关键词: 抗原肽;黑色素瘤抗原基因;肝癌

     0 引言

    寻找和鉴定肿瘤抗原肽是肿瘤免疫研究中的重要任务.人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)可通过特异性识别与人类HLA分子结合的肿瘤抗原决定簇而介导肿瘤抑制，用这些肽支撑的疫苗可以预防或治疗肿瘤[1] .寻找和鉴定肝癌细胞表面表达的抗原肽对肝癌治疗有重要意义.目前这方面报道很少.本实验用细胞膜温和酸洗、液质联用技术分析了人肝癌细胞系HHCC细胞膜表面表达的抗原肽.并用RT-PCR的方法在mRNA水平上分析了该抗原肽编码基因的表达.

    1 材料和方法

    1.1 材料 人肝癌细胞株HHCC购于上海动物细胞所.反相C18柱为Nobel公司产品.TRIZOL，逆转录试剂盒等购自Gibeco公司.小量质粒提取试剂盒等购自上海华舜生物公司.

    1.2 方法

    1.2.1 温和酸洗法获得HHCC细胞膜抗原肽 大量培养HHCC至1×109 /瓶细胞.以pH3.3柠檬酸钠室温条件下酸洗 ......