收稿 2002207215 修定 2002211218

    资助 四川省中江县中药材(丹参)科技种植示范项目[川中药基

    领(2001) 01 ]。

    3 通讯作者( E2mail :nyz @sicau. edu. cn , Tel :083522882786) 。

    南丹参离体快速繁殖与多倍体诱导

    段英姿1

    牛应泽1 , 3

    刘玉贞1

    郭世星1

    彭朝忠2

    (

    1

    四川农业大学油菜研究中心 , 四川雅安 625000 ;

    2

    四川省中江县农业局 ,四川中江 618100)

    提要 MS附加 62BA 2. 0 mg· L - 1

    和 IAA 0. 2 mg· L - 1

    的培养基上诱导南丹参丛生芽的频率最高(达 100 %) ,每一丛生芽数

    达 20～30 个 ,移栽成活率 90 %。MS附加 62BA 2. 0 mg· L - 1

    和 2 ,42D 0. 2 mg· L - 1

    培养基上 ,叶缘及叶柄上长出绿芽或浅褐

    色愈伤组织 ,经多次继代仍具有分化植株能力。多倍体诱导以秋水仙碱 15 mg· L - 1

    处理愈伤组织和预培养 1 周 ,处理时间 1

    周的叶片诱导效果较好 ,加倍率可达 33. 33 % ,且多数为整株加倍。加倍植株叶片较肥厚宽大、皱折增多、色深、根粗壮 ,气孔

    比二倍体明显增大 ,染色体数为 28～32 条不等 ,其中可见部分为同源四倍体。

    关键词 南丹参; 快速繁殖; 秋水仙碱; 多倍体诱导

    In vi t ro Rapid Propagation and Induction of Polyploidy with Colchicine in

    Salvia bowleyana

    DUAN Ying2Zi

    1

    , NIU Ying2Ze

    1 , 3

    , L IU Yu2Zhen1

    , GUO Shi2Xing1

    ,PENG Chao2Zhong2

    (

    1

    Rapeseed Research Center , Sichuan

    A gricul tural Universi ty , Yaan , Sichuan 625000;

    2

    Zhongjiang A gricul tural Beauro , Zhongjiang , Sichuan 618100)

    Abstract A high f requency (100 %) of clump sprout s induction in S al via bowleyana was observed on the MS

    medium with 2. 0 mg· L - 1

    62BA , 0. 2 mg· L - 1

    IAA. The number of clump sprout s counted to 20～30 , and

    the survival rate af ter t ransplantation was 90 %. The green sprout s and the pale brown calli f rom the leaf edges

    and the petioles on the MS medium with 2. 0 mg· L - 1

    62BA and 0. 2 mg· L - 1

    2 ,42D still showed the capability

    of differentiation af ter several subcultures. In polyploid induction , the t reatment s of calli and leaf slices , pre2

    cultured with 15 mg· L - 1

    of colchicine for one week , showed the best doubling effect s , the doubling rate

    reached 33. 33 % , in which the majority were wholly doubled plant s. The doubled plant s produced thicker and

    broader leaves with a darker color , a thick root system and an obviously bigger stoma size , as compared to the

    diploid plant s. Chromosome numbers of the doubled plant s ranged f rom 28 to 32 , part s of the doubled plant s

    were identified as homologmous tet raploids.

    Key words S al via bowleyana ; rapid propagation ; colchicine ; polyploid induction

    在生产中由于南丹参不易得到种子 , 一般用

    根繁殖 , 用种量大 , 且长期用根进行无性繁殖易感

    染病毒 , 导致种群退化、产量下降、品质变劣。用南

    丹参优良株系的茎尖或幼叶进行组织培养快速繁

    殖 , 1 株良种苗 1 年可繁殖上万株试管苗 , 可迅速

    扩大优良种群。在离体培养过程中 , 结合人工多倍

    体的诱导 , 方法简单 , 处理植株量大、诱导率高、繁

    殖快。四倍体植株根、茎、叶比二倍体大 , 长势旺 ,经过选育可望获得产量高、药用化学成分含量也提

    高的新品系。因此 , 我们对南丹参叶片脱分化和根

    芽分化的生长调节物质调控 , 以及秋水仙碱浓度、处理方式、处理时间对诱导多倍体的效应和多倍体

    鉴定等进行了研究。本文报道得到的初步结果。

    材料与方法

    实验材料南丹参( S al via bowleyana)由四川省

    优质丹参生产基地中江县科技局提供 ,为当地大面

    102 植物生理学通讯 第 39 卷 第 3 期 , 2003年 6 月

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.积栽培的优良品种之一。2001 年春从中江县采集

    南丹参膨大的根 ,栽于四川农业大学教学实验农

    场。出苗后 ,取幼芽在室内进行快速繁殖 ,并为进

    一步加倍试验提供材料。

    快速繁殖南丹参 取 2～3 cm 幼芽流水冲洗

    后 ,在 75 %酒精中泡 30 s ,0. 1 %升汞液中消毒 8

    min ,无菌水冲洗 3 次 ,用无菌纸吸干 ,分别取茎尖、叶片、叶柄 ,切成 0. 5 cm2

    左右的小块 ,迅速接种在

    培养基上 ,于(25 ±1) ℃、光照度2 000 lx、光照 12

    h· d - 1

    条件下培养。培养基组成为: (1) 诱导培养

    基 ,MS + 1～2 mg· L - 1

    62BA + 7 g· L - 1

    琼脂 + 3 %

    蔗糖 ,分别附加 0. 2 mg· L - 1

    2 ,42D、 0. 2 mg· L - 1

    IAA 或0. 2 mg· L - 1

    NAA ; 对照则不加生长素 , IAA

    采用过滤除菌 ......