衍生化_毛细管气相色谱法同时测定饲料添加剂中富马酸、乳酸和柠檬酸.PDF
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任清
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参见附件(77KB，3页)。
衍生化_毛细管气相色谱法同时测定饲料添加剂中富马酸、乳酸和柠檬酸.PDF
衍生化2毛细管气相色谱法同时测定
饲料添加剂中富马酸、乳酸和柠檬酸
任 清
(中国科学院福建物质结构研究所 ,福州 350002)
摘 要 建立了动物饲料添加剂中富马酸、乳酸、柠檬酸同时测定的毛细管气相色谱分析方法。样品添加内
标酒石酸后 ,用N ,O2双(三甲基硅烷)乙酰胺(BSA)硅烷化 ,经 SE 230毛细管柱色谱分离 ,氢火焰离子化检测器
检测。富马酸、乳酸和柠檬酸的回收率分别为97. 4 %、 97. 2 %、 96. 8 %。
关键词 毛细管气相色谱 ,饲料添加剂 ,衍生化 ,富马酸 ,乳酸 ,柠檬酸
2001204206收稿;2001209225接受
1 引 言
饲料中有机酸主要作为饲料的酸味剂被广泛使用。它不仅可提高饲料的适口性 ,促进采食 ,而且具
有防腐保健作用 ,并可预防饲料被霉菌污染;它还具有微生物作用 ,可减少动物胃肠道中有害微生物的
繁殖 ,同时可降低饲料 PH值 ,激活消化酶 ,有助于消化吸收某些营养物质 ,提高饲料转化率 ,以及为动
物提供能量等功能1。由于这些酸被完全代谢 ,并安全无毒而被许多国家批准用于动物饲料的日粮成
分 ,人们对之使用兴趣正日益增加2。到目前为止 ,饲料添加剂中有机酸分析大都应用分光光度法分别
测定 ,步骤繁琐 ,花费时间长 ,组分间干扰严重 ,误差大 ,很难满足测定要求。有机酸的气相色谱测定已
有报道3 ～5
,但对饲料添加剂中的富马酸、乳酸、柠檬酸的气相色谱同时测定方法未见报道。本文在大
量实验基础上 ,建立了饲料添加剂中以上3种有机酸的毛细管气相色谱同时测定方法。该法以酒石酸
作为内标物 ,在吡啶溶剂中用BSA为硅烷化试剂衍生样品 ,方法简便、快速、准确 ,测定结果令人满意。
2 实验部分
2. 1 仪器和试剂
GC29AM气相色谱仪(日本岛津公司) ,配有 C2R3A色谱数据处理机 ,氢火焰离子化检测器。CSF21B
超声波发生器(上海超声波仪器厂) 。
内标酒石酸 ,柠檬酸为分析纯 ,富马酸、乳酸为化学纯 ,乳酸按总酸测定方法3
求出标准液的乳酸浓
度为82. 5 % ,N ,O2双(三甲基硅烷基)乙酰胺(BSA)为色谱用扫尾剂(上海试剂一厂 ,97 %以上) ,吡啶为
分析纯 ,并加入高温活化的分子筛去除水分。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 色谱条件 在 GC29AM上采用石英毛细管色谱柱 SE 230 (30 m×0. 25 mm) ,柱温 180 ℃。汽化室
及检测器(FID)温度均为250 ℃。载气高纯氮 ,流速100 mL min ,分流比60∶ 2。
2. 2. 2 标准溶液及样品配制 a.分别称取乳酸0. 08727 g ,富马酸 0. 03363 g ,柠檬酸 0. 04376 g ,用去离
子水溶解并定容至25 mL ,得有机酸混合标准溶液。b. 称取样品约0. 25 g ,用20 mL 去离子水在超声波
发生器中超声溶解 ,最后通过定量滤纸过滤残渣 ,收集滤液并定容至 25 mL。c. 称取内标酒石酸
0106040 g ,用去离子水溶解并定容至25 mL ,得内标溶液。
2. 2. 3 有机酸的衍生物 分别吸 “2. 2. 2”a、 b液0. 3 mL 于2 mL 样品瓶中 ,各自添加 c 液 0. 1 mL ,将样
品瓶放置红外灯下(温度低于70 ℃) ,蒸发水分。待恰好干燥时取出 ,加入0. 1 mL 二氯甲烷 ,再置于红外
灯下使残存的水分和二氯甲烷成共沸物吹出。吹干冷却后加入 0. 1 mL 无水吡啶和 0. 1 mL BSA 溶液 ,密闭 ,室温放置5 min后 ,即可进行气相色谱分析。
第30卷
2002年3月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报
Chinese Journal of Analytical Chemistry
第3期
304～306 图1 标准品混合物(a)和样品气相色谱图(b)
Fig. 1 Gas chromatogram of standard mixtures ( a ) and
sample (b)
1.富马酸(fumaric acid) ;2. 乳酸(lactic acid) ;3.酒石酸(tartaric
acid) ;4. 柠檬酸(citric acid) 。
3 结果与讨论
3. 1 色谱分离情况
在上述色谱条件下 ,经 SE 230毛细管柱可清晰地
分离出酒石酸及富马酸、乳酸、柠檬酸 ,标准溶液及
特征样品的气相色谱分离情况见图 1 ......
饲料添加剂中富马酸、乳酸和柠檬酸
任 清
(中国科学院福建物质结构研究所 ,福州 350002)
摘 要 建立了动物饲料添加剂中富马酸、乳酸、柠檬酸同时测定的毛细管气相色谱分析方法。样品添加内
标酒石酸后 ,用N ,O2双(三甲基硅烷)乙酰胺(BSA)硅烷化 ,经 SE 230毛细管柱色谱分离 ,氢火焰离子化检测器
检测。富马酸、乳酸和柠檬酸的回收率分别为97. 4 %、 97. 2 %、 96. 8 %。
关键词 毛细管气相色谱 ,饲料添加剂 ,衍生化 ,富马酸 ,乳酸 ,柠檬酸
2001204206收稿;2001209225接受
1 引 言
饲料中有机酸主要作为饲料的酸味剂被广泛使用。它不仅可提高饲料的适口性 ,促进采食 ,而且具
有防腐保健作用 ,并可预防饲料被霉菌污染;它还具有微生物作用 ,可减少动物胃肠道中有害微生物的
繁殖 ,同时可降低饲料 PH值 ,激活消化酶 ,有助于消化吸收某些营养物质 ,提高饲料转化率 ,以及为动
物提供能量等功能1。由于这些酸被完全代谢 ,并安全无毒而被许多国家批准用于动物饲料的日粮成
分 ,人们对之使用兴趣正日益增加2。到目前为止 ,饲料添加剂中有机酸分析大都应用分光光度法分别
测定 ,步骤繁琐 ,花费时间长 ,组分间干扰严重 ,误差大 ,很难满足测定要求。有机酸的气相色谱测定已
有报道3 ～5
,但对饲料添加剂中的富马酸、乳酸、柠檬酸的气相色谱同时测定方法未见报道。本文在大
量实验基础上 ,建立了饲料添加剂中以上3种有机酸的毛细管气相色谱同时测定方法。该法以酒石酸
作为内标物 ,在吡啶溶剂中用BSA为硅烷化试剂衍生样品 ,方法简便、快速、准确 ,测定结果令人满意。
2 实验部分
2. 1 仪器和试剂
GC29AM气相色谱仪(日本岛津公司) ,配有 C2R3A色谱数据处理机 ,氢火焰离子化检测器。CSF21B
超声波发生器(上海超声波仪器厂) 。
内标酒石酸 ,柠檬酸为分析纯 ,富马酸、乳酸为化学纯 ,乳酸按总酸测定方法3
求出标准液的乳酸浓
度为82. 5 % ,N ,O2双(三甲基硅烷基)乙酰胺(BSA)为色谱用扫尾剂(上海试剂一厂 ,97 %以上) ,吡啶为
分析纯 ,并加入高温活化的分子筛去除水分。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 色谱条件 在 GC29AM上采用石英毛细管色谱柱 SE 230 (30 m×0. 25 mm) ,柱温 180 ℃。汽化室
及检测器(FID)温度均为250 ℃。载气高纯氮 ,流速100 mL min ,分流比60∶ 2。
2. 2. 2 标准溶液及样品配制 a.分别称取乳酸0. 08727 g ,富马酸 0. 03363 g ,柠檬酸 0. 04376 g ,用去离
子水溶解并定容至25 mL ,得有机酸混合标准溶液。b. 称取样品约0. 25 g ,用20 mL 去离子水在超声波
发生器中超声溶解 ,最后通过定量滤纸过滤残渣 ,收集滤液并定容至 25 mL。c. 称取内标酒石酸
0106040 g ,用去离子水溶解并定容至25 mL ,得内标溶液。
2. 2. 3 有机酸的衍生物 分别吸 “2. 2. 2”a、 b液0. 3 mL 于2 mL 样品瓶中 ,各自添加 c 液 0. 1 mL ,将样
品瓶放置红外灯下(温度低于70 ℃) ,蒸发水分。待恰好干燥时取出 ,加入0. 1 mL 二氯甲烷 ,再置于红外
灯下使残存的水分和二氯甲烷成共沸物吹出。吹干冷却后加入 0. 1 mL 无水吡啶和 0. 1 mL BSA 溶液 ,密闭 ,室温放置5 min后 ,即可进行气相色谱分析。
第30卷
2002年3月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报
Chinese Journal of Analytical Chemistry
第3期
304～306 图1 标准品混合物(a)和样品气相色谱图(b)
Fig. 1 Gas chromatogram of standard mixtures ( a ) and
sample (b)
1.富马酸(fumaric acid) ;2. 乳酸(lactic acid) ;3.酒石酸(tartaric
acid) ;4. 柠檬酸(citric acid) 。
3 结果与讨论
3. 1 色谱分离情况
在上述色谱条件下 ,经 SE 230毛细管柱可清晰地
分离出酒石酸及富马酸、乳酸、柠檬酸 ,标准溶液及
特征样品的气相色谱分离情况见图 1 ......
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