木耳孢子单核菌株培养性状多态性研究.PDF
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2006年2月23日
第1页 |
参见附件(139KB,4页)。
收稿日期: 2002 - 07 - 29 初稿; 2003 - 04 - 15 修改稿
基金项目: 华中农业大学农业微生物农业部重点实验室开放课题(AML007) ,河南省自然科学基金项目(0311030500)
部分内容
作者简介: 何培新(1970 - ) ,男,1991 年毕业于山东大学微生物学专业,学士学位;1996 年毕业于华中农业大学微生物
学专业,硕士学位,副教授。研究方向:蕈菌生物技术。在各种学术刊物上发表论文12 篇,出版著作3 部
食用菌学报 2003. 10 (2) :1~4
Acta Edul is Fungi
文章编号:1005 - 9873(2003) 02 - 0001 - 04
木耳孢子单核菌株培养性状多态性研究3
何培新1
, 申进文2
, 罗信昌3
, 杨绳桃4
(
1
河南职业技术师范学院生物工程系 ,河南新乡 453003 ;
2
河南省科学院生物研究所 ,河南郑州 450008 ;
3
华中农业大学农业微生物农业部重点实验室 ,湖北武汉 430070 ;
4
华中农业大学植物保护系中心实验室 ,湖北武汉 430070)
摘 要: 研究了 38 个木耳孢子单核菌株的菌丝生长势、菌丝生长速度多态性与其交配型的关
系。结果表明 ,供试的木耳孢子单核菌株在菌丝生长速度和菌丝生长势等培养性状方面出现了一
定程度的多态性。在测定的38 个孢子单核菌株中 ,交配型A有21 个菌株 ,交配型a有17 个菌株 ,A∶ a = 21∶ 17。经 X2
检验 ,两种交配型未出现 1∶ 1 严重偏离。这表明 ,木耳孢子单核菌株的菌丝生
长势和菌丝生长速度与其交配型无明显相关性。
关键词: 木耳; 孢子单核菌株; 菌丝生长势; 菌丝生长速度; 多态性; 交配型
中图分类号: S646. 603. 6 文献标识码: A
我国是世界上主要的木耳 ( A uricularia auricula) 生产国 ,年产量占世界总产量的90 %以
上[1 ]。由于木耳菌丝生长较慢 ,抗杂能力较弱 ,严重影响了木耳的产量和质量 ,制约着木耳生
产的持续稳定发展。为提高木耳的产量和质量 ,除改进生产工艺、优化栽培条件、提高生产的
机械化程度以外 ,还可以从育种着手 ,通过杂交育种选育抗杂能力强、生产性状好的优良栽培
菌株。为此 ,杂交亲本的选择就非常重要。一般来说 ,亲本性状差异显著 ,杂交后代的杂种优
势就较明显 ,获得优良杂交菌株的可能性就比较大。杂交育种一般选用优缺点互补的亲本孢
子单核菌株进行杂交。由于孢子单核菌株是减数分裂的产物 ,经过亲本 DNA 的交换和重组 ,菌株之间会产生较明显的遗传差异 ,杂交后代有可能会产生一些母本菌株所不具备的新的遗
传性状以及优于母本的很多生产性状。因此 ,研究木耳孢子单核菌株之间遗传性状的多态性 ,探讨这些遗传性状在杂交育种理想亲本选择上的应用 ,具有重要的理论意义和实际意义。
1 材料和方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供试菌株
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.木耳Au28 菌株 ,河南职业技术师范学院应用微生物实验室保藏菌种。
1. 1. 2 供试培养基
栽培培养基:杂木屑 45 % ,棉籽壳 45 % ,麸皮 8 % ,蔗糖 1 % ,石膏 1 % ,料水比 1∶ 1 ,用于
Au28 菌株小规模栽培。
完全培养基(CYM) :蛋白胨 2g ,酵母膏 2g ,硫酸镁 0. 5g ,磷酸二氢钾 0. 46g ,磷酸氢二钾
1. 0g ,葡萄糖 20g ,蒸馏水 1000mL ,琼脂 20g ,用于Au28 菌株和孢子单核菌株菌丝培养。
1. 2 方法
1. 2. 1 Au28 孢子单核菌株的获得
Au28 菌株经过代料栽培 ,获得子实体 ,弹射担孢子 ,担孢子经稀释分离获得 160 个孢子萌
发菌株。萌发菌株经插片培养 ,镜检 ,挑选出没有锁状联合的菌株 ,再进行细胞核荧光染
色[2 ]
,确定每个细胞只有一个细胞核的菌株为孢子单核菌株。鉴定出 58 个孢子单核菌株 ,随
机选择 38 个用于本研究。
1. 2. 2 菌丝生长势和菌丝生长速度测定
将供试孢子单核菌株活化培养 ,取单核菌丝体(< = 0. 6cm ,带有少量培养基)接种 CYM 平
板 ,每个菌株 3 次重复 ,28 ℃恒温培养 ,每天观察记录菌丝生长情况 ,测量菌落直径 ,按照下列
公式计算菌丝生长速度。
菌丝生长速度 = (菌落直径 - 0. 6) (2 ×菌丝生长天数)
1. 2. 3 交配型测定
采用孢子单核菌株配对培养方法测定交配型[3 ]。
2 结果与分析
2. 1 孢子单核菌株菌丝生长势
根据菌丝生长情况 ,菌丝生长势可分为 5 种类型。类型 Ⅰ(9 个菌株) :菌丝绒毛状 ,气生
菌丝旺盛 ,粗壮 ,浓密 ,色白;类型 Ⅱ(11 个菌株) :菌丝绒毛状 ,气生菌丝较旺盛 ,比较粗壮、浓
密 ,色白;类型 Ⅲ(13 个菌株) :菌丝细绒毛状 ,气生菌丝旺盛 ,粗壮 ,较浓密 ,色白;类型 Ⅳ(3 个
菌株) :菌丝细弱 ,气生菌丝不茂盛 ,色浅白或浅黄色;类型 Ⅴ(2 个菌株) :菌落粉质 ,气生菌丝
细弱 ,颜色浅黄 ......
基金项目: 华中农业大学农业微生物农业部重点实验室开放课题(AML007) ,河南省自然科学基金项目(0311030500)
部分内容
作者简介: 何培新(1970 - ) ,男,1991 年毕业于山东大学微生物学专业,学士学位;1996 年毕业于华中农业大学微生物
学专业,硕士学位,副教授。研究方向:蕈菌生物技术。在各种学术刊物上发表论文12 篇,出版著作3 部
食用菌学报 2003. 10 (2) :1~4
Acta Edul is Fungi
文章编号:1005 - 9873(2003) 02 - 0001 - 04
木耳孢子单核菌株培养性状多态性研究3
何培新1
, 申进文2
, 罗信昌3
, 杨绳桃4
(
1
河南职业技术师范学院生物工程系 ,河南新乡 453003 ;
2
河南省科学院生物研究所 ,河南郑州 450008 ;
3
华中农业大学农业微生物农业部重点实验室 ,湖北武汉 430070 ;
4
华中农业大学植物保护系中心实验室 ,湖北武汉 430070)
摘 要: 研究了 38 个木耳孢子单核菌株的菌丝生长势、菌丝生长速度多态性与其交配型的关
系。结果表明 ,供试的木耳孢子单核菌株在菌丝生长速度和菌丝生长势等培养性状方面出现了一
定程度的多态性。在测定的38 个孢子单核菌株中 ,交配型A有21 个菌株 ,交配型a有17 个菌株 ,A∶ a = 21∶ 17。经 X2
检验 ,两种交配型未出现 1∶ 1 严重偏离。这表明 ,木耳孢子单核菌株的菌丝生
长势和菌丝生长速度与其交配型无明显相关性。
关键词: 木耳; 孢子单核菌株; 菌丝生长势; 菌丝生长速度; 多态性; 交配型
中图分类号: S646. 603. 6 文献标识码: A
我国是世界上主要的木耳 ( A uricularia auricula) 生产国 ,年产量占世界总产量的90 %以
上[1 ]。由于木耳菌丝生长较慢 ,抗杂能力较弱 ,严重影响了木耳的产量和质量 ,制约着木耳生
产的持续稳定发展。为提高木耳的产量和质量 ,除改进生产工艺、优化栽培条件、提高生产的
机械化程度以外 ,还可以从育种着手 ,通过杂交育种选育抗杂能力强、生产性状好的优良栽培
菌株。为此 ,杂交亲本的选择就非常重要。一般来说 ,亲本性状差异显著 ,杂交后代的杂种优
势就较明显 ,获得优良杂交菌株的可能性就比较大。杂交育种一般选用优缺点互补的亲本孢
子单核菌株进行杂交。由于孢子单核菌株是减数分裂的产物 ,经过亲本 DNA 的交换和重组 ,菌株之间会产生较明显的遗传差异 ,杂交后代有可能会产生一些母本菌株所不具备的新的遗
传性状以及优于母本的很多生产性状。因此 ,研究木耳孢子单核菌株之间遗传性状的多态性 ,探讨这些遗传性状在杂交育种理想亲本选择上的应用 ,具有重要的理论意义和实际意义。
1 材料和方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供试菌株
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.木耳Au28 菌株 ,河南职业技术师范学院应用微生物实验室保藏菌种。
1. 1. 2 供试培养基
栽培培养基:杂木屑 45 % ,棉籽壳 45 % ,麸皮 8 % ,蔗糖 1 % ,石膏 1 % ,料水比 1∶ 1 ,用于
Au28 菌株小规模栽培。
完全培养基(CYM) :蛋白胨 2g ,酵母膏 2g ,硫酸镁 0. 5g ,磷酸二氢钾 0. 46g ,磷酸氢二钾
1. 0g ,葡萄糖 20g ,蒸馏水 1000mL ,琼脂 20g ,用于Au28 菌株和孢子单核菌株菌丝培养。
1. 2 方法
1. 2. 1 Au28 孢子单核菌株的获得
Au28 菌株经过代料栽培 ,获得子实体 ,弹射担孢子 ,担孢子经稀释分离获得 160 个孢子萌
发菌株。萌发菌株经插片培养 ,镜检 ,挑选出没有锁状联合的菌株 ,再进行细胞核荧光染
色[2 ]
,确定每个细胞只有一个细胞核的菌株为孢子单核菌株。鉴定出 58 个孢子单核菌株 ,随
机选择 38 个用于本研究。
1. 2. 2 菌丝生长势和菌丝生长速度测定
将供试孢子单核菌株活化培养 ,取单核菌丝体(< = 0. 6cm ,带有少量培养基)接种 CYM 平
板 ,每个菌株 3 次重复 ,28 ℃恒温培养 ,每天观察记录菌丝生长情况 ,测量菌落直径 ,按照下列
公式计算菌丝生长速度。
菌丝生长速度 = (菌落直径 - 0. 6) (2 ×菌丝生长天数)
1. 2. 3 交配型测定
采用孢子单核菌株配对培养方法测定交配型[3 ]。
2 结果与分析
2. 1 孢子单核菌株菌丝生长势
根据菌丝生长情况 ,菌丝生长势可分为 5 种类型。类型 Ⅰ(9 个菌株) :菌丝绒毛状 ,气生
菌丝旺盛 ,粗壮 ,浓密 ,色白;类型 Ⅱ(11 个菌株) :菌丝绒毛状 ,气生菌丝较旺盛 ,比较粗壮、浓
密 ,色白;类型 Ⅲ(13 个菌株) :菌丝细绒毛状 ,气生菌丝旺盛 ,粗壮 ,较浓密 ,色白;类型 Ⅳ(3 个
菌株) :菌丝细弱 ,气生菌丝不茂盛 ,色浅白或浅黄色;类型 Ⅴ(2 个菌株) :菌落粉质 ,气生菌丝
细弱 ,颜色浅黄 ......
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