怀牛膝组织培养及齐墩果酸定量分析的研究.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(73KB，2页)。
3 讨论
处方中决明子为君药 ,故我们选取其有效成分决明子总
蒽醌含量及浸出物含量为正交试验的优选指标 ,且在 90 min
以内显色稳定。
在供试品液制备过程中 ,加氯仿萃取时乳化现象较为严
重 ,较难分离。采用了氯仿水煎液回流提取后分离 ,解决此
问题 ,并缩短了分析时间。
为验证本实验所得最佳工艺条件的准确性 ,我们多次按
A2B2C3 的结果进行试验 ,结果决明子蒽醌含量为 2. 6100
mg g ,高于正交表中 9 个试验结果。验证实验进一步证明该
工艺稳定可行。因此筛选得到的最佳提取工艺为:加 10 倍
量水 ,煎煮 1. 5 h ,共煎 3 次。
参考文献:
[1 ]郑虎占.中药现代研究与应用(第一卷) [M] .北京:学苑出版社,1996. 562 - 571 ,597 - 620.
[2 ]郑虎占.中药现代研究与应用(第二卷) [M] .北京:学苑出版社,1997. 1995.
[ 3 ]中华人民共和国药典(一部) [M] .北京:化学工业出版社,2000.
113.
[ 4 ]梁生旺,刘伟.中药制剂定量分析[M] .北京:中国中医药出版社,1997. 257.
(编辑:刘晓峰)
怀牛膝组织培养及齐墩果酸定量分析的研究 Studies on Tissue Culture of Achyranthes Bidentata Bl . And Quantitative Analysis Oleanol ic
张丽萍Zhang Liping , 董诚明Dong Chengming , 金盖宇Jin Gaiyu
河南中医学院 Henan College of Traditional Chinese Medicine
摘要:目的:以怀牛膝的子叶为外植体 ,以愈伤指数与齐墩果酸含量优选最佳 MS培养基。方法: 在附加不同浓度和比例的
2 ,4 - D和 6 - BA的 MS培养基上 ,探讨植物生长调节物质对怀牛膝愈伤组织诱导、增殖的效应 ,通过薄层扫描测定齐墩果酸
含量。结果:在MS + 6 - BA 0. 5 mg L + 2. 4 - D 1. 5 mg L培养基上诱导率最高,形成愈伤组织时间最短,齐墩果酸含量最高。
Abstract : Objective : To select the best MS medium. Method : Culture in 2 , 4 - D , and 6 - BA medium , and stud y the effect of
plant growth regulators on its callus induction and proliferation. Determine the oleanolic content using TLC. Results : The highest in2
duction rate was found at MS + 6 - BA0. 5mg L + 2. 4 - D1. 5mg L medium , so are the shortest time and highest oleanolic content .
关键词:怀牛膝;组织培养;愈伤组织;齐墩果酸
Key words : Achyranthes Bidentata Bl ; tissue culture ; callus ; oleanolic
中图分类号 CLC number :R284. 1 文献标识码 Document code :A 文章编号Article ID :1006 - 3234 (2003) 04 - 0032 - 02
怀牛膝为苋科牛膝属植物牛膝(Achyranthes bidentata
BL. )的干燥根 ,主产河南沁阳、武陟等县。怀牛膝性甘、苦、酸、平 ,具有补肝肾、强筋骨、通血脉、降血压及镇痛等功效。
为了更好地探讨怀牛膝的有效成分 ,我们利用生物工程技术
改造怀牛膝品质 ,现已从怀牛膝子叶诱导出愈伤组织并对其
齐墩果酸进行含量测定。
1 怀牛膝的组织培养
1. 1 材料
供试材料怀牛膝为由武陟县医药公司提供的 2002 年产
的种子及干燥根 ,经河南中医学院生药学科鉴定为正品。
1. 2 种子处理
取培养皿数个 ,在每个培养皿内均匀铺一层脱脂棉 ,上
面盖一滤纸 ,加蒸馏水至完全将脱脂棉浸透 ,再将怀牛膝种
子 50 粒均匀种于滤纸上 ,最后把培养皿置 25 ±2 ℃的恒温
箱内 ,待发芽。
1. 3 培养基组合[ 1 ]
以 MS培养基为基本培养基 ,配制不同浓度和比例的
2 ,4 - D ,6 - BA组合 ,共 10 组 ......
处方中决明子为君药 ,故我们选取其有效成分决明子总
蒽醌含量及浸出物含量为正交试验的优选指标 ,且在 90 min
以内显色稳定。
在供试品液制备过程中 ,加氯仿萃取时乳化现象较为严
重 ,较难分离。采用了氯仿水煎液回流提取后分离 ,解决此
问题 ,并缩短了分析时间。
为验证本实验所得最佳工艺条件的准确性 ,我们多次按
A2B2C3 的结果进行试验 ,结果决明子蒽醌含量为 2. 6100
mg g ,高于正交表中 9 个试验结果。验证实验进一步证明该
工艺稳定可行。因此筛选得到的最佳提取工艺为:加 10 倍
量水 ,煎煮 1. 5 h ,共煎 3 次。
参考文献:
[1 ]郑虎占.中药现代研究与应用(第一卷) [M] .北京:学苑出版社,1996. 562 - 571 ,597 - 620.
[2 ]郑虎占.中药现代研究与应用(第二卷) [M] .北京:学苑出版社,1997. 1995.
[ 3 ]中华人民共和国药典(一部) [M] .北京:化学工业出版社,2000.
113.
[ 4 ]梁生旺,刘伟.中药制剂定量分析[M] .北京:中国中医药出版社,1997. 257.
(编辑:刘晓峰)
怀牛膝组织培养及齐墩果酸定量分析的研究 Studies on Tissue Culture of Achyranthes Bidentata Bl . And Quantitative Analysis Oleanol ic
张丽萍Zhang Liping , 董诚明Dong Chengming , 金盖宇Jin Gaiyu
河南中医学院 Henan College of Traditional Chinese Medicine
摘要:目的:以怀牛膝的子叶为外植体 ,以愈伤指数与齐墩果酸含量优选最佳 MS培养基。方法: 在附加不同浓度和比例的
2 ,4 - D和 6 - BA的 MS培养基上 ,探讨植物生长调节物质对怀牛膝愈伤组织诱导、增殖的效应 ,通过薄层扫描测定齐墩果酸
含量。结果:在MS + 6 - BA 0. 5 mg L + 2. 4 - D 1. 5 mg L培养基上诱导率最高,形成愈伤组织时间最短,齐墩果酸含量最高。
Abstract : Objective : To select the best MS medium. Method : Culture in 2 , 4 - D , and 6 - BA medium , and stud y the effect of
plant growth regulators on its callus induction and proliferation. Determine the oleanolic content using TLC. Results : The highest in2
duction rate was found at MS + 6 - BA0. 5mg L + 2. 4 - D1. 5mg L medium , so are the shortest time and highest oleanolic content .
关键词:怀牛膝;组织培养;愈伤组织;齐墩果酸
Key words : Achyranthes Bidentata Bl ; tissue culture ; callus ; oleanolic
中图分类号 CLC number :R284. 1 文献标识码 Document code :A 文章编号Article ID :1006 - 3234 (2003) 04 - 0032 - 02
怀牛膝为苋科牛膝属植物牛膝(Achyranthes bidentata
BL. )的干燥根 ,主产河南沁阳、武陟等县。怀牛膝性甘、苦、酸、平 ,具有补肝肾、强筋骨、通血脉、降血压及镇痛等功效。
为了更好地探讨怀牛膝的有效成分 ,我们利用生物工程技术
改造怀牛膝品质 ,现已从怀牛膝子叶诱导出愈伤组织并对其
齐墩果酸进行含量测定。
1 怀牛膝的组织培养
1. 1 材料
供试材料怀牛膝为由武陟县医药公司提供的 2002 年产
的种子及干燥根 ,经河南中医学院生药学科鉴定为正品。
1. 2 种子处理
取培养皿数个 ,在每个培养皿内均匀铺一层脱脂棉 ,上
面盖一滤纸 ,加蒸馏水至完全将脱脂棉浸透 ,再将怀牛膝种
子 50 粒均匀种于滤纸上 ,最后把培养皿置 25 ±2 ℃的恒温
箱内 ,待发芽。
1. 3 培养基组合[ 1 ]
以 MS培养基为基本培养基 ,配制不同浓度和比例的
2 ,4 - D ,6 - BA组合 ,共 10 组 ......
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