·栽培与育种·

    土茯苓离体快繁研究

    曾宋君 吴坤林 陈国华 段 俊

    (中国科学院华南植物园 ,广州 510520)

    摘要 以土茯苓 S milax glabra Roxb根状茎侧芽的生长锥为外植体 ,以 MS、 3 2MS、 B5 和改良 H等培养基为

    基本培养基 ,附加不同浓度的植物生长调节剂进行离体培养研究。结果表明:外植体在 MS + 62BA 110 mg L +

    NAA 011 mg L 培养基上芽的萌动速度较快;萌动芽在 MS + 62BA 110 mg L + NAA 011 mg L + 10 %CM(椰子汁)

    培养基上丛生芽诱导和增殖的效果最佳;3 2MS + 62BA 0105 mg L + 4 %蔗糖培养基的壮苗效果较好; H + NAA

    015 mg L 培养基的生根率可达 94 %以上;以沙和泥炭土各 1 2为基质移栽试管苗 ,成活率达到 95 %以上。

    关键词 土茯苓;快速繁殖

    土茯苓 S mi lax glabra Roxb 为攀援状灌木 ,主

    要分布于我国西南部、南部至东南部各省区 ,亚洲东

    南部各国也有分布。其根状茎入药具有清热除湿、解毒、健脾胃等多种功能 ,可以治疗钩端螺旋体、关

    节酸痛、尿路感染、白带、疮疡等多种疾病〔 1〕。

    传统药学中 ,中药土茯苓及其多种中药制剂 ,多

    以挖掘野生根状茎为原料 ,近年来由于销量增加 ,野

    生植株已远远不能满足市场的需要 ,需人工栽培。

    栽培土茯苓的种苗可用根状茎分株繁殖或种子繁

    殖 ,但由于种源不多 ,繁殖速度慢 ,数量相当有限。

    本研究用离体快速方法 ,可获得了大量种苗。

    1 材料与方法

    111 材料 采用种植于华南植物园药圃和野生的

    土茯苓 S mi lax glabra Roxb根状茎为外植体。

    112 培养基 以MS、 3 2MS、 B5、改良 H培养基为

    基本培养基。在不定芽分化、继代培养、根诱导等不

    同培养阶段 ,附加不同种类和浓度的 IBA、 NAA、 62BA。

    芽启动培养和丛生芽增殖培养基: ①3 2MS +

    62 BA 210 mg L + IBA 015 mg L ; ②3 2MS + 62BA

    110 mg L + NAA 012 mg L ; ③3 2MS + 62BA 015

    mg L + NAA 011 mg L ; ④MS + 62BA 510 mg L +

    NAA 0101 mg L ; ⑤MS + 62BA 210 mg L + NAA

    015 mg L ; ⑥MS + 62BA 110 mg L + NAA 012 mg

    L ; ⑦MS + 62BA 015 mg L + NAA 011 mg L ; ⑧MS

    + 62BA 110 mg L + NAA 012 mg L + 15 %椰子汁

    (CM) 。

    壮苗培养基: ①3 2MS + 62BA 0105mg L ; ②

    MS + 62BA 0105 mg L。

    生根培养基: ①MS + NAA 015 mg L ; ②MS +

    IBA 015 mg L ; ③改良 H + NAA 015 mg L ; ④改良

    H + NAA 0125 mg L ; ⑤改良 H + NAA 110 mg L ;

    ⑥改良 H + IBA 015 mg L ; ⑦ B5 + NAA 015 mg L ;

    ⑧ B5 + IBA 015 mg L。

    以上培养基中 ,蔗糖浓度在 3 2MS培养基上为

    4 % ,在MS、改良 H和B5 培养基上为3 % ,培养基均

    用 017 %琼脂固化 ,pH值 514～518 ,培养温度 26 ±

    2 ℃,光照强度 16002000 Lx ,光照时间 12 h d。

    113 方法

    11311 外植体诱导:根状茎 ,在自来水下冲洗干

    净。切取侧芽 ,用 70 %酒精溶液浸 30 s 后 ,再用

    011 %升汞消毒 8～12 min ,用无菌水冲洗 5～6 次。

    剥取侧芽的生长锥接种在诱导分化培养基上诱导芽

    的分化。

    11312 继代增殖:切取已分化的芽苗 ,转入继代增

    殖培养基中 ,形成丛生芽 ,将丛生芽再切割后接种到

    相同的培基上继代培养 ......