固相萃取和高效液相色谱法

    测定烟草中的苯酚和儿茶酚

    李 忠 王 岚 杨光宇3

    刘 巍 施红林 蒋次清

    (云南烟草科学研究院烟草化学室 , 昆明 650106)

    摘 要 采用固相萃取高效液相色谱法测定烟草样品中的苯酚和儿茶酚。烟草样品中的苯酚和儿茶酚经水

    汽蒸馏分离后用Sep2Park2C18固相萃取小柱富集 ,以C18为固定相 ,0. 05 molP L 磷酸二氢钾缓冲溶液2甲醇为流动

    相 ,苯酚和儿茶酚的检测波长分别为 270. 3 和 275. 0 nm。苯酚和儿茶酚标准加入回收率分别为 91. 8 %～

    10415 %和89. 6 %～103. 8 %。方法用于几种烟草样品测定 ,结果令人满意。

    关键词 高效液相色谱法 ,苯酚 ,儿茶酚 ,烟草

    2001201206收稿;2001205203接受

    1 引 言

    挥发酚是烟草中一类重要的成分 ,它在烟草燃烧时直接进入烟气 ,大多有不好的气味 ,而且很难被

    掩盖;特别是苯酚和儿茶酚对呼吸系统有腐蚀作用和助癌作用 ,近年来逐渐引起了烟草化学工作者的注

    意〔 1〕。文献〔 2〕报道了用42氨基安替比林光度法测定烟草中的总挥发性酚 ,但是 ,烟草中苯酚和儿茶酚的

    测定还未见报道过。我们研究了用水汽蒸馏分离 ,Sep2Park2C18固相萃取小柱富集 ,高效液相色谱测定烟

    草中苯酚和儿茶酚的方法 ,取得满意结果。

    2 实验部分

    2. 1 主要仪器和试剂

    美国Waters公司高效液相色谱2质谱联用仪 ,包括 2690 Allaince 分离系统(四元泵及自动进样器) ,996 (PDA)紫外二极管矩阵检测器 , Integrity

    TM

    质谱检测器 ,Millennium32

    色谱管理软件;Buchi2324 自动水汽

    蒸馏仪(瑞士Buchi 公司) 。

    甲醇:高效液相色谱专用(Fluka 公司) ;水为石英亚沸蒸馏水并用 Milli2Q50 (美国 Millipore 公司)超

    纯水仪处理 ,电阻 ≥ 18M Ω. cm;磷酸二氢钾:高效液相色谱专用(Fluka 公司) ;苯酚标准(Fluka 公司 ,含量

    > 99 %) ;儿茶酚标准(Fluka 公司 ,含量 > 99 %) 。

    2. 2 色谱条件

    色谱柱:Waters Nova2Pak2C18液相色谱柱(3. 9 × 150 mm) ; Waters Sep2Park2C18固相萃取小柱;流动相为

    A甲醇 ,B 0. 05 molP L 磷酸二氢钾缓冲溶液 ,以体积比按开始(20 %A + 80 %B) , 10 min (80 %A + 20 %B) ,15 min (80 %A + 20 %B) , 20 min(20 %A + 80 %B)线性递增(减)的梯度条件 ,平衡15 min后自动进下一个

    样 ,流速为0. 5 mLP min ;苯酚的检测波长为270. 3 nm ,儿茶酚的检测波长为275. 0 nm;进样体积10μ L。

    在上述色谱条件下 ,苯酚、儿茶酚的保留时间分别为11. 0 min和8. 2 min ,标样及烟草样品色谱图见

    图1。

    2. 3 样品处理

    准确称取20. 00 g烟样 ,加入2. 5 molP L 的硫酸150 mL ,加热回流1 h ,转入蒸馏烧瓶中 ,用自动水汽

    蒸馏仪以50 %蒸汽流量蒸馏15 min ,该时间内可收集约230 mL 馏分 ,加入1. 7 g磷酸二氢钾 ,调pH为弱

    酸性 ,定容到250 mL ,取50 mL 用 Sep2Pak2C18固相萃取小柱富集 ,小柱离心脱水后 ,用 2 mL 60 %甲醇洗

    脱 ,洗脱液进样10μ L 进行分析。

    第29卷

    2001年12月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第12期

    1409～1411图1 苯酚、儿茶酚标样(a)和烟草样品(b)色谱图

    Fig. 1 Chromatogram of phenol and catechol standard (a) and tobacco sample (b)

    1.儿茶酚(catechol) ; 2. 苯酚(phenol) 。

    3 结果与讨论

    3. 1 洗脱条件的选择

    用甲醇2水作流动相 ,苯酚和儿茶酚不能获得很好的分离 ,而且峰拖尾严重 ......