文章编号: 1007 - 6611 (2003) 01 - 0045 - 02

    连翘有效部位分离条件的选择

    白云娥1

    , 申国华2

    , 张丽芬3

    , 李青山1

    , 漆小梅1

    (

    1

    山西医科大学药学院中药学教研室, 太原 030001 ; 2

    山

    西省药品检验所中药室; 3

    山西医科大学药学专业 2002届毕业生)

    摘要: 目的 筛选连翘有效部位的分离条件。方法 采用硅胶柱层析和大孔树脂柱层析。结果 大孔树脂层析法较好。

    结论 大孔树脂可用于连翘有效部位的富集、分离。该法简便、经济、安全 ,可为连翘的进一步研究奠定基础。

    关键词: 中草药; 工艺学 ,制药; 色谱法 ,凝胶; 连翘

    中图分类号: R28412 文献标识码: A

    中药连翘 ( f ructus forsythiae ) 为本犀科植物连翘

    [ Forsythia syspensa ( Thunb) Vahl ]的干燥果实 ,具有清热解

    毒、消肿散结的功效。根据果实的成熟程度 ,商品中有青翘

    和老翘之分。据文献报道[ 1 ]

    ,连翘的有效成分十分复杂 ,有

    连翘苷、连翘酯苷、连翘酚、挥发油类、芦丁、熊果酸、齐墩果

    酸等 ,但意见不一。药理实验表明连翘有广谱的抗菌作用 ,对多种革兰氏阳性及阴性细菌均有抑制作用。为了筛选连

    翘制剂的工艺 ,富集、分离连翘抗菌部位 ,我们采用了硅胶柱

    层析和大孔树脂柱层析。

    1 材料和方法

    1. 1 仪器与材料 RE - 52AA 旋转蒸发器(上海亚荣生化

    仪器厂) ;紫外透射反射仪(北京市技术应用研究所) ;层离管

    (内径115 cm ,长度30 cm) ;硅胶 GF254 (60 型 ,中国青岛化工

    集团公司) ;大孔树脂 HPD600 (沧州宝恩公司) ;连翘(山西

    省药材公司批发部) ;分配层析硅胶(天津市化学试剂三厂) ;

    乙醇、氯仿、甲醇(分析纯) (北京化工厂) 。

    1. 2 样品制备 取连翘 200 g ,敲碎 ,装入 3 000 ml 的圆底

    烧瓶中,依次加入10、 8、 6倍量的水,将之放入水浴中温浸 2 h ,并不时地搅拌。然后过滤 ,收集滤液 ,将滤液用旋转蒸发器

    浓缩 ,放入真空箱 ,并用 P2O5 作为吸湿剂 ,干燥得样品重

    2415 g。

    1. 3 分离

    1. 3. 1 装柱 柱 1 :称取约 40 g大孔树脂 ,95 %乙醇浸泡过

    夜 ,湿法上柱 ,继续用 95 %乙醇在柱上流动清洗至洗脱液中

    加水无沉淀产生为止 ,然后以大量蒸馏水洗至无醇味 ,备用。

    柱 2 :称取 30 g的分配层析硅胶 ,在柱子底部塞一团棉花 ,用

    漏斗装柱 ,同时不停地轻敲柱壁 ,以使装柱均匀 ,备用。

    1. 3. 2 上样 称取样品 1 g ,溶于一定体积的蒸馏水中 ,加

    入柱 1 ,静置过夜。再称取样品 1g ,加入 1 g 的分配层析硅

    胶 ,放入研钵中 ,研细 ,装入柱 2 中 ,并在其上再塞一团棉花

    防止样品漂浮。

    1. 3. 3 洗脱 柱 1 :采用梯度洗脱法 ,用 TLC跟踪检测 ,用

    GF254板 ,以丁酮∶乙酸乙酯∶甲酸∶水∶苯(4∶ 3∶ 1∶ 1∶ 2)的上层

    液为展开剂 ,于紫外灯观察。先用蒸馏水洗至洗脱液无色 ,且 TLC跟踪无斑点 ,再分别用 10 %、 30 %、 50 %、 70 %、 95 %

    的乙醇进行洗脱 ,且用 TLC跟踪。同时合并相同斑点的洗

    脱液。柱2 :将氯仿∶甲醇配成不同的比例 ,依次以10∶ 0 ,10∶ 1 ,8∶ 1 ,7∶ 1 ,5∶ 1 ,4∶ 1 ,3∶ 1 的比例进行洗脱 ,在硅胶 GF254

    板上进行跟踪。以丁酮∶乙酸乙酯∶甲醇∶水∶苯(4∶ 3∶ 1∶ 1∶ 2)

    的上层液为展开剂。同时合并相同斑点的洗脱液 ......