黄连配方颗粒的HPLC指纹图谱研究.PDF
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2006年2月23日
| 第1页 |
参见附件(222KB，3页)。
黄连配方颗粒的HPLC 指纹图谱研究
周 晖, 刘 萌X
(温州市药品检验所, 浙江 温州 325028)
配方颗粒是我国 1993 年尝试中药改革而发展
的新剂型。产品采用将中药饮片经浸提、浓缩、干燥
等若干工艺精制而成, 保持原中药饮片的性味与功
能。2001 年国家药品监督管理局发布的《中药配方
颗粒管理暂行规定》已明确规定配方颗粒可以在全
国范围试点临床医院进行使用, 并对其质量标准的
研究作了技术要求。本实验对批准研制的 3 家企业
的黄连配方颗粒进行HPLC 指纹图谱研究, 以便了
解配方颗粒与原料饮片、药材在总成分和有效成分
方面的符合程度, 比较和评价不同制备工艺与产品
的内在质量、均一性等关系, 建立符合中药特点的质
量标准。
1 仪器与材料
W aters 高效液相色谱仪, 515 泵二组, 2487 紫
外检测器, 717 自动进样系统。乙腈为色谱纯, 其他
试剂为分析纯。黄连配方颗粒及原料饮片由临床试
用医院和研制企业提供(表 1)。黄连对照药材和盐
酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检定所提供。
表 1 样品来源
Table 1 Sample resources
编号 批 号 规 格 生产单位与来源
A 1 010320 每袋相当饮片3 g 深圳三九医药贸易有限公司
A 2 021020 同上 同上
A 3 021115 同上 同上
A 饮片 饮片 同上(产地: 四川)
B1 020914 每袋相当饮片3 g 广东一方制药有限公司
B2 021231 同上 同上
B3 030850 同上 同上
B饮片 饮片 同上(产地: 四川)
C1 0204051 每袋相当饮片3 g 江阴天江药业有限公司
C2 0210073 同上 同上
C3 0309025 同上 同上
C饮片 饮片 同上(产地: 四川)
2 方法和结果
211 色谱条件: 色谱柱为A lltech C18 (250 mm ×
416 mm , 5 L m) , 流动相为乙腈20105 mo l? L 磷酸二
氢钾, 梯度洗脱: 0～ 15 m in 乙腈由 15%升为 25% ,保持 15 m in, 30～ 45 m in 乙腈由 25%升为 35% , 再
保持15m in 至60m in; 流速为015mL? m in; 检测波
长为350 nm; 温度为 30 ℃; 进样量为10 L L。
212 对照品溶液的制备: 精密称取盐酸小檗碱对照
品适量, 用 1%醋酸水溶液稀释成 40 Lg? mL 的溶
液, 即得。
213 对照药材溶液的制备: 精密称取黄连对照药材
粉末 1 g, 置 100 mL 量瓶中, 加 1%醋酸水溶液约
80 mL , 超声 30 m in, 放冷, 加溶剂至刻度, 摇匀, 滤
过。精密取续滤液3mL 置25 mL 量瓶中, 加1%醋
酸水溶液稀释至刻度, 摇匀, 即得。
214 供试品溶液的制备: 取黄连配方颗粒 1? 3 袋
(相当于饮片 1 g)及原料黄连饮片 1 g (研成粉末) ,精密称定, 分别置 100 mL 量瓶中, 按对照药材溶液
的制备方法制备, 即得。
215 测定方法: 取各供试品溶液和对照品溶液, 按
上述色谱条件注入高效液相色谱仪, 记录色谱图, 计
算, 即得。
216 方法学考察
21611 精密度试验: 取同批供试品溶液连续进样 6
次, 测共有峰11 个, 各共有峰相对峰面积RSD< 3%。
21612 重复性试验: 取同批颗粒 6 份, 按供试品溶
液制备法制备, 分别进样, 测得各共有峰相对峰面积
的RSD< 3%。
21613 稳定性试验: 取同批供试品溶液分别在 0,6, 12, 24, 36 h 进样, 测得各共有峰相对峰面积的
RSD< 3% , 表明供试品溶液在 36 h 内稳定。
217 指纹图谱与各项技术参数
21711 共有峰的指定: 比较对照药材与供试品的
HPLC 图和相关参数, 得出其中共有峰11 个(图1)。
21712 共有峰的相对保留时间、峰面积、相对峰面
积: 11 号峰为盐酸小檗碱, 是黄连的主成分, 其峰面
积平均占总峰面积的 57% , 比较稳定, 选择作为参
照峰。共有峰的相对保留时间和相对峰面积见表2,3。由表 3 可见样品间的共有峰相对面积RSD <
4%。共有峰峰面积占总峰面积的 9915% , RSD 为
012% , 符合指纹图谱的有关规定(表4)。
· 046 · 中草药 Ch inese T radit ional and HerbalD rugs 第 35 卷第 6 期 2004 年 6 月
X 收稿日期: 2003211213
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.表 2 样品和对照药材的共有峰相对保留时间
Table 2 Relat ive reten t ion t ime of common peaks of samples and Rh izoma Cop t id is
编 号 共有峰相对保留时间
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 r
对照药材 0 . 14 0 . 17 0 . 21 0 . 24 0 . 58 0 . 73 0 . 76 0 . 77 0 . 81 0 . 96 1 1 . 000
A 1 0 . 14 0 . 16 0 . 20 0 . 23 0 . 57 0 . 72 0 . 75 0 . 76 0 . 80 0 . 95 1 1 . 000
A 2 0 . 14 0 . 16 0 . 21 0 . 24 0 . 57 0 . 74 0 . 76 0 . 78 0 . 82 0 . 96 1 1 . 000
A 3 0 . 14 0 . 16 0 . 20 0 . 23 0 . 57 0 . 73 0 . 76 0 . 77 0 . 81 0 . 96 1 1 . 000
A 饮片 0 . 14 0 . 16 0 . 21 0 . 24 0 . 57 0 . 72 0 . 75 0 . 77 0 . 81 0 . 96 1 1 . 000 ......
周 晖, 刘 萌X
(温州市药品检验所, 浙江 温州 325028)
配方颗粒是我国 1993 年尝试中药改革而发展
的新剂型。产品采用将中药饮片经浸提、浓缩、干燥
等若干工艺精制而成, 保持原中药饮片的性味与功
能。2001 年国家药品监督管理局发布的《中药配方
颗粒管理暂行规定》已明确规定配方颗粒可以在全
国范围试点临床医院进行使用, 并对其质量标准的
研究作了技术要求。本实验对批准研制的 3 家企业
的黄连配方颗粒进行HPLC 指纹图谱研究, 以便了
解配方颗粒与原料饮片、药材在总成分和有效成分
方面的符合程度, 比较和评价不同制备工艺与产品
的内在质量、均一性等关系, 建立符合中药特点的质
量标准。
1 仪器与材料
W aters 高效液相色谱仪, 515 泵二组, 2487 紫
外检测器, 717 自动进样系统。乙腈为色谱纯, 其他
试剂为分析纯。黄连配方颗粒及原料饮片由临床试
用医院和研制企业提供(表 1)。黄连对照药材和盐
酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检定所提供。
表 1 样品来源
Table 1 Sample resources
编号 批 号 规 格 生产单位与来源
A 1 010320 每袋相当饮片3 g 深圳三九医药贸易有限公司
A 2 021020 同上 同上
A 3 021115 同上 同上
A 饮片 饮片 同上(产地: 四川)
B1 020914 每袋相当饮片3 g 广东一方制药有限公司
B2 021231 同上 同上
B3 030850 同上 同上
B饮片 饮片 同上(产地: 四川)
C1 0204051 每袋相当饮片3 g 江阴天江药业有限公司
C2 0210073 同上 同上
C3 0309025 同上 同上
C饮片 饮片 同上(产地: 四川)
2 方法和结果
211 色谱条件: 色谱柱为A lltech C18 (250 mm ×
416 mm , 5 L m) , 流动相为乙腈20105 mo l? L 磷酸二
氢钾, 梯度洗脱: 0～ 15 m in 乙腈由 15%升为 25% ,保持 15 m in, 30～ 45 m in 乙腈由 25%升为 35% , 再
保持15m in 至60m in; 流速为015mL? m in; 检测波
长为350 nm; 温度为 30 ℃; 进样量为10 L L。
212 对照品溶液的制备: 精密称取盐酸小檗碱对照
品适量, 用 1%醋酸水溶液稀释成 40 Lg? mL 的溶
液, 即得。
213 对照药材溶液的制备: 精密称取黄连对照药材
粉末 1 g, 置 100 mL 量瓶中, 加 1%醋酸水溶液约
80 mL , 超声 30 m in, 放冷, 加溶剂至刻度, 摇匀, 滤
过。精密取续滤液3mL 置25 mL 量瓶中, 加1%醋
酸水溶液稀释至刻度, 摇匀, 即得。
214 供试品溶液的制备: 取黄连配方颗粒 1? 3 袋
(相当于饮片 1 g)及原料黄连饮片 1 g (研成粉末) ,精密称定, 分别置 100 mL 量瓶中, 按对照药材溶液
的制备方法制备, 即得。
215 测定方法: 取各供试品溶液和对照品溶液, 按
上述色谱条件注入高效液相色谱仪, 记录色谱图, 计
算, 即得。
216 方法学考察
21611 精密度试验: 取同批供试品溶液连续进样 6
次, 测共有峰11 个, 各共有峰相对峰面积RSD< 3%。
21612 重复性试验: 取同批颗粒 6 份, 按供试品溶
液制备法制备, 分别进样, 测得各共有峰相对峰面积
的RSD< 3%。
21613 稳定性试验: 取同批供试品溶液分别在 0,6, 12, 24, 36 h 进样, 测得各共有峰相对峰面积的
RSD< 3% , 表明供试品溶液在 36 h 内稳定。
217 指纹图谱与各项技术参数
21711 共有峰的指定: 比较对照药材与供试品的
HPLC 图和相关参数, 得出其中共有峰11 个(图1)。
21712 共有峰的相对保留时间、峰面积、相对峰面
积: 11 号峰为盐酸小檗碱, 是黄连的主成分, 其峰面
积平均占总峰面积的 57% , 比较稳定, 选择作为参
照峰。共有峰的相对保留时间和相对峰面积见表2,3。由表 3 可见样品间的共有峰相对面积RSD <
4%。共有峰峰面积占总峰面积的 9915% , RSD 为
012% , 符合指纹图谱的有关规定(表4)。
· 046 · 中草药 Ch inese T radit ional and HerbalD rugs 第 35 卷第 6 期 2004 年 6 月
X 收稿日期: 2003211213
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.表 2 样品和对照药材的共有峰相对保留时间
Table 2 Relat ive reten t ion t ime of common peaks of samples and Rh izoma Cop t id is
编 号 共有峰相对保留时间
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 r
对照药材 0 . 14 0 . 17 0 . 21 0 . 24 0 . 58 0 . 73 0 . 76 0 . 77 0 . 81 0 . 96 1 1 . 000
A 1 0 . 14 0 . 16 0 . 20 0 . 23 0 . 57 0 . 72 0 . 75 0 . 76 0 . 80 0 . 95 1 1 . 000
A 2 0 . 14 0 . 16 0 . 21 0 . 24 0 . 57 0 . 74 0 . 76 0 . 78 0 . 82 0 . 96 1 1 . 000
A 3 0 . 14 0 . 16 0 . 20 0 . 23 0 . 57 0 . 73 0 . 76 0 . 77 0 . 81 0 . 96 1 1 . 000
A 饮片 0 . 14 0 . 16 0 . 21 0 . 24 0 . 57 0 . 72 0 . 75 0 . 77 0 . 81 0 . 96 1 1 . 000 ......
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