铜陵白姜脱毒及组织培养技术研究

    花 桂 玲

    (安徽省铜陵市农科所,安徽铜陵 244000)

    摘 要:利用热处理与茎尖培养相结合的方法 ,脱除生姜体内危害性病毒 ,并筛选出白姜组培的初代、继代及生根培

    养基 ,配制出试管苗炼苗移栽的基质。

    关键词:生姜;白姜;脱毒;组培快繁;生根培养;基质

    中图分类号 S 632. 5 文献标识码 A 文章编号 1007 - 7731 (2004) 04 - 59 - 01

    铜陵白姜是我市“八宝”之一,历史悠久,栽培面积广,产销量大,由于姜瘟病的发生给我市生产发展带来很大的

    影响,为此,我所对生姜的脱毒及组培快繁进行初步探索和

    研究,旨在为解决该品种退化,开发增产潜力和脱毒奠定基

    础。

    1 试验材料和方法

    1. 1 供试材料 铜陵白姜、基本培养基 MS。

    1. 2 试验方法

    1. 2. 1 脱毒处理:将选取的姜块用50 %多菌灵800 倍液浸

    泡20～30 min后,用塑料袋扎紧放入36～38 ℃培养箱中培

    养,待姜芽长1～2 cm ,切下姜芽,流水冲洗 15～20 min ,去

    掉表层已死的干皮。在超净工作台上用0. 1 %HgCL2 灭菌

    处理7 min ,用无菌水冲洗3～5 次,然后在双目解剖镜下无

    菌操作剥取0. 3～1 mm大小的生长点接种于预先配制好的

    初代培养基上,培养温度25 ℃,于 40W日光灯下每日照10

    h(以下试验培养温度、光照条件及pH5. 8 都是相同的) 。

    1. 2. 2 试管苗继代快繁的培养基激素的种类、浓度配比对

    增殖度的影响:采用基本培养基 MS ,附加不同激素种类及

    配比,设6 种激素组合进行快繁试验: ①ZT2. 0 ; ②ZT2. 0 +

    NAA0. 5 ; ③ZT2. 0 + IBA0. 5 ; ④ZT2. 0 + IBA1. 0 ; ⑤KT2. 0 ;

    ⑥KT2. 0 + NAA0. 5 ,所用外植体为微型姜,每处理 30 瓶,35 d后调查结果。

    1. 2. 3 试管苗转接继代方式的选择试验:应用分割丛生苗

    快繁法和试管微型姜快繁法两种组培快繁方法进行组培快

    繁试验。分割丛生苗法是指将试管苗分割成单株重新接种

    到新的快繁培养基上进行组培快繁方式。试管微型姜快繁

    法是指将试管苗丛生苗分割成单株后,再将其茎从基部0. 5

    ～1 cm处剪掉并去所有根,仅剩余微型姜转接于新的快繁

    培养基上进行组培快繁。本试验中每处理接种30 瓶,50 d

    后调查结果,培养基为 MS + ZT2. 0 + NAA0. 5。

    1. 2. 4 生根培养试验:设 7 个激素组合: ①NAA0. 5、②

    NAA1. 0、③NAA1. 5、④ZT1. 5 + NAA1. 0、⑤ZT1. 0 +

    NAA1. 5、⑥ZT1. 5 + NAA0. 5、⑦ZT1. 5 + NAA1. 5。所用外

    植体为微型姜,每处理30 瓶,40 d后调查结果。

    1. 2. 5 脱毒姜试管苗炼苗移栽技术研究:试管苗很容易长

    根,在其根培养基上培养30～40 d 后,当根长 2～3 cm 时,移入温室中炼苗移栽。试管苗炼苗分瓶内炼苗和苗盘炼

    苗。瓶内炼苗 10 d 后试管苗移入自配的4 种不同基质上,它们分别是a.硅石、珍珠岩、土、基质(1∶ 1∶ 1∶ 1) pH6. 5。b.

    硅石、珍珠岩、基质(1∶ 1∶ 1) pH6. 8。c. 硅石、珍珠岩、砂、基

    质(1∶ 1∶ 1∶ 1) pH6. 9。d. 硅石、珍珠岩、土、 (1∶ 1∶ 1) pH6. 0。

    每种基质上栽植40 株,棚内温度控制在24～28 ℃,相对湿

    度为70 % ,50 d后,调查试管苗的成活率。

    2 结果分析

    2.1 经过灭菌处理后的外植体接种于 MS + ZT2. 0 +

    NAA1. 0 的初代培养基上, (经过查阅资料和大量的试验,筛选出的初代培养基,ZT 为玉米素、 NAA 为生长素) ,半个

    月内有不同反应;部分白色嫩芽由于0. 1 %HgCL2消毒时间

    过长而变褐且丧失活力,部分嫩芽由于 0. 1 %HgCL2 消毒

    时间过短或操作技术不熟炼,招致杂菌感染 ......