菌积累到了一定的程
度。同时 ,由于椴树尤其是大叶椴 ,其枝条与芽体表面紧覆盖一层厚绒毛。因此 ,表面所带的
杂菌极不易消除。在试验过程中发现 ,椴树的污染极其难以控制。为此 ,笔者进行了一系列椴
树组织培养中污染的控制试验。
1 材料与方法
111 试验材料
外植体采用多年生糠椴( Tilia mandshurica Rupr. et Maxim. ) 、紫椴( Tilia amurensis Rupr. )和
金叶椴嫁接苗1 a生的茎尖 ,通过水培和沙培催芽所得到的嫩芽以及采得的紫椴种子。
112 试验设计与方法
11211 安替福民对不同季节外植体的污染控制试验 于 2002 年 4～5 月、 6～7 月、 8～9 月、10月后 ,分别取其茎尖 ,先用75 %的酒精浸泡 45 s ,再用 10 %的安替福民消毒 30 min 后 ,再用
无菌水冲洗3～5次。接种于MS为基础附加 6 - BA、 NAA 组成的固体培养基上 ,在 28 d 内观
察污染情况。
11212 青霉素与链霉素对外植体的污染控制试验
①将蒸馏水装入三角瓶 ,封口 ......
椴树组织培养中污染控制技术初步研究
吕校石,杨建民,刘云强,冉 潇,雷 霞 (河北农业大学 园林与旅游学院,河北 保定 071000)
摘要:针对椴树组织培养过程中外植体容易污染 ,而且难以控制等问题 ,采用次氯酸钠(商品名
为安替福民)对不同季节的外植体进行消毒处理。结果表明:在4～5 月份取当年生的嫩茎或萌
蘖 ,其污染率在10 %以下;采用水培苗结合10 %的安替福民消毒15 min + 320万单位P L 的青霉
素 + 160万单位P L 的链霉素浸泡 35 min ,或采用水培苗结合 10 %的安替福民消毒 15 min + 480
万单位P L 的青霉素 + 160万单位P L 的链霉素浸泡30 min ,其污染率为3 % 。10 %的 84 消毒液处
理种子30 min或15 % 84消毒液处理种子20 min ,污染率为0 ,效果最为理想。
关键词:椴树;组织培养;污染控制;青霉素;链霉素;84消毒液
中图分类号:S 792. 36 ,Q94311 文献标识码:A
PRELIMINARY STUDIES OF CONTAMINATION CONTROL
DURING TISSUE CULTURE FOR TILIA
LU Xiao2shi ,YANG Jian2min ,LIU Yung2qiang ,LEI Xia
( College of Landscape Architecture and Tourism ,Agricultural University of Hebei ,Baoding 071000)
Abstract :As for the problem of explant contamination during Tilia tissue culture , “Naclo”was used to treat
the explants collected in different seasons prior to tissue culture , The result showed that the contamination ra 2
tio for one - year - old soft shoots and sprouts collected during April to May was under 10 %; the ratio for
water - cultured plantlets treated with 10 %“Naclo” , 3. 2 million units per liter of penicillin and 1. 6 million
units per liter of streptmycin was 3 %; and the ratio for the seeds treated with” 84”disinfector was zero
which is the ideal way to control contamination.
Key words :Tilia ;plant tissue culture ;contamination control ; penicillin ;streptomycin ;84 disinfector
收稿日期:2003 - 11 - 15 ;修改稿收期:2004 - 02 - 09
基金项目:国家林业局“948”金叶椴树及繁殖技术引进项目资助。
作者简介:吕校石(1976 - ) ,男,河北易县人,河北农业大学在读硕士生。
植物组织培养(Plant tissue culture)是 20 世纪初开始 ,以植物生理学为基础发展起来的一
项植物繁殖技术。污染是组培过程中首先遇到的问题 ,且难以控制。不能把污染率降低到可
以接受的范围 ,也就意味着这项工艺不能进行下去。因此 ,控制污染成了组培中的首要技术。
影响污染的因素较多 ,概括起来主要有两方面:一是外植体本身带菌(简称外生菌) 。外植体带
第19卷 第1期 河 北 林 果 研 究 Vol1 19 No11
2 0 0 4 年 3 月 HEBEI JOURNAL OF FORESTRY AND ORCHARD RESEARCH Ma r. 2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.菌是不易清除的 ,特别是外植体内部带的菌(简称内生菌) 。二是组培工艺过程中的各环节操
作不当或不严格而带的菌[1 ,2 ]。笔者使用的材料是多年生的糠椴( Tilia mandshurica Rupr. et
Maxim. ) 、紫椴( Tilia amurensis Rupr. )和通过嫁接得到的金叶椴 ,其内生菌积累到了一定的程
度。同时 ,由于椴树尤其是大叶椴 ,其枝条与芽体表面紧覆盖一层厚绒毛。因此 ,表面所带的
杂菌极不易消除。在试验过程中发现 ,椴树的污染极其难以控制。为此 ,笔者进行了一系列椴
树组织培养中污染的控制试验。
1 材料与方法
111 试验材料
外植体采用多年生糠椴( Tilia mandshurica Rupr. et Maxim. ) 、紫椴( Tilia amurensis Rupr. )和
金叶椴嫁接苗1 a生的茎尖 ,通过水培和沙培催芽所得到的嫩芽以及采得的紫椴种子。
112 试验设计与方法
11211 安替福民对不同季节外植体的污染控制试验 于 2002 年 4～5 月、 6～7 月、 8～9 月、10月后 ,分别取其茎尖 ,先用75 %的酒精浸泡 45 s ,再用 10 %的安替福民消毒 30 min 后 ,再用
无菌水冲洗3～5次。接种于MS为基础附加 6 - BA、 NAA 组成的固体培养基上 ,在 28 d 内观
察污染情况。
11212 青霉素与链霉素对外植体的污染控制试验
①将蒸馏水装入三角瓶 ,封口 ......
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