湖北地区肠球菌体外耐药监测与基因分型研究

    彭少华1

    , 陈 亮2

    , 施菁玲1

    , 李丛荣1

    , 吴晓翠1

    , 李 栋1

    , 李 艳1

    (1. 武汉大学人民医院, 湖北 武汉 430060; 2. 武汉大学医学院, 湖北 武汉 430060)

    摘要: 目的 监测湖北地区肠球菌耐药性并对耐药株进行基因分型及流行病学研究。方法 对 9 所大型综合医

    院感染标本中分离的 335 株肠球菌进行鉴定和药敏试验, 以“ WHON ET4”软件分析; 并以随机扩增多态性DNA

    分型法(RA PD)进行基因分型。结果 对耐氨苄西林肠球菌(ARE)分离率 17. 0% , 对耐氨基糖苷类肠球菌

    (HLAR)分离率 38. 2% ,对耐万古霉素肠球菌(VRE)分离率为 0% , HLAR 合并ARE 的分离率为 5. 4% , 万古霉

    素中介肠球菌(V IE)分离率 2. 1%; 21株ARE 分为 16 型, 43 株HLAR 分为 26 型, 7 株HLAR 合并ARE 分为 5

    型。结论 湖北地区肠球菌耐药性呈上升趋势, 其感染在本地区呈散在流行态势; 临床微生物室应严密关注多重

    耐药肠球菌的产生及播散流行。

    关键词: 肠球菌; 耐药性; 基因分型; 流行病学

    中图分类号: R378. 1 文献标识码: A 文章编号: 100524529 (2002) 0920643204

    Res istance and Genotyp ing of En terococcus in Hube i : A Curren t Research

    PEN G Shao2 hua, CHEN L iang, SH I J in2ling, L I Cun2rong, WU Xiao2 cu i, L IDong, L I Yan

    (D ep a tm en t of L abora tory S cience, P eop le′ s H osp ita l of W uhan U n iversity , W uhan, 430060, Ch ina)

    Abstract : OBJECTIVE To analyse the cur rent resistance and character ist ics of enterococci . METHODS Iso lates

    of enterococci (335) co llected f rom infect ious samp les in nine ho sp italsw ere ident if ied and the suscep t ibility test

    w as perfo rmed . WHON ET 4 sof tw are w as used fo r analyzing the data . Geno typ ing w as car r ied w ith random

    amp lif ied po lymo rph icDNA ( RA PD ) . RESULTS The rates of ARE , HLAR , VRE and ARE HLAR w ere

    17. 0% , 38. 2% , 0% and 5. 4% , respect ively . The rate of V IE w as 2. 1%. By RA PD 21 iso lates of ARE w ere

    divided into 16 types, 43 iso lates of HLAR w ere divided into 26 types, 7 iso lates of ARE HLAR w ere divided

    into 5 types . CONCLUSIONS Enterococci in Hubei subm it ted scat ter ing p revalence . RA PD w as an econom ic,quick and credible method fo r ep idem ic analyzing and pathogen mo lecular geno typ ing .

    Key words : E nterococcus; D rug resistance; Geno typ ing; Ep idem io logy

    肠球菌是临床常见的一类细菌, 为人体肠道正

    常菌群, 在自然界广泛存在, 可从污水、食物、粪便中

    分离。近年来, 由于国际贸易和旅游业的发展、抗生

    素盲目使用, 导致耐药株扩散和蔓延, 致使抗生素耐

    药的肠球菌, 如ARE、 HLAR , 甚至VRE 的分离率

    日渐增高。已引起国内外临床医生和临床微生物学

    家的高度重视。为了解肠球菌的耐药现状及流行病

    学资料, 监测其流行趋势, 为临床提供诊疗依据, 我

    们对 9 所大型综合医院 1999 年 9 月～ 2001 年 8 月

    分离的 335 株肠球菌进行了体外耐药试验与基因分

    型研究, 现报道如下。

    1 材料与方法

    1 . 1 材料

    1 . 1 . 1 菌株来源 335 株肠球菌由武汉大学人民

    收稿日期: 2002201209 ; 修订日期: 2002204225

    基金项目: 湖北省卫生厅重点资助课题(课题号:WJ 01564)

    医院、武汉大学中南医院、华中科技大学附属同济医

    院、华中科技大学附属协和医院、湖北中医学院附属

    医院、武钢二医院、黄石市中心医院、襄樊市中心医

    院、襄樊市第一人民医院于1999 年9 月～ 2001 年8

    月住院及门诊患者各类临床标本中分离。在10 d 内

    同一患者同一标本分离得到的菌株不重复计入。质

    控菌株金黄色葡萄球菌A TCC25923 和粪肠球菌

    A TCC29212 购自卫生部临床检验中心。

    1 . 1 . 2 抗生素纸片及水解酪蛋白(MH )琼脂 青

    霉素(PEN )、氨苄西林(AM P)、氯霉素(CHL )、四环

    素(TET )、呋喃妥因(FU R )、环丙沙星(C IP)纸片及

    MH 琼脂粉均为北京天坛药物生物技术公司产品,万古霉素(VAN )、替考拉宁(TE I)、高浓度庆大霉

    素(GEN )纸片(120 Lg? 片)均为英国O xo id 公司产

    品。MH 平板由本室配制。

    1 . 1 . 3 E2test 试纸条 瑞典AB2 B iodisk 公司产

    品。

    1 . 1 . 4 主要仪器 鉴定及药敏试验: 法国生物2梅

    · 346 · 中华医院感染学杂志 2002 年第 12 卷第 9 期里埃公司生产的V ITEK32 全自动微生物鉴定与药

    敏系统。 RA PD 分型: 美国B io2 Rad 公司生产的基因

    扩增仪、低温高速离心机。

    1 . 1 . 5 随机引物 上海博亚生物技术有限公司。

    1 . 2 方法

    1 . 2 . 1 菌株鉴定及药敏试验 我院分离的所有菌

    株均用V ITEK32 全自动微生物鉴定及药敏系统进

    行鉴定和药敏分析; 外院分离的菌株在我院均按常

    规方法重新进行鉴定, 不符合者以我院鉴定结果为

    准, 体外药敏试验以纸片扩散法(K2 B 法)进行, 测万

    古霉素时孵育 24 h, 对高浓度庆大霉素、万古霉素、替考拉宁中介者以E2test 证实。其操作及结果判读

    严格按照美国临床实验室标准化委员会(NCCL S)

    颁布的规则(1999 年版)进行。

    1 . 2 . 2 药敏试验质控 每周以金黄色葡萄球菌

    A TCC25923 及粪肠球菌A TCC29212 对所有的抗

    生素纸片进行药敏质控 ......