◇研究原著 ◇ 中国临床药理学与治疗学

    中国药理学会主办

    CN 3421206P R , ISSN 100922501

    E 2mail : editorys@mail.wh. ah. cn

    2003 Feb ; 8(1) :98 - 100

    2002208222收稿 2002209222修回

    肖艳,通讯作者,女,硕士,副主任药师。

    Tel : 045925805271 E 2mail :xy@zyy. dq. cnpc. com. cn

    大黄中有效成分提取分离条件的优化

    肖 艳,杜智敏1

    大庆油田总医院药剂科 ,大庆 163001 , 黑龙江;

    1

    哈尔滨医科大学第二附属医院临床药理室 ,哈尔滨 151000 , 黑龙江

    摘要 目的:优化从大黄中提取分离大黄蒽醌类有

    效成分的条件 ,以提高其收率和纯度。方法:用乙醇

    回流提取大黄4次 ,得到粗提取液后 ,用硼酸盐缓冲

    溶液萃取 ,萃取液经高压制备色谱分离纯化 ,得大黄

    酸、大黄素、大黄酚单体成分 ,丙酮重结晶后得纯品。

    色谱柱为 YWG C18柱(4. 6 mm× 250 mm ,10μm)流动

    相为甲醇 ?水 ?高氯酸(9 ?1 ?0. 01) ,流速1. 0 ml·

    min

    - 1

    ,检测波长 254 nm。结果:用高压制备系统可

    分离纯化大黄蒽醌类有效成分 ,得到大黄酸、大黄

    素、大黄酚单体成分 ,各成分纯度在 80 %以上 ,大黄

    素收率达 0. 6 %。结论:醇提法提取大黄蒽醌类有

    效成分的方法简单 ,提取率高。高压制备系统可分

    离纯化大黄蒽醌类有效成分 ,得单体纯品 ,且收率高

    纯度好。

    关键词 大黄;蒽醌成分;提取;分离

    中图分类号: R284. 2

    文献标识码: A

    文 章 编 号:100922501 (2003) 0120098203

    大黄来源于蓼科植物 ,性寒味苦 ,是临床上常用

    药物之一。大黄不仅具有攻坚破积、活血化瘀、泻火

    凉血、清热解毒之功效 ,还具有抗菌、抗炎、调节免

    疫、抗肿瘤、止血及保健等作用。大黄化学成分较复

    杂 ,其主要有效成分为蒽醌类衍生物 ,包括大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素和大黄素甲醚等。大黄

    中蒽醌类化合物因结构与性质各异 ,各成分之间极

    性与溶解度又各不相同 ,因此其提取分离方法也是

    多种多样。本实验目的在于优化从大黄中提取分离

    蒽醌类有效成分的条件 ,并提高收率和纯度 ,从而为

    大黄中蒽醌类有效成分的研制和开发提供参考。

    1 材料与方法

    1. 1 仪器 Deltar 4000 高压制备系统(美国 Waters

    公司) ,LC29A 高效液相色谱分析系统(日本岛津) ,AEU2210型电子分析天平 (十万分之一) (日本岛

    津) , Milli2Q超纯水制备仪(美国 Millipore 公司) ,电

    热恒温水浴锅 ,HHS. 112Ni 型(北京靖卫科学仪器

    厂) ,电热恒温干燥箱 ,HX. GZ 2550A 型(连云港医疗

    设备厂) 。

    1. 2 药品与试剂 大黄 ,购于哈尔滨市药材公司 ,经鉴定为蓼科植物掌叶大黄。大黄素标准品、大黄

    酸标准品、大黄酚标准品 ,由中国药品生物制品检定

    所提供。所用试剂均为分析纯。

    1. 3 试剂配制 精密称取干燥至恒重的大黄酸

    0. 96 mg ,大黄素 0. 84 mg ,大黄酚 1. 2 mg ,分别置 10

    ml 容量瓶中 ,加入氯仿 ,超声波振荡溶解后 ,用甲醇

    稀释至刻度 ,分别得到大黄酸、大黄素、大黄酚标准

    溶液。取 0. 2 mol 硼酸溶液250 ml ,0. 05 mol 的硼酸

    盐溶液 24. 5 ml ,置 1 000 ml 容量瓶中 ,加蒸馏水至

    刻度 ,配成pH 8. 0 的硼酸盐缓冲溶液。取 0. 2 mol

    硼酸溶液250 ml , 0. 05 mol 的硼酸盐溶液575 ml ,置

    1 000 ml 容量瓶中 ,加蒸馏水至刻度 ,配成pH 9. 2 的

    硼酸盐缓冲溶液。取浓 H2 SO4 溶液15 ml ,缓缓注入

    蒸馏水中 ,待冷至室温后 ,用蒸馏水定容于 100 ml

    容量瓶中 ,配成 2. 5 mol· L - 1

    的 H2 SO4 溶液。取 234

    ml 浓盐酸 ,用蒸馏水定容成1 000 ml。

    1. 4 分析色谱条件 色谱柱:YWG C18柱 ,10μm ,4.

    6 mm× 250 mm。检测波长(UV) 254 nm ,流动相 ?甲

    醇 ?水 ?高氯酸(9 ?1 ?0. 01) ,流速 1. 0 ml· min

    - 1

    ,柱温(25 ± 1) ℃,进样量:10μl。

    1. 5 提取分离

    1. 5. 1 总蒽醌类成分提取 将掌叶大黄的根茎粉

    碎 ,过20目筛 ,称取140 g ,置圆底烧瓶中 ,加 5 倍量

    · 89 ·

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.95 %的乙醇700 ml ,水浴温度 79 ℃,回流提取 4 次 ,每次 0. 5 h。收集合并回流提取液 ,过滤 ,滤液浓缩

    至100 ml 左右 ,加入 2. 5 mol· L - 1

    H2SO4 溶液 280

    ml ,沸水浴回流水解5 min ,使蒽醌甙水解为游离甙 ,倾出水解后提取液 ,用乙醚萃取 5 次(150 ml ,100 ml

    × 2 ,50 ml × 2) ,合并醚液 ,于水浴中挥掉部分乙醚。

    1. 5. 2 蒽醌类成分分离 (1)根据大黄中大黄酸、大黄素、大黄酚等蒽醌类成分的酸度不同 ,采用不同

    pH值溶液进行萃取分离 ......