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血型(blood group)
第四章血型检验
? 第一节血型
* 一、ABO血型系统
* 二、Rh血型系统
* 三、其他血型系统
? 第二节交叉配血
定义
? 血型：
* 血液成分遗传多态性
* 人体各种细胞和各种体液成分抗原性差异
? 血型系统：由若干个相应关联的抗原抗体组成的血型体系
第一节血型
一、ABO血型系统
(一)ABO血型分类和命名
分类：根据红细胞上A，B两种抗原及抗体
? 血 型 RBC上抗原血清中抗体
? AA 抗B
? BB 抗A
? O- 抗A,抗B
? AB AB-
? 命名：
? 1996年ISBT：6位数记述式
? 6位数字的前3位：某一种血型
* 001 ：ABO
? 6位数字的后3位：该血型抗原特异性
* 001001、001002、001003、001004
*A抗原、 B抗原、 AB抗原A1抗原
(二)ABO血型系统遗传：
? "三复等位基因"学说：
* 第九号染色体上A 、B、O、三种等位基因控制
* A、B基因：显性基因
* O基因：隐性基因
? 父母双方各遗传给子代一个基因，具6个基因型，4种表型。
ABO血型的遗传
ABO血型的遗传
(三)ABO血型系统抗原
1.ABO血型系统抗原性质及结构
? 完全抗原：由多肽和糖类组成的糖蛋白
* 多肽:抗原性，糖链:特异性
? 抗原：A、B和H三种，分别受A、B和H基因间接控制
? H抗原：
* 形成A、B抗原的结构基础
* H物质：H抗原存在于ABO各型红细胞上，以O型红细胞最多。
* H物质抗原性弱，血清中无抗H抗体。
ABO抗原的生物合成
? 基因ABO及H控制着A、B抗原的形成，O基因为无效基因.
? H抗原
? H抗原
? 如果H物质上既不连接N-乙酰半乳糖胺，又不连接半乳糖，则仅有H活性，没有A、B活性(为O型)
2.ABO血型系统抗原产生
及存在部位
? 产生：
* 胎儿可产生ABH抗原
* 出生时抗原的抗原性弱
* 20岁左右时达高峰
* 老年的抗原性下降
ABO分泌型：
? ABH抗原不仅存在许多细胞上，还可分泌于许多体液中，体液中的可溶性ABH抗原又称为"血型物质"。
? 凡体液中有血型物质者为分泌型，无血型物质者为非分泌型
血型物质存在的意义：
? ①辅助鉴定血型
? ②中和ABO血型系统中的"天然抗体"
? ③检查羊水，预测胎儿ABO血型等。
二、ABO系统抗体
? 1.抗A、抗B抗体
? 2. 抗A、B抗体O型人血清中不仅有抗A、抗B抗体，还含有一种抗A、B抗体。
2.抗体产生
? 出生后3~6个月才开始出现，青春期达高峰。
? 产生抗体的功能可持续终身，效价随年龄增高而逐渐降低。
? 新生儿血清中可检测出的抗体常是来自母体的IgG，偶尔也有胎儿自身产生的IgM。
? ABO血型抗体滴度变化大：
* O型人抗A滴度高于B型人
* B型人的抗A 又高于A型人中的抗B
(五)ABO系统亚型
? 亚型是指同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数有一定差异所引起的变化。
? ABO血型系统中以A亚型最多见，A抗原的两个主要亚型是A1和A2 。
检查亚型的目的
? 防止误定血型，避免输血反应
* ①A1与A2之间输血可能引起输血反应
* ②亚型抗原性弱，易漏检或误定
(六)孟买型首先在孟买发现而得名
? 没有H抗原的O型
? 基因型为hh，表现型为Oh
? 红细胞和唾液中无H、A和B抗原，但血清中含有抗A、抗B和高效价的抗H抗体
? 除与AB型红细胞发生反应外，还可与O型红细胞凝集
? 如输血，只输oh同型血
(七)ABO血型鉴定
? 检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判断血型。
? 常规的方法包括正向定型与反向定型
* 正定型：已知抗体特异性的血清检查红细胞抗原
* 反定型：已知血型红细胞检查血清抗体
ABO血型鉴定常用方法
? 盐水凝集法
? 凝胶微柱法
1.盐水凝集法
?ABO血型抗体一般IgM，属为完全抗体
? IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表面排斥力，同时分子量较大，它能与相应抗原特异性结合，在生理盐水中发生肉眼可见的凝集现象。
? 简便，不需要特殊仪器
? ①玻片法：
* 操作简单，不需要离心，适于大规模血型普查
* 反应时间长，易忽略较弱的凝集而导致定型错误。不适于反定型。
? ②试管法：
* 需时间短
* 适用于急诊定型。
* 可发现亚型或较弱抗原抗体反应，结果判断可靠，为常规检查方法。
2.凝胶微柱法
? 凝胶具有分子筛效应和亲合效应
? 亲合效应：红细胞抗原与相应抗体结合
? 分子筛效应：低速离心后，凝集红细胞悬浮在凝胶中，而未被抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部。
? 结果观察：
* 肉眼/血型分析仪
? 操作标准化，结果特异、准确可靠，重复性好、灵敏度高。
? 可手工、半自动及全自动操作
? 不足之处：
* 需要特殊试剂和离心机
* 成本较高。
红细胞的常规ABO定型
红细胞的常规ABO定型
【质量控制】
? 1.标准血清质量必须符合要求
? 2.反定型时应注意被检者血清标本问题
? 3.要注意被检查红细胞标本问题
? 4.器材质量控制
? 5.分析中的质量控制
? 6.分析后质量控制
1.标准血清质量
人ABO血型：血清抗体 / 单克隆抗体
? ①高度特异
? ②高效性
* 抗A〉1：128
* 抗B 〉1：64
? ③高亲和力
? ④无冷凝集素/稳定性
? ⑤无菌
? ⑥灭活补体
2.反定型的血清问题
? ①标本新鲜，严防污染
? ②婴儿及老年人血清中ABO抗体效价较低，反定型时可出现不凝集或弱凝集。
? ③冷凝集素干扰血型鉴定。
? ④疾病影响：
* 丙种球蛋白缺乏症：血清中缺乏抗A、抗B而不出现凝集或弱凝集
* 某些肝病和多发性骨髓瘤：血清球蛋白增高引起假凝集。
3.正定型的红细胞问题
? ①标本新鲜，严防污染
? ②肠道细菌感染，红细胞出现类B抗原，与抗B血清凝集。
? ③抗原位点过少/弱/消失：
* 婴幼儿、老年人
* 白血病或恶性肿瘤
? ④血浆成分：可能影响鉴定结果，要用盐水多次洗涤红细胞。
? 4.器材质量控制
? 5.分析中的质量控制
? 6.分析后质量控制
? ABO血型鉴定错误可以引起严重的后果。
? 鉴定结果错误因素主要有技术问题及ABO血型本身的问题
鉴定结果错误因素：操作原因
? 1.用了不洁的玻璃器皿或污染的血清、红细胞。
? 2.红细胞与血清的比例不当，以及过度离心或离心不足可引起假阴性或假阳性。
? 3.将溶血误认为阴性结果。
? 4.温度过高造成假阴性。
? 5.搞错标本或试剂等
鉴定结果错误因素：血型的问题
? 1.患者未产生ABO抗体或抗体被抑制
? 2.被检查红细胞异常
? 3.被检者血浆成分异常
1.患者未产生ABO抗体或抗体被抑制：
? ①新生儿
? ②老年人
? ③白血病、淋巴瘤以及使用免疫抑制药患者
? ④先天性丙种球蛋白缺乏症
? ⑤骨髓移植患者等。
2.被检查红细胞异常
? ①弱A或弱B亚型
? ②白血病时可使A或B抗原减弱，而误定为O型
? ③霍奇金病也有类似白血病的情况
? ④获得性B或获得性A表现等。
3.被检者血浆成分异常
? ①某些疾病如多发性骨髓瘤、霍奇金肉瘤时，可使血浆纤维蛋白原水平升高易形成钱串状物，外观类似凝集；
? ②应用血浆扩容剂如低分之右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮，也 能引起钱串状假凝集；
? ③有些疾病如胃癌、胰腺癌等，血浆可有过多的可溶性血型物质，中和了试剂中抗A或抗B。
ABO血型检查的临床意义
? 1.输血
? 2. 新生儿溶血病
? 3.器官移植
? 4. ABO血型与疾病有关
二、Rh血型系统
? 定义:
? 红细胞含有与恒河猴(Rhesus monkey)红细胞相同的抗原，取名为Rh抗原。
(一)Rh血型系统的命名
? Fisher-Race的CDE表述
* 简单易懂，临床常用。
? Wiener假说(Rh-hr命名)
? Rosenfield等人提出的基因数字表达
* ISBT红细胞抗原命名专业组：以Rosenfield的表述为基础规范了Rh血型的字母/数字表示方式。
Rh抗原及亚型
? 1.Rh抗原
* 已发现40多种，与临床关系密切的有5种
* 依其抗原性强弱排列：为D>E>C>c>e5种
* 临床上将含D抗原者为Rh阳性，无D抗原者为Rh阴性。
Rh抗原亚型
? Du ：弱D抗原，通常用抗D血清作凝集实验时为阴性或反应很弱。
? -D-(缺失型) 缺少E/e或既缺E/e,又缺C/c,只表现D。
? Rhnulll缺少全部Rh抗原
(三)Rh血型抗体
? 1.Rh抗体产生
? 极少数是天然抗体，如抗E、抗CW
? 绝大多数：免疫性抗体
? 2.Rh抗体种类
? 5种，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e
? 最常见的是抗D，其余4种依次为抗E、抗c、抗C、抗e。
Rh血型鉴定常用的方法
? 1.酶介质法
? 2.低离子强度盐水实验
? 3.抗人球蛋白法(Coombs实验)
? 4.聚凝胺法
? 5.人源盐水介质抗D试验
Rh血型系统的临床意义
(六)交叉配血
? 供血者红细胞与受血者血清反应(主侧交叉配血)
? 受血者红细胞与供血者血清反应(次侧交叉配血)
? 其目的是检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的情况。
交叉配血方法
? 室温盐水配血法:
缺点:只检出不相配合的完全抗体，而不能检出不完全抗体
聚凝胺配血法
? 聚凝胺法：可以检出IgM与IgG两种性质的抗体，能发现引起溶血性输血反应的决大多数抗体。
? 聚凝胺配血法的原理：聚凝胺是带有高价阳离子的多聚季氨盐，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，减少细胞间排斥力，缩小了其间之距离，有利于红细胞产生凝集。......（后略) ......
血型(blood group)
第四章血型检验
? 第一节血型
* 一、ABO血型系统
* 二、Rh血型系统
* 三、其他血型系统
? 第二节交叉配血
定义
? 血型：
* 血液成分遗传多态性
* 人体各种细胞和各种体液成分抗原性差异
? 血型系统：由若干个相应关联的抗原抗体组成的血型体系
第一节血型
一、ABO血型系统
(一)ABO血型分类和命名
分类：根据红细胞上A，B两种抗原及抗体
? 血 型 RBC上抗原血清中抗体
? AA 抗B
? BB 抗A
? O- 抗A,抗B
? AB AB-
? 命名：
? 1996年ISBT：6位数记述式
? 6位数字的前3位：某一种血型
* 001 ：ABO
? 6位数字的后3位：该血型抗原特异性
* 001001、001002、001003、001004
*A抗原、 B抗原、 AB抗原A1抗原
(二)ABO血型系统遗传：
? "三复等位基因"学说：
* 第九号染色体上A 、B、O、三种等位基因控制
* A、B基因：显性基因
* O基因：隐性基因
? 父母双方各遗传给子代一个基因，具6个基因型，4种表型。
ABO血型的遗传
ABO血型的遗传
(三)ABO血型系统抗原
1.ABO血型系统抗原性质及结构
? 完全抗原：由多肽和糖类组成的糖蛋白
* 多肽:抗原性，糖链:特异性
? 抗原：A、B和H三种，分别受A、B和H基因间接控制
? H抗原：
* 形成A、B抗原的结构基础
* H物质：H抗原存在于ABO各型红细胞上，以O型红细胞最多。
* H物质抗原性弱，血清中无抗H抗体。
ABO抗原的生物合成
? 基因ABO及H控制着A、B抗原的形成，O基因为无效基因.
? H抗原
? H抗原
? 如果H物质上既不连接N-乙酰半乳糖胺，又不连接半乳糖，则仅有H活性，没有A、B活性(为O型)
2.ABO血型系统抗原产生
及存在部位
? 产生：
* 胎儿可产生ABH抗原
* 出生时抗原的抗原性弱
* 20岁左右时达高峰
* 老年的抗原性下降
ABO分泌型：
? ABH抗原不仅存在许多细胞上，还可分泌于许多体液中，体液中的可溶性ABH抗原又称为"血型物质"。
? 凡体液中有血型物质者为分泌型，无血型物质者为非分泌型
血型物质存在的意义：
? ①辅助鉴定血型
? ②中和ABO血型系统中的"天然抗体"
? ③检查羊水，预测胎儿ABO血型等。
二、ABO系统抗体
? 1.抗A、抗B抗体
? 2. 抗A、B抗体O型人血清中不仅有抗A、抗B抗体，还含有一种抗A、B抗体。
2.抗体产生
? 出生后3~6个月才开始出现，青春期达高峰。
? 产生抗体的功能可持续终身，效价随年龄增高而逐渐降低。
? 新生儿血清中可检测出的抗体常是来自母体的IgG，偶尔也有胎儿自身产生的IgM。
? ABO血型抗体滴度变化大：
* O型人抗A滴度高于B型人
* B型人的抗A 又高于A型人中的抗B
(五)ABO系统亚型
? 亚型是指同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数有一定差异所引起的变化。
? ABO血型系统中以A亚型最多见，A抗原的两个主要亚型是A1和A2 。
检查亚型的目的
? 防止误定血型，避免输血反应
* ①A1与A2之间输血可能引起输血反应
* ②亚型抗原性弱，易漏检或误定
(六)孟买型首先在孟买发现而得名
? 没有H抗原的O型
? 基因型为hh，表现型为Oh
? 红细胞和唾液中无H、A和B抗原，但血清中含有抗A、抗B和高效价的抗H抗体
? 除与AB型红细胞发生反应外，还可与O型红细胞凝集
? 如输血，只输oh同型血
(七)ABO血型鉴定
? 检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判断血型。
? 常规的方法包括正向定型与反向定型
* 正定型：已知抗体特异性的血清检查红细胞抗原
* 反定型：已知血型红细胞检查血清抗体
ABO血型鉴定常用方法
? 盐水凝集法
? 凝胶微柱法
1.盐水凝集法
?ABO血型抗体一般IgM，属为完全抗体
? IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表面排斥力，同时分子量较大，它能与相应抗原特异性结合，在生理盐水中发生肉眼可见的凝集现象。
? 简便，不需要特殊仪器
? ①玻片法：
* 操作简单，不需要离心，适于大规模血型普查
* 反应时间长，易忽略较弱的凝集而导致定型错误。不适于反定型。
? ②试管法：
* 需时间短
* 适用于急诊定型。
* 可发现亚型或较弱抗原抗体反应，结果判断可靠，为常规检查方法。
2.凝胶微柱法
? 凝胶具有分子筛效应和亲合效应
? 亲合效应：红细胞抗原与相应抗体结合
? 分子筛效应：低速离心后，凝集红细胞悬浮在凝胶中，而未被抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部。
? 结果观察：
* 肉眼/血型分析仪
? 操作标准化，结果特异、准确可靠，重复性好、灵敏度高。
? 可手工、半自动及全自动操作
? 不足之处：
* 需要特殊试剂和离心机
* 成本较高。
红细胞的常规ABO定型
红细胞的常规ABO定型
【质量控制】
? 1.标准血清质量必须符合要求
? 2.反定型时应注意被检者血清标本问题
? 3.要注意被检查红细胞标本问题
? 4.器材质量控制
? 5.分析中的质量控制
? 6.分析后质量控制
1.标准血清质量
人ABO血型：血清抗体 / 单克隆抗体
? ①高度特异
? ②高效性
* 抗A〉1：128
* 抗B 〉1：64
? ③高亲和力
? ④无冷凝集素/稳定性
? ⑤无菌
? ⑥灭活补体
2.反定型的血清问题
? ①标本新鲜，严防污染
? ②婴儿及老年人血清中ABO抗体效价较低，反定型时可出现不凝集或弱凝集。
? ③冷凝集素干扰血型鉴定。
? ④疾病影响：
* 丙种球蛋白缺乏症：血清中缺乏抗A、抗B而不出现凝集或弱凝集
* 某些肝病和多发性骨髓瘤：血清球蛋白增高引起假凝集。
3.正定型的红细胞问题
? ①标本新鲜，严防污染
? ②肠道细菌感染，红细胞出现类B抗原，与抗B血清凝集。
? ③抗原位点过少/弱/消失：
* 婴幼儿、老年人
* 白血病或恶性肿瘤
? ④血浆成分：可能影响鉴定结果，要用盐水多次洗涤红细胞。
? 4.器材质量控制
? 5.分析中的质量控制
? 6.分析后质量控制
? ABO血型鉴定错误可以引起严重的后果。
? 鉴定结果错误因素主要有技术问题及ABO血型本身的问题
鉴定结果错误因素：操作原因
? 1.用了不洁的玻璃器皿或污染的血清、红细胞。
? 2.红细胞与血清的比例不当，以及过度离心或离心不足可引起假阴性或假阳性。
? 3.将溶血误认为阴性结果。
? 4.温度过高造成假阴性。
? 5.搞错标本或试剂等
鉴定结果错误因素：血型的问题
? 1.患者未产生ABO抗体或抗体被抑制
? 2.被检查红细胞异常
? 3.被检者血浆成分异常
1.患者未产生ABO抗体或抗体被抑制：
? ①新生儿
? ②老年人
? ③白血病、淋巴瘤以及使用免疫抑制药患者
? ④先天性丙种球蛋白缺乏症
? ⑤骨髓移植患者等。
2.被检查红细胞异常
? ①弱A或弱B亚型
? ②白血病时可使A或B抗原减弱，而误定为O型
? ③霍奇金病也有类似白血病的情况
? ④获得性B或获得性A表现等。
3.被检者血浆成分异常
? ①某些疾病如多发性骨髓瘤、霍奇金肉瘤时，可使血浆纤维蛋白原水平升高易形成钱串状物，外观类似凝集；
? ②应用血浆扩容剂如低分之右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮，也 能引起钱串状假凝集；
? ③有些疾病如胃癌、胰腺癌等，血浆可有过多的可溶性血型物质，中和了试剂中抗A或抗B。
ABO血型检查的临床意义
? 1.输血
? 2. 新生儿溶血病
? 3.器官移植
? 4. ABO血型与疾病有关
二、Rh血型系统
? 定义:
? 红细胞含有与恒河猴(Rhesus monkey)红细胞相同的抗原，取名为Rh抗原。
(一)Rh血型系统的命名
? Fisher-Race的CDE表述
* 简单易懂，临床常用。
? Wiener假说(Rh-hr命名)
? Rosenfield等人提出的基因数字表达
* ISBT红细胞抗原命名专业组：以Rosenfield的表述为基础规范了Rh血型的字母/数字表示方式。
Rh抗原及亚型
? 1.Rh抗原
* 已发现40多种，与临床关系密切的有5种
* 依其抗原性强弱排列：为D>E>C>c>e5种
* 临床上将含D抗原者为Rh阳性，无D抗原者为Rh阴性。
Rh抗原亚型
? Du ：弱D抗原，通常用抗D血清作凝集实验时为阴性或反应很弱。
? -D-(缺失型) 缺少E/e或既缺E/e,又缺C/c,只表现D。
? Rhnulll缺少全部Rh抗原
(三)Rh血型抗体
? 1.Rh抗体产生
? 极少数是天然抗体，如抗E、抗CW
? 绝大多数：免疫性抗体
? 2.Rh抗体种类
? 5种，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e
? 最常见的是抗D，其余4种依次为抗E、抗c、抗C、抗e。
Rh血型鉴定常用的方法
? 1.酶介质法
? 2.低离子强度盐水实验
? 3.抗人球蛋白法(Coombs实验)
? 4.聚凝胺法
? 5.人源盐水介质抗D试验
Rh血型系统的临床意义
(六)交叉配血
? 供血者红细胞与受血者血清反应(主侧交叉配血)
? 受血者红细胞与供血者血清反应(次侧交叉配血)
? 其目的是检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的情况。
交叉配血方法
? 室温盐水配血法:
缺点:只检出不相配合的完全抗体，而不能检出不完全抗体
聚凝胺配血法
? 聚凝胺法：可以检出IgM与IgG两种性质的抗体，能发现引起溶血性输血反应的决大多数抗体。
? 聚凝胺配血法的原理：聚凝胺是带有高价阳离子的多聚季氨盐，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，减少细胞间排斥力，缩小了其间之距离，有利于红细胞产生凝集。......（后略) ......
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