辛伐他汀的鉴定与分析

    杨俊佼1

    怀其勇1

    陈企发2

    左育民3 1

    (南开大学化学系1

    ,中心实验室2

    ,天津 300071)

    摘 要 对辛伐他汀的13

    C NMR及质谱解析进行了报道 ,并与其结构类似化合物的相应数据进行了比

    较。采用两种联动扫描方式确定了某些特征离子的子离子 ,并据此提出辛伐他汀的碎裂途径。在以

    ODZ柱和甲醇P 水为淋洗液的条件下 ,HPLC可以完全分离辛伐他汀和洛伐他汀杂质 ,从而可以用此法对

    辛伐他汀进行质量 C分析。

    关键词 辛伐他汀 ,核磁共振 ,质谱 ,联动扫描 ,色谱分析

    2000212206收稿;2001207202接受

    1 引 言

    辛伐他汀是抗心血管病的新型药物。在60年代 ,人们发现胆固醇过高与心脏病有关;70 年代化学

    家从一种真菌代谢物中分离并纯化了一个对胆固醇的生物合成起阻断作用的化合物〔 1〕,并定名为

    compactin(1) ;80年代又发现了(1)的甲基类似物〔 2〕,命名为lovastatin(2) ,又称作 mevinolin ,并用于临床治

    疗;后来化学家合成了一系列(1)和(2)的类似物 ,并发现(2) 的甲基衍生物具有更高药效〔 3〕,定名为

    simvastatin (辛伐他汀) (3) ,或称为 synvinolin ,化学名称为2″ ,2″ 2二甲基丁酸21 ,2 ,3 ,7 ,8 ,8a2六氢化23 ,72二

    甲基282[2′ 2(四氢化24′ 2羟基26′ 2氧代22′ 2吡喃基)2乙基]212萘基酯。

    文献对(1)和(2)的结构证明已有很多 ,而对更高药效的辛伐他汀的谱学数据仅有简单报道〔 3〕,而且 13

    C NMR谱没有分辨全部碳信号 ,质谱未见报道。本文对辛伐他汀进行了13

    C NMR和MS分析 ,并结合结

    构证明予以相应讨论。用 HPLC法成功地分析了辛伐他汀中主要杂质洛伐他汀的含量。

    2 实验部分

    辛伐他汀由洛伐他汀半合成而来 ,其方法见文献〔 3〕。本文所用样品为青岛海洋大学陆昱京教授提

    供 ,然后再经甲醇重结晶。

    Unity 2400核磁共振波谱仪(Varian 公司) ;5988A 四极质谱仪(惠普公司)和 ZAB2HS质谱仪(VG公

    司) ;SY 25060液相色谱仪(Varian公司)和 C2R1B 数据处理机(日本岛津公司) 。色谱柱为碳十八键合二

    氧化锆(ODZ) ,流动相为甲醇P 水(70P 30 ,VP V) ,流速为0. 3 mLP min ;检测波长为λ= 254 nm ,温度为60 ℃。

    3 结果与讨论

    3. 1 13

    C NMR谱

    辛代他汀及其类似物的化学结构式如图1所示。辛伐他汀含 25 种碳 ,其宽带去偶13

    C NMR谱应显

    示25个单峰 ,但文献〔 3〕报道仅给出23个单峰 ,其实验射频频率为 66. 9 MHz ,我们的实验射频频率提高

    至100. 6 MHz ,得出24种碳峰的位移值 ,见图2。其中δ值32. 81和32. 85的信号已可分辨 ,但丁酸部分

    的两个偕甲基信号仍重叠。

    为帮助碳峰的指定 ,还测得样品的 DEPT 谱 (无畸变极化转移增益 distortionless enhancement by

    polarization transfer) (见图3) 。图中自上而下分别代表伯碳(CH3 ) 、仲碳(CH2 ) 、叔碳(CH)和全谱 ,季碳不

    显示。根据DEPT谱结合文献中Lovastatin

    〔 4〕的数据对 24 种碳进行了指定 ,见表 1。比较两个化合物相

    应数据 ,由此可见 ,相同结构单元上的碳信号位移值相差不到 1 ,只是取代丁酸部分的碳信号位移值〔 5〕,一般相差亦小于1 ,最大的一个相差1. 1 ,见表2。由此可以证明洛伐他汀变为辛伐他汀后丁酸结构部分

    第29卷

    2001年11月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究报告

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第11期

    1254～1258

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 图1 辛伐他汀及其类似物的化学结构

    Fig. 1 Structure of simvastatin and related

    compounds

    (1)康帕克汀(compactin) , R1 = H ,R2 = H; (2)洛伐

    他汀( lovastatin) , R1 = CH3 , R2 = H; (3) 辛伐他汀

    (simvastatin) ,R1 = CH3 ,R2 = CH3。

    图2 辛伐他汀的13

    C NMR 谱(CDCl3 溶剂 ,室温)

    Fig. 2 13

    C nuclear magnetic resonance (NMR) spectrum of simvastatin

    (CDCl3 solvent , ambient temperature)

    图3 辛伐他汀的DEPT谱

    Fig. 3 Distortionless enhancement by polarization transfer (DEPT) spectra

    of simvastatin

    a , b , c 和d分别代表伯碳(CH3) 、仲碳(CH2) 、叔碳(CH)和全谱( subspectrum

    a , b , c and d are primary carbon (CH3) , secondary carbon (CH2) , tertiary carbon

    (CH) and the conventional

    13

    C spectrum respectively) 。

    的13

    C NMR谱位移值的改变是合理的。如

    丁酸部分的 22位碳 ,由一甲基变为二甲基

    后 ,相应位移值增加 1. 3～116 ,说明甲基

    的去屏蔽效应 ,而端甲基则向高场位移

    210～215 ,可用γ 2效应解释。32169 ,32. 81

    及32. 85 3 个 CH2 信号的指定 ,主要根据

    与洛伐他汀、取代丁酸酯相应位置13

    C位移

    值的比较及它们的相对强度。实验结果显

    示:以上3个峰依次强度增加 ,而从C3″、 C10

    及C2 在分子中的位置推断 ,它们的 T1 值

    应依次减少 ,强度则依次增加。辛伐他汀

    丁酸部分中的两个偕位甲基有相同的化学

    位移值 ,并不说明它们化学等价 ,若用分辨

    率更高的核磁波谱仪测定应能得到两个

    峰。

    表1 辛伐他汀和洛伐他汀13

    C NMR谱信号的指定

    Table 1 Assignment of

    13 ......