作用 ,无论是对炎症早期的渗出、还是炎症后期的增生 ,都有

    明显的抑制。有文献证明 ,具有抗炎作用的药物都同时具有

    免疫功能抑制作用。本文实验结果同这种结论是一致的。

    由于机体的免疫系统是一个复杂的网络系统 ,各种免疫

    功能之间也存在着复杂的内在联系 ,给药的剂量、方式、致敏

    时间的不同等均会产生不同的结果[ 4 ]

    ,该药对机体免疫功能

    呈现的抑制作用 ,对进一步了解其临床疗效的作用机理 ,提

    供了有价值的实验依据。

    参考文献:

    [ 1 ] 林志彬,秦泽莲,夏鸿林,中国药理学报[J ] ,1985 ;6 (3) :201

    [ 2 ] 徐叔云,卞如濂,陈修主编.药理实验方法学(第二版) [M] .北

    京:人民卫生出版社,1991 :1226 ;

    [ 3 ] 陈奇主编.中药药理研究方法学(第一版) [M] .北京:人民卫

    生出版社,1993 ;

    [ 4 ] 马振亚编.中药免疫药理研究[M] . 西安:陕西科技出版社;

    1990 ,15 ;

    正交法优化薤白提取工艺研究

    谢 辉 , 陆兔林 , 毛春芹

    (南京中医药大学 ,江苏 南京 210029)

    收稿日期:2003210202

    作者简介:谢辉(1970～) ,女,江苏南京市人,讲师,研究方向:中药制剂。电话:02526798159。

    关键词:薤白;提取工艺;腺苷; TLCS

    中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:100121528 (2004) 092附 1202

    薤白有理气宽胸、通阳散结的功效。临床常用于胸痹、心痛彻背等。薤白中含硫化合物、含氮化合物、甾体皂苷等

    成分 ,都能强烈抑制血小板聚集[ 1 ]

    ,而腺苷是薤白含氮化合

    物中抑制血小板活性最强的化学成分[ 2 ]。本实验采用正交

    试验法 ,以腺苷含量为指标 ,优选薤白醇提工艺 ,为薤白的生

    产和应用提供试验依据。

    1 仪器与试药

    KQ2 500E型医用超声清洗器 (昆山超声仪器有限公

    司) ; TD5A低速台式离心机(长沙湘仪离心机有限公司) ;紫

    外分析仪(北京市六一仪器厂) ;CAMAG TLC Scanner 3及

    自动点样器;CAMAG REPROSTAR薄层色谱数码摄像系统

    (瑞士) 。

    所用试剂均为分析纯;腺苷对照品(AMRESCO 分装) ;

    硅胶 GF254 (青岛海洋化工厂) ;薤白药材购自南京市药材公

    司 ,经本校吴德康教授鉴定为百合科植物小根蒜的干燥鳞

    茎。

    2 方法与结果

    2. 1 正交试验样品的制备

    结合成分性质及生产实际选择乙醇浓度、浸泡时间、乙

    醇用量、提取次数、提取时间为因素 ,选用 L18 (37)因素水平

    表安排正交试验 ,各因素水平见表 1。称取 18 份薤白样品 ,以表 2 的 18 种工艺条件组合进行乙醇回流提取 ,提取液滤

    过后浓缩成稠膏备用。

    2. 2 正交样品中腺苷含量测定

    2. 2. 1 供试品溶液的制备:精密称取稠膏适量于蒸发皿中 ,加入适量硅藻土拌匀 ,水浴蒸干 ,转至离心管中 ,以 75 %乙

    醇超声提取3次 (乙醇用量为2 5mL ,超声2 0min) ,离心

    表 1 因素水平表

    因素

    乙醇浓度

    ( %)

    A

    浸泡时间

    (h)

    B

    乙醇总用量

    (倍)

    C

    提取次数

    D

    提取时间

    (h)

    E

    1 60 0 8 1 0. 5

    2 70 0. 5 12 2 1

    3 80 1 15 3 1. 5

    (3000r· min - 1

    ,20min)后 ,上清液转至小烧杯中 ,水浴蒸干 ,残渣加水 3～4mL 溶解;通过 D101型大孔树脂柱 (内径

    1. 5cm ,长 10cm)用 40mL 水洗脱 ,洗脱液弃去 ,再用 40 %乙

    醇 40mL 洗脱 ,收集洗脱液 ,水浴上蒸干 ,用 75 %乙醇溶解并

    定容至 2mL 备用。

    2. 2. 2 薄层展开条件:硅胶 GF254板 ,以乙酸乙酯2丙酮2浓

    氨水(4∶ 4∶ 1)为展开剂 ,上行二次展开 ,展距均为 8cm。

    图 1 吸收曲线

    1 附

    2004年 9 月

    第 26 卷 第 9 期

    中 成 药

    Chinese Traditional Patent Medicine

    September 2004

    Vol . 26 No. 9

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.2. 2. 3 测定波长选择:吸取一定量的对照品溶液 ,点于薄层

    板上 ,依法展开 ,挥干溶剂 ,在 200～400nm 对腺苷对照品斑

    点进行全波长扫描 ,结果见图 1 ,确定检测波长为 261nm。

    2. 2. 4 工作曲线的制备:精密称取腺苷对照品 5. 13mg ,加

    75 %乙醇溶解定容至 10mL ,使浓度为 0. 513mg· mL - 1。吸

    取对照品溶液 1 ,2 ,3 ,4 ,5 μL ,分别点于同一薄层板上 ,依法

    展开 ,在 261nm 波长处测定斑点峰面积积分值 ,将点样量

    (x)和斑点峰面积积分值(y)进行线性回归 ,得回归方程: y =

    2805. 82 x + 1994. 49 , r = 0. 9950。腺苷点样量在 5. 13～

    2. 052 μg范围内与斑点峰面积积分值之间呈良好的线性关

    系。

    2. 2. 5 稳定性试验:分别精密吸取对照品溶液 2 μL 和供试

    品溶液3 μL 点于同一薄层板上 ,间隔20min测定斑点峰面积

    积分值 ,结果表明在 3h 内斑点峰面积积分值稳定 , RSD 分

    别为 0. 887 %( n = 9)和 1. 70 %( n = 9) ......