葛根素的荧光光谱研究及应用.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(169KB，3页)。
第 18 卷第 5 期 分 析 科 学 学 报 2002 年10 月
Vo l . 18 No. 5 JOU RNAL O F ANAL YT ICAL SC IENCE O ct . 2002
文章编号: 100626144 (2002) 0520394203
葛根素的荧光光谱研究及应用
李桂芝 高荆顺 刘永明
(烟台大学化学院, 烟台, 264005)
摘 要: 在pH 8～ 9 的水溶液中, 葛根素有稳定的荧光, 最佳激发波长与发射波长分
别为258 nm 和471 nm。当葛根素浓度为 1. 0×10- 7
～ 1. 0×10- 6
mo l? L 时, 其荧光
强度与浓度有良好的线性关系。据此以荧光光度法直接测定了葛根、注射液及葛根提
取物中葛根素的含量, 并以HPLC 法对同一样品进行了对照测定, 取得满意结果。
关键词: 葛根素; 荧光光谱法; HPLC
中图分类号: 文献标识码:A
葛根(Puerar ia Lobata)是常用中草药, 其有效成分为葛根素(Pu ter r in)
[ 1 ]。葛根素属黄酮类物质, 结
构式见图1。
Fig . 1 Structure of Puterr in
因黄酮类物质独特的抗氧化能力及消除人体内过
量活性氧自由基的特性, 使其提取和分析普遍受到人们
的重视[ 2 ]。我国于20 世纪70 年代开始了葛根素的提取
研究与分离鉴定。目前葛根素已广泛应用于治疗冠心
病、心绞痛等[ 3 ]。
测定葛根素常用的方法有HPLC 法[ 4 ]
和薄层色谱
分离2荧光光谱法[ 5 ]。本文详细研究了葛根素的荧光光
谱, 研究了可能存在的干扰物的干扰情况, 不经分离直
接测定了针剂普乐林及中药葛根中葛根素的含量。并对葛根中葛根素的提取作了研究。实验表明, 葛根
素可用水直接提取进行荧光分析。
1 实验方法
1. 1 仪器与试剂
850 型荧光光度计(日本,H itach i公司)。
葛根素标准溶液: 准确称取41. 60 m g 葛根素(烟台药检所提供) , 溶解后用纯水稀释至100 mL , 得
1. 0×10- 3
mo l? L 储备液, 稀释50 倍得2. 0×10- 5
mo l? L 工作溶液。其他试剂为分析纯或优级纯。实验
用水为高纯水, 经检验无荧光杂质。
1. 2 实验方法
取 2. 0×10- 5
mo l? L 葛根素溶液 1. 0 mL 于 25 mL 容量瓶中, 加入 2 mL pH = 8. 0 的NH32 NH4Cl
缓冲溶液, 以高纯水定容(测定液中葛根素为 8. 0×10- 7
mo l? L )。在激发波长(K ex )为 258 nm 及发射波
长(K em )为471 nm 的条件下进行荧光测量, 以校准曲线法计算结果。
2 结果与讨论
2. 1 荧光光谱
收稿日期: 2001207210 通讯联系人: 刘永明
493
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.我们用8. 0×10- 7
mo l? L 葛根素溶液进行了激发光谱与发射光谱的测定, 结果见图2。由图2 可知
葛根素的最佳激发波长(K ex )为258 nm , 最佳发射波长(K em )为471 nm。
Fig . 2 Fluorescence spectra of puterr in
8. 0×10- 7
mo l? L puter r in; pH= 8. 0
2. 2 酸度的影响
酸度对葛根素荧光强度有很大的影响。按实验方法, 在
8. 0×10- 7
mo l? L 的葛根素溶液中, 以缓冲溶液调pH 值,实验表明, 葛根素在pH 8. 0～ 9. 0 的NH32 NH4Cl缓冲溶液
中荧光值最大。这是因为酸性介质对其有淬灭作用, 在弱碱
性条件下, 葛根素分子上的羟基发生解离, 生成荧光性较强
的阴离子, 因此实验选用 pH = 8. 0 的NH32 NH4Cl 缓冲溶
液。
2. 3 体系的稳定性
按实验方法配好溶液后, 分别放置不同的时间后进行
测定, 荧光强度在一周内基本不变, 说明本体系稳定性较
好 ......
Vo l . 18 No. 5 JOU RNAL O F ANAL YT ICAL SC IENCE O ct . 2002
文章编号: 100626144 (2002) 0520394203
葛根素的荧光光谱研究及应用
李桂芝 高荆顺 刘永明
(烟台大学化学院, 烟台, 264005)
摘 要: 在pH 8～ 9 的水溶液中, 葛根素有稳定的荧光, 最佳激发波长与发射波长分
别为258 nm 和471 nm。当葛根素浓度为 1. 0×10- 7
～ 1. 0×10- 6
mo l? L 时, 其荧光
强度与浓度有良好的线性关系。据此以荧光光度法直接测定了葛根、注射液及葛根提
取物中葛根素的含量, 并以HPLC 法对同一样品进行了对照测定, 取得满意结果。
关键词: 葛根素; 荧光光谱法; HPLC
中图分类号: 文献标识码:A
葛根(Puerar ia Lobata)是常用中草药, 其有效成分为葛根素(Pu ter r in)
[ 1 ]。葛根素属黄酮类物质, 结
构式见图1。
Fig . 1 Structure of Puterr in
因黄酮类物质独特的抗氧化能力及消除人体内过
量活性氧自由基的特性, 使其提取和分析普遍受到人们
的重视[ 2 ]。我国于20 世纪70 年代开始了葛根素的提取
研究与分离鉴定。目前葛根素已广泛应用于治疗冠心
病、心绞痛等[ 3 ]。
测定葛根素常用的方法有HPLC 法[ 4 ]
和薄层色谱
分离2荧光光谱法[ 5 ]。本文详细研究了葛根素的荧光光
谱, 研究了可能存在的干扰物的干扰情况, 不经分离直
接测定了针剂普乐林及中药葛根中葛根素的含量。并对葛根中葛根素的提取作了研究。实验表明, 葛根
素可用水直接提取进行荧光分析。
1 实验方法
1. 1 仪器与试剂
850 型荧光光度计(日本,H itach i公司)。
葛根素标准溶液: 准确称取41. 60 m g 葛根素(烟台药检所提供) , 溶解后用纯水稀释至100 mL , 得
1. 0×10- 3
mo l? L 储备液, 稀释50 倍得2. 0×10- 5
mo l? L 工作溶液。其他试剂为分析纯或优级纯。实验
用水为高纯水, 经检验无荧光杂质。
1. 2 实验方法
取 2. 0×10- 5
mo l? L 葛根素溶液 1. 0 mL 于 25 mL 容量瓶中, 加入 2 mL pH = 8. 0 的NH32 NH4Cl
缓冲溶液, 以高纯水定容(测定液中葛根素为 8. 0×10- 7
mo l? L )。在激发波长(K ex )为 258 nm 及发射波
长(K em )为471 nm 的条件下进行荧光测量, 以校准曲线法计算结果。
2 结果与讨论
2. 1 荧光光谱
收稿日期: 2001207210 通讯联系人: 刘永明
493
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.我们用8. 0×10- 7
mo l? L 葛根素溶液进行了激发光谱与发射光谱的测定, 结果见图2。由图2 可知
葛根素的最佳激发波长(K ex )为258 nm , 最佳发射波长(K em )为471 nm。
Fig . 2 Fluorescence spectra of puterr in
8. 0×10- 7
mo l? L puter r in; pH= 8. 0
2. 2 酸度的影响
酸度对葛根素荧光强度有很大的影响。按实验方法, 在
8. 0×10- 7
mo l? L 的葛根素溶液中, 以缓冲溶液调pH 值,实验表明, 葛根素在pH 8. 0～ 9. 0 的NH32 NH4Cl缓冲溶液
中荧光值最大。这是因为酸性介质对其有淬灭作用, 在弱碱
性条件下, 葛根素分子上的羟基发生解离, 生成荧光性较强
的阴离子, 因此实验选用 pH = 8. 0 的NH32 NH4Cl 缓冲溶
液。
2. 3 体系的稳定性
按实验方法配好溶液后, 分别放置不同的时间后进行
测定, 荧光强度在一周内基本不变, 说明本体系稳定性较
好 ......
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