钩藤提取物抗氧化作用的研究.PDF
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2006年2月23日
第1页 |
参见附件(84KB,3页)。
收稿日期:2003 - 10 - 22
作者简介:郑公铭(1966 - ) ,男 ,讲师;主要从事精细化
工专业教学和天然产物的研究开发。
文章编号:1003 - 7969 (2004) 07 - 0026 - 03 中图分类号:TQ641 文献标识码:A
钩藤提取物抗氧化作用的研究
郑公铭
(茂名学院应用化学系 ,525000广东省茂名市官渡二路139号)
摘要:对钩藤以正己烷、乙酸乙酯、甲醇在索氏提取器中依次提取 4 h ,并对乙酸乙酯提取物和
甲醇提取物进行了色谱分离 ,测定了各成分的抗氧化活性 ,通过显色反应和光谱分析对各成分进行
了初步鉴定。结果表明 ,钩藤中有两种黄酮苷元和一种黄酮苷的抗氧化活性比BHT强 ,两种黄酮
苷与BHT相近 ,3种酚酸和几种羟基蒽醌甙也有较强的抗氧化能力 ,但钩藤碱的抗氧化能力较差。
关键词:钩藤;抗氧化;黄酮;酚酸;羟基蒽醌甙
钩藤(Ramulus Uncariae cun Uncis)为茜草科植物
钩藤(Uncarin Rhynchophylla)及同属多种植物的带钩
茎枝 ,广泛分布于我国的东南、西南、中南地区。其
生长力强 ,种植简易 ,是一种常用中药。钩藤的有效
成分之一是钩藤生物碱 ,其功效是降压、镇静、抗惊、抗心律失常和平喘、抗血栓 ,目前已有厂家生产钩藤
生物碱制剂[1~4 ]。但除了生物碱(低极性) ,钩藤中
还有大量其他活性成分没有加以利用 ,而且采作药
物的只是带钩的细茎枝 ,大量粗藤也没有被开发利
用 ,若能利用钩藤研究开发食用抗氧化剂 ,不仅能充
分利用钩藤资源 ,而且增加了天然食用抗氧化剂的
资源。本文对钩藤提取物的抗氧化性、抗氧化成分
进行了研究。
1 材料与方法
1. 1 材料和仪器
钩藤 ,从药店购买(烘干粉碎) ;猪油(购市售猪
板油熬制) 。聚酰胺(30~60 目) ,薄层层析硅胶 G
(10~40μm) ,其他试剂均为分析纯。WFZ - 26A 紫
外可见光分光光度计 ,ZF - 1 三用紫外分析仪 ,层析
柱(Φ35 mm× 400 mm) ,HH - 6数显恒温水浴锅。
1. 2 钩藤提取物的制备
钩藤提取物制备流程如图1所示。
经抗氧化实验结果显示正己烷提取物( Ⅰ)的抗
氧化活性较弱 ,不再作分离。乙酸乙酯提取物( Ⅱ)
和甲醇提取物( Ⅲ)的抗氧化活性较强 ,因此作进一
步分离分析。由于 Ⅲ的成分复杂不易分离 ,故先作
柱层析分离。
图1 钩藤提取物制备流程
柱层析分离:取聚酰胺粉(筛选40~60目) 200 g
先用无水乙醇浸泡24 h ,再以4 mol L 的氢氧化钠溶
液浸泡24 h ,再以4 mol L 的盐酸溶液浸泡 24 h ,后
以蒸馏水洗至中性 ,湿法装柱至层析柱的 2 3。钩
藤甲醇提取浓缩液和少量聚酰胺粉拌匀 ,加热挥干
甲醇后加入层析柱 ,上面铺上一薄层棉花后分别以
蒸馏水、 30 %乙醇、 50 %乙醇、 70 %乙醇、 95 %乙醇、5 %NaOH水溶液淋洗 ,一种溶剂洗脱至颜色较浅时
换另一种。
经柱层析洗脱后分为6部分 ,即A :蒸馏水洗脱
液浓缩后成橙黄黏稠体 ,加入乙醇除去不溶物;B :
30 %乙醇洗脱液浓缩至干得橙色粉末;C:50 %乙醇
洗脱液浓缩至干得褐色粉末;D :70 %乙醇洗脱液浓
缩至干得褐色粉末; E:95 %乙醇洗脱液浓缩至干得
少量褐色粉末; F : 5 %NaOH 水溶液洗脱液是紫红
色 ,加盐酸调至中性 ,浓缩至干 ,加乙醇溶解除去盐 ,再浓缩至干得黑褐色粉末。
A和B 有部分成分相同且抗氧化活性相近(较
强) ,故合并后再作层析分离 ,C、 D、 E、 F抗氧化活性
62 中 国 油 脂 2004年第29卷第7期
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 表1 不同添加物的猪油在不同时间的 POV( meq kg)
添加物 恒温时间(d)
0 1 2 3 4 5 6 7 8
空白 1. 00 5. 64 11. 72 21. 80 40. 70 66. 48 97. 33 169. 44 230. 39
BHT 1. 00 0. 64 1. 69 2. 77 4. 25 5. 78 7. 74 9. 50 11. 49
Ⅰ 1. 00 4. 07 7. 16 11. 44 16. 41 32. 41 60. 63 107. 74 160. 37
Ⅱ 1. 00 1. 95 3. 70 4. 59 5. 30 5. 53 6. 72 8. 87 10. 91
Ⅲ 1. 00 2. 51 4. 61 5. 11 6. 11 7. 52 10. 74 15. 33 24. 87
Ⅱ A 1. 00 1. 33 3. 43 3. 91 4. 58 5. 19 6. 09 6. 45 8. 18
Ⅱ B 1. 00 0. 72 3. 60 4. 15 4. 81 5. 58 6. 27 6. 99 9. 01
A 1. 00 2. 89 4. 03 5. 00 6. 66 10. 02 12. 80 16. 74 22. 34
B 1. 00 2. 26 4. 85 5. 88 6. 41 9. 09 12. 27 15. 47 20. 24
C 1. 00 3. 87 6. 11 6. 30 7. 19 10. 60 16. 71 25. 72 37. 63
D 1. 00 1. 84 4. 23 6. 06 6. 88 9. 27 15. 44 23. 96 44. 31
E 1. 00 1. 71 4. 23 6. 00 7. 08 9. 83 16. 07 24. 30 44. 92
F 1. 00 2. 37 5. 14 8. 00 11. 40 16. 48 26. 53 38. 86 60. 01
a 1. 00 2. 57 3. 99 5. 47 5. 83 6. 96 8. 76 10. 46 12. 71
b 1. 00 2. 25 4. 48 5. 34 6. 00 6. 96 8. 30 9. 54 11. 23
c 1. 00 2. 15 4. 06 4. 77 6. 15 7. 27 9. 09 10. 53 13. 88
d 1. 00 2. 19 3. 65 4. 86 6. 49 8. 01 10. 67 20. 73 34. 31
e 1. 00 3. 24 4. 94 5. 41 7. 71 10. 95 13. 56 22. 95 40. 41
f 1. 00 3. 81 5. 16 6. 43 7. 98 11. 24 15. 88 26. 53 43. 49
注:BHT是食品添加剂二丁基羟基甲苯 ,添加量为猪油重的0102 % ......
作者简介:郑公铭(1966 - ) ,男 ,讲师;主要从事精细化
工专业教学和天然产物的研究开发。
文章编号:1003 - 7969 (2004) 07 - 0026 - 03 中图分类号:TQ641 文献标识码:A
钩藤提取物抗氧化作用的研究
郑公铭
(茂名学院应用化学系 ,525000广东省茂名市官渡二路139号)
摘要:对钩藤以正己烷、乙酸乙酯、甲醇在索氏提取器中依次提取 4 h ,并对乙酸乙酯提取物和
甲醇提取物进行了色谱分离 ,测定了各成分的抗氧化活性 ,通过显色反应和光谱分析对各成分进行
了初步鉴定。结果表明 ,钩藤中有两种黄酮苷元和一种黄酮苷的抗氧化活性比BHT强 ,两种黄酮
苷与BHT相近 ,3种酚酸和几种羟基蒽醌甙也有较强的抗氧化能力 ,但钩藤碱的抗氧化能力较差。
关键词:钩藤;抗氧化;黄酮;酚酸;羟基蒽醌甙
钩藤(Ramulus Uncariae cun Uncis)为茜草科植物
钩藤(Uncarin Rhynchophylla)及同属多种植物的带钩
茎枝 ,广泛分布于我国的东南、西南、中南地区。其
生长力强 ,种植简易 ,是一种常用中药。钩藤的有效
成分之一是钩藤生物碱 ,其功效是降压、镇静、抗惊、抗心律失常和平喘、抗血栓 ,目前已有厂家生产钩藤
生物碱制剂[1~4 ]。但除了生物碱(低极性) ,钩藤中
还有大量其他活性成分没有加以利用 ,而且采作药
物的只是带钩的细茎枝 ,大量粗藤也没有被开发利
用 ,若能利用钩藤研究开发食用抗氧化剂 ,不仅能充
分利用钩藤资源 ,而且增加了天然食用抗氧化剂的
资源。本文对钩藤提取物的抗氧化性、抗氧化成分
进行了研究。
1 材料与方法
1. 1 材料和仪器
钩藤 ,从药店购买(烘干粉碎) ;猪油(购市售猪
板油熬制) 。聚酰胺(30~60 目) ,薄层层析硅胶 G
(10~40μm) ,其他试剂均为分析纯。WFZ - 26A 紫
外可见光分光光度计 ,ZF - 1 三用紫外分析仪 ,层析
柱(Φ35 mm× 400 mm) ,HH - 6数显恒温水浴锅。
1. 2 钩藤提取物的制备
钩藤提取物制备流程如图1所示。
经抗氧化实验结果显示正己烷提取物( Ⅰ)的抗
氧化活性较弱 ,不再作分离。乙酸乙酯提取物( Ⅱ)
和甲醇提取物( Ⅲ)的抗氧化活性较强 ,因此作进一
步分离分析。由于 Ⅲ的成分复杂不易分离 ,故先作
柱层析分离。
图1 钩藤提取物制备流程
柱层析分离:取聚酰胺粉(筛选40~60目) 200 g
先用无水乙醇浸泡24 h ,再以4 mol L 的氢氧化钠溶
液浸泡24 h ,再以4 mol L 的盐酸溶液浸泡 24 h ,后
以蒸馏水洗至中性 ,湿法装柱至层析柱的 2 3。钩
藤甲醇提取浓缩液和少量聚酰胺粉拌匀 ,加热挥干
甲醇后加入层析柱 ,上面铺上一薄层棉花后分别以
蒸馏水、 30 %乙醇、 50 %乙醇、 70 %乙醇、 95 %乙醇、5 %NaOH水溶液淋洗 ,一种溶剂洗脱至颜色较浅时
换另一种。
经柱层析洗脱后分为6部分 ,即A :蒸馏水洗脱
液浓缩后成橙黄黏稠体 ,加入乙醇除去不溶物;B :
30 %乙醇洗脱液浓缩至干得橙色粉末;C:50 %乙醇
洗脱液浓缩至干得褐色粉末;D :70 %乙醇洗脱液浓
缩至干得褐色粉末; E:95 %乙醇洗脱液浓缩至干得
少量褐色粉末; F : 5 %NaOH 水溶液洗脱液是紫红
色 ,加盐酸调至中性 ,浓缩至干 ,加乙醇溶解除去盐 ,再浓缩至干得黑褐色粉末。
A和B 有部分成分相同且抗氧化活性相近(较
强) ,故合并后再作层析分离 ,C、 D、 E、 F抗氧化活性
62 中 国 油 脂 2004年第29卷第7期
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 表1 不同添加物的猪油在不同时间的 POV( meq kg)
添加物 恒温时间(d)
0 1 2 3 4 5 6 7 8
空白 1. 00 5. 64 11. 72 21. 80 40. 70 66. 48 97. 33 169. 44 230. 39
BHT 1. 00 0. 64 1. 69 2. 77 4. 25 5. 78 7. 74 9. 50 11. 49
Ⅰ 1. 00 4. 07 7. 16 11. 44 16. 41 32. 41 60. 63 107. 74 160. 37
Ⅱ 1. 00 1. 95 3. 70 4. 59 5. 30 5. 53 6. 72 8. 87 10. 91
Ⅲ 1. 00 2. 51 4. 61 5. 11 6. 11 7. 52 10. 74 15. 33 24. 87
Ⅱ A 1. 00 1. 33 3. 43 3. 91 4. 58 5. 19 6. 09 6. 45 8. 18
Ⅱ B 1. 00 0. 72 3. 60 4. 15 4. 81 5. 58 6. 27 6. 99 9. 01
A 1. 00 2. 89 4. 03 5. 00 6. 66 10. 02 12. 80 16. 74 22. 34
B 1. 00 2. 26 4. 85 5. 88 6. 41 9. 09 12. 27 15. 47 20. 24
C 1. 00 3. 87 6. 11 6. 30 7. 19 10. 60 16. 71 25. 72 37. 63
D 1. 00 1. 84 4. 23 6. 06 6. 88 9. 27 15. 44 23. 96 44. 31
E 1. 00 1. 71 4. 23 6. 00 7. 08 9. 83 16. 07 24. 30 44. 92
F 1. 00 2. 37 5. 14 8. 00 11. 40 16. 48 26. 53 38. 86 60. 01
a 1. 00 2. 57 3. 99 5. 47 5. 83 6. 96 8. 76 10. 46 12. 71
b 1. 00 2. 25 4. 48 5. 34 6. 00 6. 96 8. 30 9. 54 11. 23
c 1. 00 2. 15 4. 06 4. 77 6. 15 7. 27 9. 09 10. 53 13. 88
d 1. 00 2. 19 3. 65 4. 86 6. 49 8. 01 10. 67 20. 73 34. 31
e 1. 00 3. 24 4. 94 5. 41 7. 71 10. 95 13. 56 22. 95 40. 41
f 1. 00 3. 81 5. 16 6. 43 7. 98 11. 24 15. 88 26. 53 43. 49
注:BHT是食品添加剂二丁基羟基甲苯 ,添加量为猪油重的0102 % ......
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