《广州食品工业科技》 Guangzhou food science and technology Vol.19 No.4(总 78)

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    中图分类号：Q93 ；文献标识码：A ；文章篇号:1007 - 2764(2003)04 - 00 12 - 0 4

    冬虫夏草菌丝体的深层培养

    陆幼兰

    ( 广州珠江啤酒股份有限公司 广州 510308)

    摘 要: 本文研究了冬虫夏草的深层培养的培养基、培养条件、工艺流程及所需的设备，并比较了天然冬虫夏草与此方法培养的

    菌丝成份。采用深层培养虫草菌丝体能大批量生产虫草菌丝体，其分离出的物质有效成份与天然冬虫夏草的成份相同，二者的药理、药效极其相似，能保证筛选用药的物质来源，缓解虫草资源的紧张状况。

    关键词：冬虫夏草；深层培养；提取

    我们的祖先很早就掌握了利用真菌进行酿酒的技

    术，并发现许多真菌不仅可以食用，味道鲜美，而且

    还可以入药，虫草的发现和利用最具代表性。虫草具

    有明显的滋补作用，传说中具有“起死回生”的功效。

    考古学家从殷代末期和秦朝的文物中发现贵族死者的

    随葬品内有口含的刻有蝉浮雕的青玉平板状饰品，以

    及一些有僵蚕图案的佩带。根据当时的民间传说和后

    人详细的考证，认为这些饰品很可能是古人用来祈福

    余荫的信物，蝉在当时是指一种可药用的真菌蝉草

    (corclgceps sobolifera)的寄主， 僵蚕则是白僵菌

    (beauver ia bassiana)的寄主，可见我国古人对菌与虫

    的关系已经有了相当深入的认识。

    虫草菌绝大多数寄生在昆虫体内。虫草菌生活具

    有明显的地区性和周期性，多见于春、秋两季，一般

    分布在高山绝顶和雪线上，或较为寒冷的北方地区，热带地区有时偶有虫草踪迹。虫草生命力强，对环境

    适应幅度大，可以寄生的昆虫种类较多，其寄生的昆

    虫大部分以植物的叶、根为食，所以在森林和草甸中

    虫草发生最多。由于分布广泛，虫草在不同的地区有

    不同的名称，例如：四川称冬虫夏草为虫草，而云南

    称虫草，甘肃称冬虫草，西藏称雅杂滚卜，在我国其

    它地区也有把冬虫夏草叫做春虫夏草，等等。

    虫草是一类珍贵药材，我国古代就对它的药用价

    值有深刻的认识。吴仪洛所著《本草从新》指出，冬

    虫夏草具有“保肺益肾，止血化淤”的药用功效。由

    于各类虫草 (特别是冬虫夏草) 的滋补治疗效果显著，赵学敏的《本草纲目拾遗》便干脆把虫草类的药用归

    之为“能治百虚百损”一句话。

    现代研究表明，虫草具有重要的食用、药用和其

    它经济价值，虫草中含有丰富的虫草酸、虫草素及各

    收稿日期：2003 - 8 - 16

    类氨基酸等营养物质，具有扩张气管、镇静、抗各类

    细菌、降血压的功效。近年来，美、日本等国相继报

    道虫草具有提高人体抑止肿瘤能力，能加强人体排异

    作用。解放后我国也对食用菌和虫草的人工引种、驯

    化、栽培、遗传、应用等方面进行了很多研究。

    目前我国虫草培养大部分是人工栽培培养，由于

    受地理环境、气侯、水土及虫草品种等各方面的自然

    条件影响，虫草的质量和产量极不稳定，难于实现规

    模产业化。采用深层发酵生产虫草菌丝体，一方面很

    容易从培养液中分离和提取出各种有效成份物质，提

    取虫草酸、虫草素、虫草多糖等有用物质和具有抗癌

    作用的冬虫夏草素及多种氨基酸，大批量生产虫草菌

    丝体； 另一方面利用5t~10t甚至更大容积的发酵罐

    内培养，能够提高产量，保证筛选用药的物质来源，缓解虫草资源的紧张状况。本文研究了虫草的深层发

    酵方法，发现此方法培养的虫草成品与虫草菌丝体均

    含有相同的物质成份，同时二者的药理、药效也极其

    相似，具有广阔的应用前景。

    1 材料

    1.1 冬虫夏草[corelyceps sinsensis (bers) sacc]： 采自甘

    肃甘南草原。

    虫夏草的组织分离采用组织分离法，即采用直接

    切取虫草的子座部分或菌核部分的一小块组织，经表

    面消毒和灭菌水洗后，在无菌操作条件下，由虫草体

    上转移到培养基上。切取组织1mm 左右，组织切取

    过大会增加染菌的机会，组织切取过小，一方面在表

    面消毒过程中易将该组织杀死，另一方面也相应地延

    长了虫草菌种的生长时间。

    工序： 取春夏之交的新鲜冬虫夏草的子座→0.1%

    L 汞液表面消毒5min→无菌水反复冲洗→无菌条件《广州食品工业科技》 Guangzhou food science and technology Vol.19 No.4(总 78)

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    下切去外层、 避开肠边， 切取内部白色组织1cm2

    左右

    →压碎涂于培养基表面→20℃温箱4个月→母种

    组织分离培养基PDA： 马铃薯200g; 蔗糖15g; 琼

    脂17g; 水1000ml

    2 虫草深层培养的设计

    2.1 培养基

    马铃薯煮汁1000ml；蔗糖20g；磷酸二氢钾3g；

    硫酸镁1.5g；维生素10mg

    2.2 深层培养条件设计

    温度 25~27℃；压力 0.04~0.07MPacm2；通气量

    0.5~1.0vvm；搅拌条件： 501为470转分，5001为

    250 转分，50001~100001 为 200 转分；容量：发酵

    液体积为每罐容积的 60~80%；消泡剂：泡敌 0.006

    %或葵花油；增粘剂：1~3%的甲基纤维素

    2.3 中间测定

    (1)纯度检查：通过平板及酸红肉汤培养，油镜镜

    检以观察有无细菌或霉菌析出。

    (2)活力检查：通过显微镜观察虫草菌丝体的边缘

    部， 以了解菌丝体的粗 细及分枝情况， 并且要注意菌

    丝的着染力要强。 宏观上要 以醪液能够静置5秒而无

    菌泥下沉的现象为活力强的判断依据。

    (3)其它测定：发酵液残糖<1.2%；氨态氮

    <30mgml；菌丝量： 醪液→3000转分下离心→称重

    2.4 发酵液后处理

    发酵液粘度高 ......