【关键词】 成人；脂肪；干细胞；分离；培养

    1实验资料

    试剂均购自Sigma公司，荧光标记单抗购自BD公司，DMEM购自Gibco公司. 成年女性48岁行吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL. 在1 h内将其移至离心管内，加入等量PBS缓冲液，充分振荡后低速离心800 r/min×10 min. 反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶. 37℃水浴中充分振荡30 min，再加入等量胎牛血清(FBS)中止. 低速离心10 min后弃去上清. 将下层细胞用PBS悬浮后加入16 mmol/L NH4Cl 37℃水浴中10 min以裂解红细胞. 低速离心10 min后再用PBS冲洗3次. 最后将瞎胞用含100 mL/L FBS+10 g/L青霉素的DMEM悬浮后移入培养瓶中 ......