同步荧光法检测鱼胆汁中的12羟基芘

    张 勇3 1

    王淑红1

    朱亚先2

    Michael H WLam3

    Rudolf S S Wu

    3

    洪华生1

    1

    (厦门大学海洋环境科学教育部重点实验室 ,环境科学研究中心 ,厦门 361005)

    2

    (厦门大学化学系 ,厦门 361005)

    3

    (香港城市大学生物和化学系 ,海岸带污染与保育研究中心 ,香港)

    摘 要 建立了用同步荧光法测定鱼胆汁中的12羟基芘(12HP)的方法。该方法通过直接测定鱼胆汁的多环

    芳烃(PAHs)的代谢产物之一12HP ,用于判断 PAHs生物有效部分对海岸带养殖水环境的污染程度。以真鲷

    ( Pargrosomus major , 简称 Pm) , 鱼( Nibea miichthys ,简称Nm)为实验对象 ,现场实验结果令人满意。

    关键词 同步荧光法 ,鱼胆汁 ,多环芳烃 ,代谢产物 ,12羟基芘

    2001205208收稿;2001209210接受

    本文系国家自然科学基金(29977016) 、福建省自然科学基金(D9910008)资助项目

    1 引 言

    PAHs类化合物因其致癌、致畸、致突变作用 ,以及其生物有效性部分可通过食物链的富集、传递 ,最

    终影响到人类的健康 ,使得 PAHs成为人们普遍关注的优先监测污染物1。

    现有监测水环境中 PAHs污染水平的方法是测定水体和沉积物中其母体的总量或几种典型 PAHs

    的含量。测定方法烦琐、费时。12HP作为一种普遍存在的 PAHs的代谢产物 ,已被广泛用作人和动物暴

    露于 PAHs环境下的生物检测指示物2。就其检测方法而言 ,荧光法以其高灵敏和较好的选择性、简单

    快速的操作 ,成为常被选用的分析测试手段3 ,4。本文用同步荧光法测定了鱼胆汁中的 12HP ,并尝试将

    其结果用于判断 PAHs对水环境造成的污染程度的差别 ,以及将该结果用作 PAHs生物有效部分所产生

    的生态毒理效应的指示指标的可行性。

    2 实验部分

    211 试剂与仪器

    乙醇(A1R1北京试剂厂) ,12HP(Aldrich Chem. Co. ) ,实验用水为Milli2Q水。用乙醇2水( V V = 1∶ 1)

    溶液配成12HP标准溶液。850型荧光分光光度计(日本日立公司)的激发和发射狭缝均为5 nm。

    212 实验方法

    扫描12HP标准溶液的同步荧光光谱 ,根据其同步荧光峰值与其相应的浓度的关系 ,绘制工作曲线。

    从对照站位统一购买一批体重的300～500 g的 Pm ,Nm两种鱼若干条 ,分别放置在3个不同的实验

    (养殖网箱)站位中 ,经相同的时间间隔后 ,同时在3个站位采集两种各6条鱼的胆汁样品。用所述方法

    测定样品中12HP含量。

    3 结果与讨论

    暴露于 PAHs中的鱼的胆汁里含有多种羟基化的 PAHs衍生物。要测定所有这些代谢物 ,因目前尚

    缺乏足够的标准而无法实现4 ,5。再者 ,对于不同的研究目的 ,上述方法未必必要。为满足一些现场或

    实验室内的研究需求 ,运用荧光法、同步荧光法测定鱼的胆汁中的12HP的方法已有报道4 ,5。根据上述

    结果 ,我们建立了同步荧光法测定12HP的分析方法 ,并将其用于不同养殖水体中 PAHs 生物有效性部

    分的评判。

    311 12HP溶液和鱼胆汁的同步荧光光谱

    图1、图2所示分别为12HP标准溶液和鱼胆汁中 12HP的同步荧光光谱(Δλ= 37 nm) 。由图可知 ,第30卷

    2002年4月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第4期

    467～46912HP的同步荧光光谱的最大波长位于λex = 395 nm ,与鱼胆汁中12HP的同步荧光光谱的最大波长位置基

    本相同。

    图1 12HP的同步荧光光谱

    Fig. 1 Synchronous fluorescence spectra of 1 2hydroxy pyrene

    (12HP) in alcohol2water (V V = 1∶ 1) solution

    1 2HP : a. 60 μgP L ;b. 20μgP L ;c. 5μgP L ......