葛根有效成分的含量测定与提取工艺优化.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(113KB，3页)。
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葛根有效成分的含量测定与提取工艺优化
彭菊艳, 王俊儒, 张义英, 张普照
(西北农林科技大学 生命科学学院, 陕西 杨凌 712100)
葛根为豆科植物野葛 [ P uera ria loba ta
(W ild) O hw i ] 的块根, 常用生药, 味甘辛、性平,具有降低血管阻力, 改善心脑血液循环, 减慢心
率, 降低心肌耗氧量等药理作用。在我国民间, 葛
根也常用于治疗伤寒、温热头痛、烦热消渴等, 是
中医常用的祛风解毒药。葛根中主要以大豆黄酮
(Daidzein )、大 豆 黄 酮 苷 (Daidzin )、葛 根 素
(Puerar in)、 4, 72二葡萄糖大豆苷、 3’ 2甲氧基葛
根素 ( 3’ 2 m ethyoxyl2 puerar ia )、72木糖2葛根素、4’ , 6” 2二乙酰基2葛根素、芒柄花素等多种异黄酮
类物质为活性成分, 其中以葛根素为主要成分[ 5 ]。
近年来, 关于提取纯化葛根总黄酮的方法很
多, 对不同品种的葛根及其不同部位的黄酮含量
作了测定, 并对葛根总黄酮的提取工艺进行优化,选择合适的条件, 以便为葛根素的工业化生产提
供新思路。
1 材料与仪器
材料: 一年生引种葛根粗粉、两年生引种葛根
粗粉、秦岭葛根粗粉、粉葛粗粉。
试剂: 95%乙醇及其他试剂均为分析纯。
仪器: 754 型紫外分光光度计; 旋转蒸发仪
(上海亚荣生化仪器厂) ; KQ 3200 超声波清洗器
(工作频率: 40KHz; 120W; 江苏省昆山市超声波
仪器厂) ; 恒温水浴槽。
2 实验处理
2. 1 材料处理
将采集的新鲜葛根清洗去泥, 晾干, 切片, 于
80℃下烘48h 至干, 粉碎, 备用。
2. 2 葛根黄酮的含量测定
按紫外分光光度法测定[ 6～ 7 ]。
2. 2. 1 标准曲线的制作 1m g? m l 芦丁标准液
的配制: 精确称取芦丁标样50m g 于50m l容量瓶
中, 加95%乙醇溶解稀释至刻度, 摇匀, 即为1m g?
m l芦丁标准液。按文献[ 6～ 7 ]
制作标准曲线。
2. 2. 2 样液制备
(1)热渗滤回流提取法。
分别称取0. 500g 一年生引种葛根、一年生引
种葛茎叶、一年生引种葛根皮、两年生引种葛根、两年生引种葛根皮、秦岭葛根、粉葛等的粗粉, 用
滤纸包好, 置于热渗滤回流提取器中, 以95%乙醇
为溶剂(溶剂量少于10m l)热回流30m in, 将提取
液全部转移至 10m l 具塞刻度试管中, 定容至
10m l, 摇匀。即为待测液。按标准曲线制作中的方
法测定黄酮含量。在测定样液中黄酮含量时, 以不
加10%硝酸铝, 作为对照(下同)。
(2)超声波提取法。
分别称取上述样品各0. 200g, 置于10m l具塞
刻度试管中, 在超声波清洗器中超声波萃取
20m in, 取出后, 过滤弃去滤渣, 滤液即为待测液。
2. 3 葛根总黄酮提取工艺优化
称取两年生引种葛根干燥粗粉25. 000g 共16
份(每一实验号重复1 次) , 按超声波预处理时间、提取溶剂(乙醇)浓度、热回流时间为因素, 各设2
个水平, 进行正交试验, 探讨各条件对提取效果的
影响。实验按表3 进行, 每一试验号连续浸提3 次,所用溶剂量分别为样品量的5 倍、 6 倍、 4 倍。提取
完成后, 抽滤洗涤, 合并3 次滤液, 摇匀, 定容至
350m l, 将提取液浓缩干至恒重, 称提取物重量,计算提取率。
3 结果与分析
3. 1 两种方法提取效果的比较
从两种方法所获得的结果(表1)来看, 在各种
实验用原料中, 热渗滤回流提取法的提取率远大
于超声波提取法, 对一年生引种葛、两年生引种
· 25 · 陕 西 农 业 科 学 2005 (3)
a 收稿日期: 2005- 01- 19
作者简介: 彭菊艳(1979- ) , 女, 在读硕士, 主要从事药用植物化学成分及相关产品的开发研究。
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.葛、秦葛、粉葛, 前者的提取率比后者分别高出42.
06% , 60. 58% , 188. 32% , 26. 15%。表明热渗滤回
流提取法的提取效果很好 ......
葛根有效成分的含量测定与提取工艺优化
彭菊艳, 王俊儒, 张义英, 张普照
(西北农林科技大学 生命科学学院, 陕西 杨凌 712100)
葛根为豆科植物野葛 [ P uera ria loba ta
(W ild) O hw i ] 的块根, 常用生药, 味甘辛、性平,具有降低血管阻力, 改善心脑血液循环, 减慢心
率, 降低心肌耗氧量等药理作用。在我国民间, 葛
根也常用于治疗伤寒、温热头痛、烦热消渴等, 是
中医常用的祛风解毒药。葛根中主要以大豆黄酮
(Daidzein )、大 豆 黄 酮 苷 (Daidzin )、葛 根 素
(Puerar in)、 4, 72二葡萄糖大豆苷、 3’ 2甲氧基葛
根素 ( 3’ 2 m ethyoxyl2 puerar ia )、72木糖2葛根素、4’ , 6” 2二乙酰基2葛根素、芒柄花素等多种异黄酮
类物质为活性成分, 其中以葛根素为主要成分[ 5 ]。
近年来, 关于提取纯化葛根总黄酮的方法很
多, 对不同品种的葛根及其不同部位的黄酮含量
作了测定, 并对葛根总黄酮的提取工艺进行优化,选择合适的条件, 以便为葛根素的工业化生产提
供新思路。
1 材料与仪器
材料: 一年生引种葛根粗粉、两年生引种葛根
粗粉、秦岭葛根粗粉、粉葛粗粉。
试剂: 95%乙醇及其他试剂均为分析纯。
仪器: 754 型紫外分光光度计; 旋转蒸发仪
(上海亚荣生化仪器厂) ; KQ 3200 超声波清洗器
(工作频率: 40KHz; 120W; 江苏省昆山市超声波
仪器厂) ; 恒温水浴槽。
2 实验处理
2. 1 材料处理
将采集的新鲜葛根清洗去泥, 晾干, 切片, 于
80℃下烘48h 至干, 粉碎, 备用。
2. 2 葛根黄酮的含量测定
按紫外分光光度法测定[ 6～ 7 ]。
2. 2. 1 标准曲线的制作 1m g? m l 芦丁标准液
的配制: 精确称取芦丁标样50m g 于50m l容量瓶
中, 加95%乙醇溶解稀释至刻度, 摇匀, 即为1m g?
m l芦丁标准液。按文献[ 6～ 7 ]
制作标准曲线。
2. 2. 2 样液制备
(1)热渗滤回流提取法。
分别称取0. 500g 一年生引种葛根、一年生引
种葛茎叶、一年生引种葛根皮、两年生引种葛根、两年生引种葛根皮、秦岭葛根、粉葛等的粗粉, 用
滤纸包好, 置于热渗滤回流提取器中, 以95%乙醇
为溶剂(溶剂量少于10m l)热回流30m in, 将提取
液全部转移至 10m l 具塞刻度试管中, 定容至
10m l, 摇匀。即为待测液。按标准曲线制作中的方
法测定黄酮含量。在测定样液中黄酮含量时, 以不
加10%硝酸铝, 作为对照(下同)。
(2)超声波提取法。
分别称取上述样品各0. 200g, 置于10m l具塞
刻度试管中, 在超声波清洗器中超声波萃取
20m in, 取出后, 过滤弃去滤渣, 滤液即为待测液。
2. 3 葛根总黄酮提取工艺优化
称取两年生引种葛根干燥粗粉25. 000g 共16
份(每一实验号重复1 次) , 按超声波预处理时间、提取溶剂(乙醇)浓度、热回流时间为因素, 各设2
个水平, 进行正交试验, 探讨各条件对提取效果的
影响。实验按表3 进行, 每一试验号连续浸提3 次,所用溶剂量分别为样品量的5 倍、 6 倍、 4 倍。提取
完成后, 抽滤洗涤, 合并3 次滤液, 摇匀, 定容至
350m l, 将提取液浓缩干至恒重, 称提取物重量,计算提取率。
3 结果与分析
3. 1 两种方法提取效果的比较
从两种方法所获得的结果(表1)来看, 在各种
实验用原料中, 热渗滤回流提取法的提取率远大
于超声波提取法, 对一年生引种葛、两年生引种
· 25 · 陕 西 农 业 科 学 2005 (3)
a 收稿日期: 2005- 01- 19
作者简介: 彭菊艳(1979- ) , 女, 在读硕士, 主要从事药用植物化学成分及相关产品的开发研究。
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.葛、秦葛、粉葛, 前者的提取率比后者分别高出42.
06% , 60. 58% , 188. 32% , 26. 15%。表明热渗滤回
流提取法的提取效果很好 ......
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